神经肽S研究进展

神经肽S(Neuropeptide S,NPS)是2002年发现的一种神经肽,由20个氨基酸组成,因其氨基端残基在所有动物均为丝氨酸而得名。NPS通过其受体(NPSR)发挥作用,NPSR至少有2种,即NPSR-A和NPSR-B,属G蛋白藕联受体。NPS及其受体主要分布于脑内,在其他组织器官也有少量分布。NPS具有引起唤醒、增加觉醒、抑制各期睡眠、减少摄食、产生焦虑样行为反应和调节免疫功能等作用。     

巯基乙酸盐对猪血清游离脂肪酸水平的影响

用比色法研究了巯基乙酸盐(mercaptoacetate, MA) 对12 头青年母猪血清游离脂肪酸(FFA) 水平的影响。结果: 1- 与对照组相比, 每千克体重猪注射50 mg MA 对血清FFA 水平无明显影响; 2- 每千克体重猪注射100 mg MA 后6 h , 血清FFA 水平明显升高, 差异极显著( P < 0-001) ;3- 每千克体重猪注射200 mg MA 后3 h , 血清FFA 水平显著升高, 并维持在较高的水平直到实验结束( 给药后6 h) , 差异极显著( P < 0-001) 。实验结果表明, 一定剂量( 每千克体重100 mg 和200 mg) 的MA 能显著提高青年母猪血清FFA 水平, 可用作研究生长和生殖能量代谢调控的药物。     

仔猪前脑基底部内生长抑素mRNA的分布定位──原位杂交法研究

用原位杂交法研究了５只仔猪前脑基底部一些结构内生长抑素ｍＲＮＡ的分布。结果表明，生长抑素ｍＲＮＡ分布于尾状核、伏隔核、壳核、屏状核、隔核、杏仁核、嗅结节和梨状叶。含生长抑素ｍＲＮＡ的神经元胞体多呈卵圆形或梭形。尾状核和伏隔核内的标记细胞分布较均匀（尾状核前部未观察）。壳核、屏状核、梨状叶和嗅结节内的多位于深层。隔核和杏仁核内出现的标记细胞较少，隔核内的分布于隔外侧核。在猪体上的实验结果与用免疫组织化学法在绵羊和马体上获得的结果有一些差异。     

兔中枢神经内Orexin B免疫阳性神经纤维的分布

采用免疫组织化学方法研究了青紫蓝兔中枢神经系统（CNS）内orexin B免疫阳性纤维的分布。结果显示，orexin B免疫阳性神经纤维广泛分布于CNS内，在端脑分布于大脑皮质、隔核和杏仁核；在间脑分布于丘脑、下丘脑、上丘脑和垂体，主要分布于丘脑中线核和下丘脑；在中脑分布于中脑中央灰质、前丘、后丘、脚间核和中缝核；在脑桥分布于蓝斑、被盖背侧核和中缝核；在延髓分布于最后区、孤束核和迷走神经背侧运动核；在小脑和脊髓也有分布。兔CNS内orexin B免疫阳性纤维的分布与orexin A的基本相似，本试验结果为理解orexin B在兔体内的作用部位提供了形态学资料。     

Orexin B在猪中枢神经系统的分布定位

本试验采用免疫组织化学方法对10头苏钟猪中枢神经系统Orexin B的分布定位进行了研究。结果表明,Orexin B免疫阳性神经元和纤维在猪下丘脑、脑干和脊髓均有分布。在下丘脑,阳性神经元和纤维分布于视前区、视交叉上核、室旁核、室周核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、外侧区和后区,其中以穹隆周区、背内侧核、未定带和下丘脑后区分布较密集,以视前区、视交叉上核、下丘脑外侧区和乳头体核分布较稀少。在脑干,阳性神经元分布于蓝斑、前庭神经核、下橄榄核、孤束核和疑核。在脊髓,阳性神经元较少,主要分布于颈部脊髓背角第Ⅳ层。此外,在斜角带、隔区、终纹床核等部位观察到密集的阳性纤维分布。本试验为进一步研究Orexin B的生理功能奠定了基础。     

西尼罗病毒套式RT-PCR检测方法的建立

从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT-PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增,结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector中,进行序列测定,证实为WNV的基因。建立了套式RT-PCR检测方法,经各反应条件的优化后,发现2套nest-PCR引物能分别扩增出85个拷贝和62个拷贝的双链DNA,对乙型脑炎病毒、黄热病毒等11种病毒核酸进行扩增,发现具有良好的特异性,显示建立套式RT-PCR具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸WNV的检测和监测。     

人工感染猪伪狂犬病毒后猪体内神经介素U及其受体和细胞因子的变化

本试验旨在研究人工感染猪伪狂犬病毒(PRV)后猪体内神经介素U(NMU)及其受体和一些细胞因子表达的变化。将56头24日龄猪随机分为试验组和对照组,每组再分为6小组(0 d组、1 d组、3 d组、6 d组、9 d组和12 d组)。试验组猪以滴鼻法感染猪伪狂犬病毒,对照组鼻腔接种同体积生理盐水;分别于攻毒后对应天数处死各组的猪,采集其组织样品置于液氮中保存。采用RT-PCR研究了攻毒后不同时间点猪体内NMU及其受体基因的表达,同时用放射免疫分析法分析了细胞因子IL-1β、IL-6和IL-4的表达变化。结果发现,人工感染PRV后,首先是下丘脑的NMU及受体发生变化,其次是扁桃体和淋巴结的NMU及NMUR1的变化,并引起扁桃体、胸腺、淋巴结、下丘脑的IL-1β分泌量显著增加。结果提示,猪感染病原体后,可能影响NMU及其受体的变化,并可能通过此途径影响细胞因子IL-1β的变化,进而影响免疫系统的功能,参与疾病发生发展的过程。     

猪大脑皮质、海马结构、梨状叶和杏仁核内leptin长形受体mRNA的分布定位

用分子生物学的方法合成了leptin长形受体（Ob-Rb)反意和正意核酸探针，用原位杂交法研究了5头2-3月龄母猪端脑一些结构内Ob-Rb mRNA的分布定位。结果表明，猪Ob-Rb mRNA分布于大脑皮质、梨状叶、海马、齿状回和杏仁核。大脑皮质和梨状叶内的Ob-Rb mRNA标记神经元主要位于第Ⅱ-Ⅵ层，分子层偶见标记神经元。海马结构内的Ob-Rm mRNA标记神经元主要位于海马的锥体细胞层和齿状回的颗粒层，在海马的始层和齿状回的多形层偶见标记神经元，在海马的辐射层和腔隙层罕见标记细胞。实验结果弥补了猪端脑内Ob-Rb mRNA分布定位资料的空白，为理解leptin的生理功能提供了形态学基础。     

仔猪下丘脑内生长抑素mRNA的分布定位——原位杂交组织化学法研究

用原位杂交组织化学法研究了５只仔猪下丘脑内生长抑素ｍＲＮＡ的分布。结果表明，生长抑素ｚｎＲＮＡ主要见于下丘脑腹内侧核、穹窿周核、腹外侧核、弓状核、室旁核和室周核，此外在视交叉上核、视上核、下丘脑前区和后区偶见零散标记细胞。本研究结果与在绵羊和豪猪上用免疫组织化学法获得的结果略有不同，除与研究方法和种属差异有关外，还可能与实验动物年龄有关。     

仔猪子宫角传入神经的起源—HRP法研究

本实验用辣根过氧化物酶(HRP)法研究了仔猪子宫角传入神经的起源,结果如下: 一、标记细胞出现于T_(10)—S_3背根节,主要集中在L_2、L_3及S_1、S_2背根节。在注射子宫角前半部组、后半部组及全子宫角组,标记细胞出现的背根节范围基本相同。 二、标记细胞出现于双侧背根节,注射侧出现的标记细胞数明显多于对侧。这表明仔猪子宫角的感觉经双侧背根节传入脊髓,以同侧传入占优势。 三、标记细胞以小型为主,大、中型较少。它们混杂散在分布于整个背根节内。 四、胸腰部背根节出现的标记细胞数约为骶部的四倍,结状节中未出现标记细胞,表明猪子宫角的感觉主要经交感途径传入,小部分经副交感途径传入,不经迷走神经传入。