海洋无脊椎动物多不饱和脂肪酸合成代谢机理研究进展

近年来,人们对水产品质量安全、优质的动物蛋白以及脂肪来源的关注度越来越高。海洋无脊椎动物不仅是优质食物蛋白的重要来源,也是人体获取多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFA）的主要食物来源。研究表明,几乎所有的PUFA都来自于水生生态系统中的初级生产者,海洋中主要初级生产者微藻生产出PUFA进入食物链后,较高营养级生物可通过生物转化或修饰产生新的PUFA。关于初级生产者和脊椎动物中PUFA合成代谢的研究较多,但位于两者之间无脊椎动物PUFA的生物合成代谢途径却知之甚少。因此,本文对五类海洋无脊椎动物（多孔动物、刺胞动物、软体动物、甲壳动物和棘皮动物）PUFA的合成代谢途径以及参与其过程中重要酶和关键基因的研究进展进行了总结,以期为更深入地理解海洋无脊椎动物PUFA的合成代谢与调控体系提供有价值的参考资料。     

马粪海胆的染色体制备及组型分析

采用改进的染色体制备方法,分别对马粪海胆Hem icentrotus pulcherrimus受精卵的二细胞期、八细胞期和囊胚早期的细胞进行染色体制备,结果显示,于囊胚早期取样的马粪海胆,其滴片效果最好。通过组型分析确定马粪海胆的染色体数目为2n=42,组型公式为2n=42=20m 20 sm 2 s。t     

杂色角孔海胆形态学观察、亲缘关系及性腺营养成分分析

本研究以杂色角孔海胆(Salmacis sphaeroides variegate)为研究材料，观察其形态，基于线粒体16S rDNA基因部分序列分析杂色角孔海胆与其他棘皮动物的亲缘关系，同时分析杂色角孔海胆性腺中的营养成分，为杂色角孔海胆种质改良和资源评估积累数据。结果显示，杂色角孔海胆的主要形态特征具有口器较小，每个步带板的外缘有3~4个小的圆形凹孔，管足壁内的骨片为C形。通过Mega 5.0对其他棘皮动物和得到的杂色角孔海胆的线粒体16S rDNA基因部分序列进行比较，基于距离法(NJ)和最大似然法(MP)分别构建系统树。结果显示，杂色角孔海胆与疏棘角孔海胆(Salmacis bicolor rarispina)的亲缘关系最近，其次是刻肋海胆属的3种海胆；杂色角孔海胆性腺中水分为86.1%，灰分为3.0%，粗脂肪为2.0%，蛋白质为8.01%；杂色角孔海胆性腺中的氨基酸种类共有16种，总含量为38.71 g/100 g，EAA/TAA为36.99%，EAA/NEAA为71.84%，DAA/TAA为37.17%；脂肪酸共检测到15种，含量最高的是棕榈酸C16:0、硬脂酸C18:0、EPA C20:5和花生四烯酸C20:4，含量最低的为二高-γ-亚麻酸C20:3，较其他海胆，其DHA含量较高。研究结果将为杂色角孔海胆的生物学研究提供基本资料，可用于经济海胆开发应用，同时也可为远缘杂交育种及经济海胆的种质鉴定提供理论依据。     

经纬仪配合光电测距仪进行小型隧洞控制测量

小型隧洞平面控制测量，测区地形复杂，测量条件差。经纬仪配合光电测距仪进行测量，具有速度快、精度高的效果。     

用流式细胞仪检测活体鲍倍性

分别取皱纹盘鲍（Ｈａｌｉｏｔｉｓ ｄｉｓｃｕｓ ｈａｎｎａｉ）足肌和血液制样，经ＤＡＰＩ染色后，用ＰａｒｔｅｃＰＡＳ－Ⅲ型流式细胞仪测定其倍性，试验证明三倍体鲍的ＤＮＡ相对含量是二保体的１．５倍，切足法和抽取血液法两种制样方法均得到满意结果，用流式细胞仪法检测鲍倍性适应鲍多倍体产业化的需要。     

黄、渤海春季刺参肠道及养殖池塘细菌菌群的多样性

以黄海和渤海春季刺参养殖池塘的沉积物、海水和刺参Apostichopus japonicus肠道内容物中的细菌基因组DNA为模板,以细菌16S rDNA通用引物进行PCR扩增,构建16S rDNA文库并进行测序分析。结果表明：黄海和渤海养殖刺参肠道内容物、池塘沉积物和海水中共存在变形菌Proteobacteria、蓝细菌门Cy：anobacteria、放线菌门Actinobacteria、拟杆菌门Bacteroidetes和厚壁菌门Firmicutes 5个门类的细菌类群,其优势类群均为变形菌(变形菌比例>41%),且在文库所含变形菌的4个亚门( Alphaproteobacteria、 Betap：roteobacteria、 Gammaproteobacteria、 Deltaproteobacteria)中,除黄海春季刺参养殖池塘海水文库(YSp3)中α-变形菌占优势外,其余5个文库均以γ-变形菌为优势亚门。     

硬壳蛤的人工育苗技术

硬壳蛤 (Mercenariamercenaria)亲贝于 2 0 0 0年由美国引入大连 ,采用阴干和温度变化刺激对其进行人工催产 ,亲贝诱导排放比例可达 80 %。水温 18～ 2 6℃ ,2 0 .5～ 2 4 0h胚胎发育到面盘幼虫 ,孵化率达 94 %。浮游幼虫前期饵料以湛江等鞭金藻 (Iscochrysiszhanjiangensis)为主 ,逐渐添加新月菱形藻 (Nizschiaclosterium) ,后期以新月菱形藻为主。硬壳蛤幼虫温度、盐度的适宜范围分别为 19～ 2 7℃、2 5 .0～ 3 3 .6。饵料以混合投喂效果最佳 ,湛江等鞭金藻次之。浮游幼虫培养 12～ 17d ,幼虫壳长达 2 0 0～ 2 10 μm ,采用在培养池底铺砂做附着基 ,幼虫变态率达 2 1% ,稚贝培养 3 0d后可达 1mm左右     

烟草抗苯磺隆变异体的筛选及变异体种子活力测定

采用组织培养技术,将烟草(NC-82)叶片诱导产生的胚性愈伤组织转移到加有半致死浓度苯磺隆的Murashige-Skoog(MS)培养基上,经3代筛选,获得抗苯磺隆愈伤组织。抗性愈伤组织在加有苯磺隆的分化培养基上分化出植株。再生植株移栽成活后,对获得的再生植株种子与对照种子活力及抗性指数进行检测。结果表明:苯磺隆诱导再生植株种子与对照种子的简化活力指数分别为10.81和9.53;过氧化物酶活力分别为47.36和29.44 U·g-1·min-1,酸性磷酸酯酶活力分别为2.927和2.447 nmol·g-1·min-1。潜在抗性趋势检测表明,再生植株种子对苯磺隆的抗性显著提高,抗性指数为3.18。再生种苗和对照种苗的乙酰乳酸合成酶活力分别为10.41和6.67 nmol·h-1·mg-1。     

九孔鲍不同器官DNA相对含量与细胞周期的分析

应用流式细胞术测定了30只九孔鲍Haliotis diversicolor supertexte不同器官DNA的相对含量,比较了各器官的细胞周期差异。结果表明,相同条件下生长的2龄九孔鲍足、上足触手、上足、头触角、外套膜、鳃和眼柄组织的DNA含量存在差异,其中头触角的DNA含量较外套膜组织低15．19％。从各器官细胞周期的时相比例分析看,九孔鲍各器官细胞的同步性较好,G1期时相比例都高于80％,其中鳃G1期比例最高,达到88．62％,头触角中G2／M期时相比例最高,达到11．18％,不同器官各细胞时相的比例存在差异。     

不同季节刺参养殖池塘沉积物菌群结构及其影响因素

本研究以辽宁省营口地区刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘为研究对象,利用高通量测序技术,构建不同季节刺参养殖池塘沉积物菌群16S rRNA基因测序文库,解析刺参养殖池塘沉积物菌群的季节性差异和共性,查明影响沉积物菌群构成的主导环境因子。结果显示,营口地区刺参养殖池塘沉积物菌群的丰度和多样性以夏季最高,春秋次之,冬季最低。不同季节刺参养殖池塘沉积物差异菌群呈显著性季节演替特征(P<0.05)。其中,春季差异菌群主要隶属于拟杆菌门(Bacteroides),夏季差异菌群主要隶属于酸杆菌门(Acidobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)和浮霉菌门(Planctomycetes),秋季差异菌群主要隶属于厚壁菌门(Firmicutes),冬季差异菌群主要隶属于放线菌门(Actinobacteria)。尽管不同季节沉积物细菌组分比例不同,但第一优势菌门均隶属于变形菌门(Proteobacteria)(相对丰度>43.19%)。环境因子中,影响刺参养殖池塘沉积物菌群的主导环境因子为温度、总有机碳、总氮和pH。本研究将为刺参养殖池塘微生态调控提供理论参考。