等边浅蛤人工育苗试验初报

2006年6月～2007年1月,对等边浅蛤的人工繁殖、胚胎发育和幼虫培育、变态附着及稚贝培育进行了研究。结果表明：等边浅蛤胚胎繁殖盛期是每年的7~8月,在盐度20～25,水温24～29℃,pH8.0的条件下,受精卵经过15h发育成D形幼虫。盐度20～25,水温24～29℃时,胚胎的孵化率和D形率最高。温度和盐度对幼虫的生长发育影响明显,浮游幼虫生长最适温度为24～29℃,最适盐度为20～25,34℃试验组,幼虫几乎不能存活,19℃组存活率最高,但生长速度慢于24℃组。幼虫在盐度15～25时存活率最高,但盐度20～25时生长速度最快,在盐度35时,幼虫几乎不能存活。研究发现金藻和角毛藻是等边浅蛤浮游幼虫生长的适宜饵料。     

泥蚶（♀）×毛蚶（♂）受精及胚胎发育过程的初步研究

以泥蚶为母本、毛蚶为父本,运用同步催产法,同时收集泥蚶的卵和毛蚶的精子进行人工杂交,采用普通光镜和荧光显微镜,对泥蚶(♀)×毛蚶(♂)受精及胚胎发育的细胞学过程进行了连续观察。结果显示,毛蚶的精子可以附着并穿过泥蚶的卵膜进行受精,并激活卵子减数分裂使其释放第一极体(PB1)和第二极体(PB2),能够形成雌、雄原核并发生原核联合,接着受精卵开始进行卵裂;杂交受精率统计为60.2%,发育速度较自交组慢;杂交胚胎发育前两次卵裂发育基本正常,后期才出现明显畸形;囊胚期持续时间很长,只能发育到担轮幼虫期,且纤毛越来越长,最后全部死亡。另外,在实验中发现有多精入卵和多极分离现象。     

人工蓄养斧文蛤的生殖周期及早期发育

为了探讨斧文蛤(Meretrix lamarkii Deshayes)的繁殖规律和胚胎发育过程,自2012年1月至2013年1月,每月采集样品,采用组织学方法对浙南海区移养的斧文蛤性腺发育、生殖周期和性成熟率周年变化进行了研究,并结合室内人工育苗试验对其胚胎发育过程进行了显微观察。结果表明,该地区斧文蛤的性腺发育以1年为1个周期,可分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期,雌雄性比约为1:1,性腺发育时间基本同步,均始于2月,随着水温的升高而发育,大部分个体在6月至7月发育成熟,7月下旬至8月底是繁殖盛期,可用阴干加流水刺激方法诱导其排放精卵,受精卵在水温29℃、盐度28、p H 7.8~8.5条件下,经16~20 h孵化成D形幼虫,壳长为100~110μm,浮游幼虫经5~6 d培育进入匍匐幼虫期,壳长约200μm,最后发育变态为稚贝。本研究为斧文蛤的人工繁育、养殖开发以及种质资源保护提供了基础资料。     

文蛤山东种群与江苏种群杂交及自繁子代的遗传差异分析

利用fAFLP技术研究了文蛤山东种群与江苏种群的杂交子代（SJ，JS）和自繁子代（SS，JJ）群体的遗传差异。3对荧光引物组合在4个F1群体96个个体中共扩增出255个位点，多态位点比例高达97.65%。Nei’s基因多样性和Shannon信息指数显示，4个群体的遗传多样性大小依次为SJ＞SS＞JS＞JJ，而且两杂交组的变异度都大于自繁组，说明杂交增加了文蛤种群的遗传多样性和变异程度。fAFLP扩增位点分析表明，SJ和JS的显性基因频率有所增加，并且正、反杂交群体在遗传结构上均表现出明显的偏母性特征。从群体间遗传相似性指数来看，JS与JJ间的遗传相似性系数最大（0.976 1），而与SS间的遗传相似性为0.945 0；SJ与SS间的遗传相似性系数为0.950 2，与JJ群体间为0.925 4；SJ群体与JS群体间的遗传相似性系数最小（0.907 5）。在依据群体间相对遗传距离构建的系统树上，JS与JJ间的亲缘关系最近，首先聚在一起，SJ与SS间亲缘关系较近，也能聚为一支，但明显可以看出正交组合SJ与其它3个群体间的亲缘关系较远。综合分析表明，文蛤地理种群杂交增加了遗传多样性和变异度，正、反交群体在遗传结构上都明显地偏向母本，正交组合SJ群体的遗传多样性最高、变异度最大，这与其在生长速度上表现出的杂种优势可能有直接关系。     

文蛤不同地理群体自繁和互交F1代的早期生长性状

为了培育文蛤新品种,开展了不同地理群体文蛤(山东野生群体和江苏野生群体)的自繁和互交实验,获得了2个自繁群体和2个互交群体,运用方差分析对4个群体子一代的浮游幼虫和稚贝(1～12月龄)的主要性状进行了比较。结果表明,各实验组的受精率、受精卵的孵化率、胚胎发育和浮游幼虫生长无明显差异;2个月龄内稚贝各实验组生长发育差异不明显;3-12月龄稚贝生长性状主要表现为S♀×J♂>S♀×S♂>J♀×S♂>J♀×J♂,其中前3个组合之间差异不显著,但均与第四组合差异显著;互交组的杂种优势率范围在6%～168%。杂种优势在不同性状表现不同,活体重的杂种优势高于壳长、壳高和壳厚;同时各性状指标受季节性温度变化影响较大,5-10月份是高速生长期,而12月份以后处于低生长状态。获得的4个群体将作为进一步选育的基础群体,子一代的变异性增加为进一步选育奠定了基础。     

4种饵料对选育中间养成阶段的凡纳滨对虾投喂效果分析

为了解凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）在选育保种中间养成阶段（约10 ~40g/尾）的营养需求，以同一全同胞家系的凡纳滨对虾为对象，体质量为（10.30±1.61）g，选择配合饲料、软颗粒饲料、虎斑乌贼（Sepia pharaonis）和双齿围沙蚕（Perineresis aibuhitensis）这4种饵料进行60d的投喂试验，在对4种饵料进行营养评价的基础上，研究其对对虾生长、成活，以及消化、生长相关基因表达的影响。结果显示：（1）4种饵料投喂下对虾的特定生长率和成活率从高到低依次为双齿围沙蚕、配合饲料、软颗粒饲料和虎斑乌贼；（2）人工饲料组对虾肝胰腺中消化相关的α-淀粉酶d4基因表达水平显著高于生物饵料组（P<0.05），蛋白酶基因表达趋势同α-淀粉酶d4基因相似，双齿围沙蚕组和软颗粒饲料组的胰脂肪酶基因表达显著高于配合饲料组（P<0.05）。虎斑乌贼组小核核糖核蛋白多肽基因表达显著低于其他饵料组（P<0.05），生物饵料组y+L氨基酸转运载体-2基因表达显著高于人工饲料组（P<0.05）；（3）虎斑乌贼和双齿围沙蚕的氨基酸营养评价相对较高，而配合饲料和双齿围沙蚕的脂肪组成和含量相对更优。研究发现：双齿围沙蚕的营养价值最高，软颗粒饲料最低；4种试验饵料的投喂效果依次为双齿围沙蚕、配合饲料、软颗粒饲料和虎斑乌贼；除蛋白酶基因外，其他基因表达同试验饵料的营养组成和投喂效果一致。     

文蛤二倍体和三倍体染色体核型分析

以担轮幼虫为材料,采用热滴片法制作染色体标本,对二倍体和三倍体的文蛤(Meretrix meretrix Linnaeus)染色体数目及核型进行探讨,结果显示,文蛤二倍体的核型为2N=38,24M 14SM,NF=76;三倍体的核型为3N=57,36M 21SM,NF=114。二者染色体类型基本相同,均未发现有异型和具随体的染色体。另外本研究还分析了文蛤与帘蛤目(Veneroida)及帘蛤科(Veneridae)的其他种类之间的核型异同,为探讨它们之间的亲源关系提供科学依据。