阿扎霉素F_(5a)抗南方根结线虫和香蕉枯萎病菌活性研究

为寻找抗线虫和香蕉枯萎病菌的天然产物。从链霉菌211726的发酵液中分离纯化出阿扎霉素F_(5a),以南方根结线虫(Meloidogyne incognita)为供试线虫,采用击倒实验,测定阿扎霉素F_(5a)高(1.0%)、中(0.1%)、低(0.01%)3个浓度的抗线虫活性;同时以尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)为供试菌株,采用牛津杯琼脂平板法,对阿扎霉素F5a的抗香蕉枯萎病活性进行研究。结果表明:1.0%的阿扎霉素F_(5a)溶液在24 h内对供试线虫2龄幼虫的平均校正击倒率和平均校正死亡率分别为86.1%和84.5%;0.01%的阿扎霉素F_(5a)溶液对供试线虫2龄幼虫平均校正击倒率和平均校正死亡率分别为57.2%和54.7%,20 mg/m L的阿扎霉素F_(5a)对尖孢镰刀菌的抑菌圈直径为2.93 cm。说明阿扎霉素F_(5a)对南方根结线虫2龄幼虫(J2)具有显著的毒杀作用,同时对香蕉枯萎病菌具有显著抑制作用,显示阿扎霉素F_(5a)在生物农药方面具有良好的研究和开发价值。     

猪苓原生质体制备及细胞再生研究

就猪苓原生质体制备的技术条件与细胞再生进行研究,结果表明,制备猪苓原生质体的最佳条件是采用12 d菌龄的菌丝体,2.66%蜗牛酶 1.33%纤维素酶为酶解液,酶解温度28℃,酶解时间6 h,稳定剂为0.010 9 g/m l甘露醇,pH值自然。在此条件下猪苓原生质体制备的产量为6.8×106个/m l。分离原生质体细胞再生频率为17.45%。     

药用植物虎杖内生菌的研究现状与应用展望

系统阐述了药用植物虎杖(Polygonum cuspidatum)内生菌的多样性、抑菌活性、次生代谢产物及生物转化等,并提出了亟待解决的问题,包括研究过于集中、研究方法较为单一、代谢产物尚待明确等。     

响应面法优化黑木耳新品种森盛1号液体发酵条件

为缩短黑木耳新品种森盛1号的液体种生产周期,提高菌丝体产量,拟为黑木耳液体种应用于生产提供技术参考,通过Plackett-Burman设计试验,筛选到葡萄糖含量、磷酸二氢钾含量、初始pH值为影响菌丝生物量的3个显著性因子,通过最陡爬坡试验得到其最佳相应区域,最后应用响应面Box-Behnken分析法和验证试验对森盛1号黑木耳菌株的液体发酵工艺进行优化。结果表明,森盛1号的最佳发酵工艺条件为马铃薯200.0 g/L、葡萄糖50.27 g/L、蛋白胨4.5 g/L、麦麸15.0 g/L、磷酸二氢钾4.93 g/L、七水硫酸镁1.0 g/L、初始pH值5.1、接种量4%、温度28.0℃、160 r/min摇床发酵8 d,菌丝干质量可达到21.57 g/L,比优化前提高了23.53%,误差仅为1.75%。该模型能准确地预测出菌丝体产量变化情况,证明响应面法优化黑木耳新品种森盛1号是有效可行的。     

耐高温萌发菌胞外酶活性与天麻种子萌发的关系

为探究耐高温萌发菌在模拟夏季高温条件下漆酶、木聚糖酶、淀粉酶和纤维素酶的活性与天麻种子萌发的关系。对4株萌发菌进行递增式耐高温驯化,采用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)法、二硝基水杨酸(DNS)法测定萌发菌胞外酶活性,水琼脂法进行天麻种子萌发试验。结果表明,各菌株之间的酶活性及各菌株之间天麻种子萌发率存在明显差异,经过驯化的耐高温萌发菌4种酶活性和天麻种子萌发率均极显著高于各自对应亲本萌发菌(P<0.01),其中漆酶、木聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶活性最高的分别是耐高温萌发菌SH-1、MDA-1、MDC-1、SH-1,酶活性依次为1 000.00、1062.35、402.90、40.91 U/L,天麻种子萌发率最高的是耐高温萌发菌SH-1,萌发率为71.76%,酶活性与天麻种子萌发率相关性最高的是木聚糖酶,相关系数为0.720。说明天麻种子萌发受温度、胞外酶种类及活性等多种因素共同调控,耐高温萌发菌表现出了更高的酶活性,促进天麻种子萌发,且木聚糖酶是影响天麻种子萌发的关键胞外酶。     

陕西佛坪木蹄层孔菌的挥发性成分及生物活性

为研究陕西佛坪木蹄层孔菌(Fomes fomentarius)中挥发性成分、抑菌及抗肿瘤细胞株A549的活性,采用索氏回流法用乙醚对木蹄层孔菌中的挥发性成分进行提取,通过气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer,简称GC-MS)技术对提取的挥发性成分进行分离、检测并分析其化学组分;利用滤纸片扩散法和CCK-8试剂盒法进行抑菌活性和对肿瘤细胞抑制效果的测定。结果显示,从木蹄层孔菌的提取物中共鉴定出7种主要化学成分[酞酸二乙酯(37.82%)、十八烷醛(32.83%)、壬醛(11.98%)、9(11)-脱氢麦角酰苯甲酸酯(9.87%)等],占总挥发性成分的99.99%;挥发性成分对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作用较强,对大肠埃希菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作用较弱;对肿瘤细胞株A549具有较高的抑制作用,IC_(50)为268.675 mg/L。结果表明,陕西佛坪木蹄层孔菌挥发性成分主要包括酯类和醛类,其中酞酸二乙酯、壬醛、9(11)-脱氢麦角酰苯甲酸酯等挥发性组分尚未见报道;提取物的抗肿瘤活性较强,抑菌活性较弱,具有进一步开发与综合利用的价值。     

秦巴山区猪苓多糖的提取及其脂质体生产工艺的优化

优化秦巴山区猪苓多糖的提取及其脂质体的生产工艺,为其工业化生产提供理论依据。采用响应面分析和Design-Expert 8.0.6软件相结合的方法,确定猪苓多糖提取最佳工艺,并对多糖进行抑菌试验;采用逆向蒸发法制备猪苓多糖脂质体,并用L_9(3~3)正交试验对脂质体制备工艺进行优化;采用硫代巴比妥酸法,研究维生素E和C对脂质体抗氧化的影响。猪苓多糖提取的最佳工艺为:浸提次数3次、液料比143∶15(mL·g~(-1))、浸提时间1.3h;在此条件下,多糖提取率达5.19%。猪苓多糖脂质体制备的最佳工艺为:大豆卵磷脂、胆固醇和聚乙二醇3350的摩尔比7.00∶2.00∶0.40,超声时间5.50 min,猪苓多糖添加量为2.00 mL,猪苓多糖脂质体包封率为98.87%,不同剂量的维生素E和C均可提高脂质体的抗氧化性。     

比较DNA序列分析不同猪苓菌种的亲缘关系

对不同形态猪苓(Polyporus umbellata)菌核(猪屎苓、铁蛋猪屎苓和鸡屎苓)的rDNA(18S r DNA,ITS1-5.8S rDNA-ITS2)和β-tub1进行扩增、测序.序列分析表明:所得rDNA和β-tub1序列完全相同.以Neighbor-joining(N-J)方法构建ITS(ITS1-5.8S rDNA-ITS2)序列系统发育树,供试菌株同GenBank中收录猪苓(P. umbellata)类聚于同一分枝且序列完全相同,表明不同形态菌核的猪苓之间亲缘关系较近.     

虎杖内生放线菌的分离鉴定及抗菌活性

采集秦巴山区野生虎杖(Polygonurn cuspidatum),选取以海藻糖、葡萄糖、淀粉等为主要营养和能源的4种培养基,经分离纯化得到47株内生放线菌.经形态学鉴定并结合16S rDNA序列分析,将6株具有较强抑菌活性的菌株初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces)2株,小单孢菌属(Micromonospora)2株,链孢囊菌属(Streptosporangium)2株;采用滤纸片法初步研究了内生放线菌发酵液的抑菌活性.结果表明,17株菌株具有不同程度的抗菌活性,占所有分离菌株的36.2%,其中6株具有较明显的抑菌活性,菌株PEA023对所有靶标菌均有较强的抑制作用,菌株PEA023和PEA032对铜绿假单胞菌具有拮抗活性.