复合PCR进行胸膜肺炎放线杆菌血清型快速分型

根据胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）各血清型之间外毒素apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣA基因差异，设计6对引物，对16株标准菌株进行1次5对引物的多重PCR和1次根据apxⅣA基因设计1对引物PCR的扩增，得到各血清型特异性片段，并将片段特征相同的血清型归为同一组。通过这2步PCR分组情况的不同能将16株标准菌株中的大多数血清型区别开，但是仍然不能将血清2型和8型、血清9型和11型、血清5型中的2个亚型以及血清12型和13型区分开。又根据血清2型英膜多糖（CP）基因差异设计1对引物将血清2型和8型区分开。将此分型系统应用于23株未知病原菌检测，检测到胸膜肺炎放线杆菌9株，并全部能够将其分型。本试验PCR分型体系可以作为胸膜肺炎放线杆菌血清型分型的一种快速而有效的鉴定方法。     

利用套式PCR检测牛羊乏质体

为同时检测和鉴定牛边缘乏质体、中央乏质体及绵羊乏质体,根据这3种病原体的msp4基因核苷酸序列,自行设计、合成了针对3种乏质体的2对通用引物,及分别针对三者的特异引物,通过PCR条件优化,建立了检测乏质体及分别鉴定3种乏质体的套式PCR方法,并与OIE推荐的msp5半套式PCR比较.结果显示:该方法对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫、伊氏锥虫均未扩增出特异性片段.套式PCR检测乏质体DNA量为0.2 pg(相当于6个感染红细胞).检测l 119份来自6个不同地区的奶牛、肉牛、水牛及羊的临床样品,阳性106份,经鉴定边缘乏质体46份,中央乏质体15份,绵羊乏质体35份,混合感染中央乏质体和绵羊乏质体4份,混合感染边缘乏质体和绵羊乏质体3份,混合感染边缘乏质体和中央乏质体3份.首次在分子生物学水平证明中央乏质体存在于中国.同时,证明牛可以混合感染边缘乏质体和中央乏质体或绵羊乏质体,以及混合感染中央乏质体和绵羊乏质体.上述848份样品用OIE推荐的msp5半套式PCR同时检测,两者符合率为98.5％(835/848).检测结果表明,msp4套式PCR特异、敏感,可用于边缘乏质体、中央乏质体、绵羊乏质体的检测和鉴定.     

毛叶水栒子-一个新的抗旱造林乡土树种

应用乡土非主要造林树种,是改善人工林单一林分结构、提高其生态功能和稳定性的有效手段。毛叶水枸子具有抗旱、抗污染等优点,是良好的造林先锋树种和伴生树种,同时具有诸如可作李子栽培品种的砧木、果实酿酒、种仁入药等利用价值,并且也可以作为绿化树种应用,笔者介绍了毛叶水构子的地理分布、生物学特性、生态学特性和开发利用价值,并介绍了作者近些年来在生产实践中摸索总结出的育苗技术和造林经验,以期推动毛叶水构子造林应用。     

沙藏处理对欧洲花楸种子的催芽作用

为解决欧洲花楸(Sorbus aucuparia)种子育苗技术问题,研究了不同低温沙藏处理和赤霉素浸泡对5个种源种子发芽的影响.研究结果表明:与5～6℃变温沙藏(平均5.6℃)相比,先2.9℃沙藏60 d再5℃沙藏至播种的两段恒温沙藏处理其种子发芽时间有所推迟(0～24 d),但发芽率明显提高,如2,3,6号种源的发芽率由变温沙藏的1%以下分别提高到15%,57.8%,14%.然而4号、5号种源的发芽率2种处理间无明显差异,说明不同种源的催芽条件有差别.赤霉素溶液浸泡利于打破种子休眠提高发芽率,用不同浓度赤霉素浸泡后再5～6℃变温沙藏的2号种源种子的发芽率从未经赤霉素处理的0.3%提高到12.6%～42.0%,最佳赤霉素浓度为200 ms/L.     

球花荚蒾育苗技术试验研究

对球花荚莲种子采集和育苗技术多年的探索,培育大量的球花荚蒾幼苗,可以绿化、美化城市,并为六盘山林区营造针嗣混交林提供优良的阔叶树种.     

多用途树种欧洲花楸及其引种

介绍了了多用途树种欧洲花楸的地理分布、树种特性、生态学特性、经济价值及其在城市森林建设中的应用前景。       

青海省高寒草地土壤侵蚀强度及其空间分布特点

开展高寒草地土壤退化评价有助于掌握高寒草地退化的空间分布规律,对维持草地生态安全、保障区域可持续发展具有重要的意义。本研究基于改进的通用土壤侵蚀修订模型对青海省高寒草地土壤侵蚀退化强度和空间分布进行评价,并计算了2005—2014年青海省高寒草地土壤侵蚀评价指数,从而分析其变化趋势。结果表明：2014年度青海省高寒草地土壤侵蚀强度轻度、中度、重度和极度剧烈退化面积及占比分别为166 925 km²（39.5%）,98 729 km²（23.4%）,949 401 km²（22.5%）及61 787 km²（14.6%）。土壤侵蚀强度整体呈现以最剧烈区域为中心,向四周辐射的趋势,主要影响因素包括风蚀、水蚀及放牧强度等。此外,青海省高寒草地2005—2014年土壤侵蚀变化恢复面积为258 495 km²（61.2%）,反映了近年来青海省草地保护工作成效显著,然而在青海省的中东部地区高寒草地土壤退化的形势仍比较严峻,应当引起相关部门的高度重视。     

六盘山国家自然保护区森林生态系统服务功能价值评估

本文以六盘山国家级自然保护区为例,从有机物质生产、旅游价值、水源涵养、保持土壤、固碳制氧、净化空气等直接使用价值和间接使用价值方面进行了全面的分析,探索其重要生态服务功能价值评估研究,认为六盘山国家级自然保护区中6种生态服务功能的价值排序为:生物多样性、水源涵养、固碳贮氧、保育土壤、净化大气、森林景观游憩与生态文化价值。为自然保护区的生态建设提供一定的理论和实践依据,为合理的区域生态补偿机制研究提供一定的基础数据。     

犬瘟热RT-POR快速诊断方法的建立

本研究建立了快速诊断犬瘟热感染的RT-PCR方法，并应用该方法对犬瘟热病死犬的脏器及感染犬体表采集样品进行了检测。为确定犬瘟热最佳的隔离检疫周期及采样部位，本研究对一例CDV攻毒犬感染病程收集的口鼻液、粪便、尿液样品进行了对比检测，结果证实粪便、口鼻液等易于获取的样品中CDV病毒滴度较高，并可在发病全程检测到，因此，它们可作为理想的受试样品。     

Real-time RT-PCR和RT-PCR方法快速检测犬瘟热病毒

由犬瘟热病毒(CDV)引起的犬瘟热(CD),是犬的一种高度接触性、急性传染病[1].CDV感染范围广泛,自然宿主包括犬科动物(犬、狼、豺、狐等),鼬科动物(貂、臭鼬、黄鼠狼等),浣熊科动物(浣熊、小熊猫、大熊猫等),还可感染灵长类动物(如日本猕猴等),甚至有CDV感染人的病例.除病毒分离、病理包涵体检查、血清学检测、核酸探针、原位杂交等方法外,RT-PCR方法是目前检测CDV最常用的方法[1-3].