西班牙及意大利南部柑桔考察报告

由农业部种植业管理司牵头 ,农业部科教司和财务司、全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院柑桔研究所、华中农业大学、重庆市农业局和湖南省农业厅参加的柑桔技术考察团一行 10人 ,于2 0 0 2年 10月 14— 2 7日对西班牙及意大利南部的柑桔产业进行了考察。在西班牙 ,参观了瓦伦西亚地区农业研究所、FOMESA柑桔公司的鲜果分级包装厂、一个典型的柑桔农场、AVASA柑桔育苗协会的柑桔无病毒母本园及苗圃。此外 ,还参观了在瓦伦西亚举行的欧共体农业博览会 ,并考察了巴塞罗那农贸市场的柑桔销售窗口。在意大利 ,参观访问了意大利南部巴…     

柑橘疮痂病研究进展

柑橘疮痂病是一种重要的柑橘真菌性病害，1994年曾在我国温州蜜柑产区爆发，给当地柑橘产业造成了严重的经济损失。且该病害在我国分布广泛，危害较重。为了进一步掌握该病的发生发展规律、设计有效的防治手段。本文对柑橘疮痂病发病症状、病原、流行因素、病害鉴定、防治方法等方面进行了概述。     

柑桔木质陷孔病——一种柑桔生产上值得重视的类病毒病害

柑桔木质陷孔病是世界柑桔生产上一种重要的类病毒病害,主要为害宽皮柑桔及宽皮柑桔的某些杂种.虽然我国此前未报道有该病的发生,但近年来应用分子检测技术在我国部分柑桔产区已检测到该病的病原.本文简述了木质陷孔病的发生分布、病原、致病机理及我国的研究进展,以期引起各级生产部门重视,并为该病防控提供依据.     

柑橘黄化脉明病毒和衰退病毒的二重RT-PCR检测体系的建立与应用

选用柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)和柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)两种病毒外壳蛋白保守序列及内参基因Ubiquitin的特异性引物,优化影响二重RT-PCR反应的Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度和退火温度,建立了针对两种病毒的一步法二重RT-PCR检测体系。二重RT-PCR获得CYVCV、CTV及Ubiquitin的特异性片段大小分别为614、373和194 bp,克隆测序和序列对比结果显示它们与已报道的病毒序列具有较高的同源性。该体系最低能从40 ng·μL~(-1)总核酸中检测出CYVCV,从4 ng·μL~(-1)总核酸中检测出CTV,其灵敏度与单一RT-PCR检测灵敏度一致。利用该体系对33份田间样品进行检测,CYVCV和CTV感染率分别为54.5%和66.7%,复合侵染率高达36.4%。该一步法二重RT-PCR技术体系可用于大量田间样品中CYVCV和CTV的快速同步检测。     

柑桔木质陷孔病 —一种柑桔生产上值得重视的类病毒病害

柑桔木质陷孔病是世界柑桔生产上一种重要的类病毒病害，主要为害宽皮柑桔及宽皮柑桔的某些杂种。虽然我国此前未报道有该病的发生，但近年来应用分子检测技术在我国部分柑桔产区已检测到该病的病原。本文简述了木质陷孔病的发生分布、病原、致病机理及我国的研究进展，以期引起各级生产部门重视，并为该病防控提供依据。     

柑桔溃疡病菌基因组DNA的微波法抽提及快速检测

利用微波热震惊提取固体表面柑桔溃疡病基因组DNA并加以优化,所得到的基因组DNA可作为PCR反应的模板进行16SrDNA基因有效扩增。与柑桔溃疡病基因组DNA其他抽提方法相比较,微波法更适用于该病的快速检测,具有快速、简便、费用低廉等特点,且对设备的要求不高,用特异性引物XCF/XCR可实现柑桔溃疡病菌的快速鉴定。     

柑桔碎叶病的检测及其防治

阐述了柑桔碎叶病在田间的表现症状以及利用生物学、血清学和分子生物学技术检测该病的方法;简要介绍了该病的防治措施.     

柑桔溃疡病菌PCR快速检验检疫技术研究

 柑桔溃疡病是严重影响全世界柑桔生产的重大检疫性病害,根据柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv. citri)新近公布的全基因组中独有的保守蛋白基因序列,设计筛选出一对种特异性引物(JYF5/JYR5),能专一地扩增检出柑桔组织表面所带溃疡病菌的DNA靶带(413 bp)。而柑桔叶面附生的非致病性黄单胞菌、野油菜黄单胞菌近缘种以及健康柑桔样品都不能扩增;靶细菌DNA检测下限1.56 pg/μL,靶细菌悬浮液检测下限10 cfu/μL;在不同PCR仪及各种控温方式下都能稳定地扩增出特征性靶带。这一特异、准确的柑桔溃疡病菌PCR检验技术和研制的预包被固相化PCR检测试剂盒已开始用于我国非疫生产区建设中柑桔苗木、果实的病害检疫检验。     

利用一步法RT-PCR检测柑橘裂皮病类病毒

 柑橘裂皮病(CEVd) 是限制柑橘产量的一种重要类病毒病害, 国内外已经建立了多种方法检测该病害的病原。本研究初步建立了快速灵敏检测CEVd的一步法RT-PCR技术。经过与生物学鉴定和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(sPAGE) 方法的比较检测, 表明该RT-PCR方法检测周期短, 灵敏度高, 有利于对类病毒在春季和冬季浓度低时进行快速准确的检测。应用该技术对大量田间寄主进行了检测。     

应用PCR技术快速检测柑桔溃疡病的研究

应用PCR检测柑桔溃疡病，所用引物为5′TTGGTG TCGTCGCTTGTAT 3′和5′CACGGGTGCAAAAAATCT 3′。从病样的叶片、果皮和枝皮抽提溃疡病菌核酸进行PCR扩增，其产物经琼脂糖凝胶电泳，产生大约220bp的特征条带，与纯培养溃疡病菌的PCR产物一致。试验比较两种核酸抽提方法，微量快速抽提法的灵敏度明显高于高盐抽提法。有症状病样品的不同部位均能检测到溃疡病；病株的无症状叶片、果皮、枝皮有部分检测到病菌。病果园健康植株大多数检测不到病菌，少数植株PCR产物电泳条带较弱。取样量以10～20mg为宜。该PCR技术可用于快速检测柑桔溃疡病。