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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌OmLA-PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumo niae,APP)旧称胸膜肺炎嗜血杆菌(Haemophilus pleuropneunmniae,HP),是一种能引起猪出血性、化脓性、纤维素性胸膜肺炎的高度传染性、致死性病原菌,能引起各个年龄阶段的猪发生急性或慢性感染。目前,人们采取了很多措施和方法来控制和预防该病,但结果都不太理想。对该病的诊断主要有病原学方法、血清学方法和分子生物学方法。病原学方法费时费力。由于胸膜肺炎放线杆菌有多个血清型,各血清型之间没有很好的交叉反应,且有些呈隐性感染,因此影响了血清学方法的准确性。目前,分子生物学方法已广泛用于病原的诊断,为快速诊断疫病奠定了基础。 相似文献
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将小鹅瘟病毒(Goose Parvovims,GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6、3、1μg的剂量基因枪轰击免疫4周龄BALB/c小鼠,于免疫后不同时间采集小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠、脑和免疫部位皮肤等组织,用原位杂交方法检测pcDNA-GPV-VF3在小鼠体内的分布规律.结果显示,pcDNA-GPV-VP3在免疫后1 h即分布于小鼠除脑外各个组织,脑组织于免疫后3 h呈阳性,各组织阳性信号随时间的推移逐渐减弱;pcDNA-GPV-VP3在不同组织中持续时间依次为肝脏>心>脾>免疫部位>肾、肠>肺>脑;pcDNA-GPV-VF3不同剂量组信号强弱和持续时间存在的总体规律依次为6μg组>3 μg组>1μg组.基因枪轰击pcDNA-GPV-VP3于免疫后能快速而广泛的分布于小鼠各个组织且持续存在达63 d. 相似文献
45.
用PCR方法扩增猪圆环病毒PCVwhn株编码CAP蛋白的基因ORF2,同时人工合成一段CpG序列,并设计上下游引物,进行扩增,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建新型核酸疫苗(pcDNA-PCV-ORF2-ISS),并进行了酶切和测序鉴定.用构建的pcDNA-PCV-ORF2-ISS质粒以及pcDNA-PCV-ORF2与5种细胞因子分子佐剂质粒(IL-6/4、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ真核表达质粒)联合对仔猪进行免疫试验.免疫后用间接ELISA法测定猪圆环病毒Ⅱ型特异性抗体IgG,用流式细胞仪测定猪血液CD3+、CD4+和CD8+T细胞亚类的数量.结果显示,成功构建含CpG免疫刺激序列的猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗;pcDNA-PCV-ORF2-ISS在仔猪免疫实验能诱导细胞免疫并产生特异性抗体(P<0.05);用5种细胞因子分子佐荆质粒与pcDNA-PCV-ORF2疫苗同时免疫能显著提高DNA疫苗的免疫效果(P<0.05).分子佐剂免疫增强效果次序为:IL-6、CpG、IL-6/4、IL-2、IL-4和IFN-γ,表明IL-6和CpG最佳. 相似文献
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根据NCBI中已报道的嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,对两株来源于猪“高热病”病料中的疑似嗜麦芽窄食单胞菌PSM-5、PSM-6进行PCR扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,并转化到DH5α中。抽取质粒模板,进行PCR和双酶切鉴定并测序,从分子水平上予以鉴定。两株菌的16S rDNA基因扩增片段的核苷酸序列(GenBank登录号为GQ267816和GQ267817)与已经报道的嗜麦芽窄食单胞菌分离株的16S rDNA序列的相似性均在96.78%以上,最高达99.93%。本试验对通过16S rDNA鉴定嗜麦芽窄食单胞菌提供一定参考,同时对猪“高热病”的诊断治疗奠定细菌学方面的基础,对其发病机制的探讨提供依据。 相似文献
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沙罗拉纳(sarolaner)属异恶唑啉类化合物,是一种新型广谱杀虫药。沙罗拉纳已被证实通过特异性阻断昆虫γ-氨基丁酸受体和谷氨酸门控氯离子通道而显示出抗寄生虫活性。本文综述了近年来沙罗拉纳在国外伴侣动物体外寄生虫防治中的开发及临床应用情况,旨在为该药的深入研究和国内开发应用提供参考。近年来,该药主要用于犬猫等伴侣动物体外寄生虫的临床预防和治疗,对蜱类、蚤类、螨类等体外寄生虫有高效的杀灭作用。与其他杀虫药相比,该药在分子结构、作用位点和选择性等方面有显著差异,具有杀虫活性强、治疗剂量低、安全性高等优点。此外,该药通过与多种药物联合应用,可提高治疗效果,扩大治疗范围。就国外研究来看,沙罗拉纳是一种安全广谱的高效杀虫剂,拥有广阔的应用前景。 相似文献