六种传代细胞系的致瘤性研究

为分析6种传代细胞系对裸鼠致瘤性的影响,将80只裸鼠随机分为8组,每组10只。处理组分为MDBK细胞组、OA3.Ts细胞组、Marc-145细胞组、McCoy细胞组、PK-15细胞组、ST细胞组,每种细胞培养物颈背部皮下注射10只裸鼠。阳性对照组BHK-21细胞培养物和阴性对照组鸡胚成纤维细胞培养物各注射10只裸鼠。在饲养5周和12周后对裸鼠剖检并进行病理组织学检测。结果发现,阳性对照BHK-21细胞组、McCoy细胞组、PK-15细胞组和Marc-145细胞组接种裸鼠后5周注射部位均形成肿块。对各处理组采集的肿块进行病理组织学检测,结果均为鳞状细胞癌细胞。对阳性对照BHK-21细胞组的一只裸鼠肺组织进行病理组织学检测发现有癌细胞的转移;阴性对照鸡胚成纤维细胞组、MDBK细胞组、OA3.Ts细胞组和ST细胞组小鼠均无肿块形成,接种后5周和12周分别进行剖检和病理组织学检测均未发现肿瘤细胞。由此可知,MDBK细胞、OA3.Ts细胞、ST细胞对裸鼠均不具有致瘤性;McCoy细胞、PK-15细胞、Marc-145细胞接种后可诱导裸鼠发生肿瘤,具有致瘤性;若使用致瘤性阳性细胞进行灭活疫苗生产时,应对灭活苗生产的工艺过程进行进一步的安全性评价。     

两株H3N2亚型猪流感病毒的遗传进化及分子特征分析

为对2012年广州规模化养猪场疑似流感病料中分离鉴定的2株猪流感病毒A/swine/Guangdong/1519/2012(H3N2)(简称GD1519)和A/swine/Guangdong/1520/2012(H3N2)(简称GD1520)进行遗传进化及分子特征分析,对两株病毒进行了全基因组的测序分析。通过对其8个基因片段的基因来源进行分析,构建系统进化树,遗传进化分析结果显示GD1519 HA、PB2、PA和NP基因片段均来源于近期人源H3N2亚型Moscow/99-like亚分支;其NA和PB1基因片段来源于早期人源H3N2亚型Victoria/75-like亚分支;其M和NS基因片段来源于近期人源H3N2亚型New York/99-like亚分支。GD1520病毒的HA基因片段来源于近期人源H3N2亚型Moscow/99-like亚分支;其NA和PB1基因来源于近期人源H3N2亚型New York/99-like亚分支;其PB2、PA、NP、M和NS基因片段均来源于早期人源H3N2亚型Victoria/75-like亚分支。分析结果暗示2株病毒可能均由不同时期的类人源H3N2亚型流感病毒间基因重排而产生的新型H3N2亚型猪流感病毒。本研究结果进一步证明猪可能是不同来源流感病毒的基因"混合器",开展猪流感病毒相关分子流行病学研究具有重要的公共卫生意义。     

猪链球菌Ⅱ型四川分离株对抗菌药的敏感性分析

对四川省不同地区链球菌病病死猪体内分离的7株链球菌Ⅱ型进行抗菌药敏感性试验,用链球菌兰氏D群C55914作为对照,比对菌为肺炎链球菌质控菌株ATCC49619.在32种抗菌药中,选择29种药物进行纸片法药敏试验.试验结果表明:7株链球菌耐药谱非常相似,对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、奥格门丁、卡那霉素、红霉素、壮观霉素、氯霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢拉定、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、环丙沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、亚安培南均敏感;对阿米卡星、新霉素、庆大霉素3株敏感,4株中敏;对四环素和多西环素2株中敏,5株耐药;对链霉素1株中敏,6株耐药.用21种药物进行最小抑菌浓度(MIC)测定,结果7株均对青霉素、氨苄西林、卡那霉素、红霉素、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻呋、环丙沙星、达氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、恩诺沙星、磺胺六甲氧嘧啶敏感,1株对新霉素和阿米卡星中敏,2株耐药;所有菌株对四环素、土霉素、多西环素、链霉素均耐药.两种方法总体结果一致.     

转基因植物可食疫苗研究进展

利用转基因植物生产疫苗是一种经济、方便的方法。目前已有一些细菌和病毒等病原抗原编码基因在植物中成功地得到了表达 ,并且保留了自身的免疫特性 ,通过口服或非经肠道免疫能刺激免疫反应 ,甚至有保护作用。文章就变异链球菌表面蛋白、大肠杆菌热敏肠毒素 B亚单位、霍乱毒素 B亚单位、乙肝病毒表面抗原、Norwalk病毒衣壳蛋白、狂犬病病毒糖蛋白、传染性胃肠炎糖蛋白 S、口蹄疫病毒 VP1、兔出血病病毒等在转基因植物中的表达及其免疫原性研究作了综述。表明利用转基因植物生产可食疫苗是可行的 ,然而还存在一些问题 ,有待于进一步研究     

实时荧光PCR技术快速定量检测H5亚型禽流感病毒

选取H5亚型禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因保守序列,使用Primer Express 2.0软件设计出特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光PCR技术来定量检测禽流感病毒。使用含有选定检测序列的RNA标准品做标准曲线,结果表明该方法的灵敏度为10拷贝/反应,标准曲线的相关系数为0.998003,对H9亚型禽流感病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳。为禽流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。     

根癌农杆菌介导伪狂犬病毒gD基因转化玉米的研究

将克隆的猪伪狂犬病毒保护性抗原基因gD插入质粒pBA002,构建了植物表达载体pBA-gD.利用根癌农杆菌LBA4404介导,将该基因导入甜玉米自交系1132,转化获得84株转基因系.经过点杂交、Southern杂交分析,有23个转基因株系基因组检测到gD基因稳定整合.Northern杂交显示有5个转基因株系的目标基因正确表达.     

SPF鸡感染网状内皮组织增生症病毒后血清和卵黄的抗体反应相关性比较

为进一步研究采用卵黄抗体检测代替血清抗体检测的可行性,采用已建立的卵黄抗体ELISA检测方法,比较同一时期卵黄抗体与血清抗体的相关性。人工感染23周龄无特定病原体（SPF）鸡,每周采集全血分离血清,每天收集种蛋,ELISA方法检测血清、种蛋中的REV抗体,并进行比较,结果表明：攻毒后第2周开始血清抗体和卵黄抗体呈阳性,并达到峰值,之后抗体水平缓慢下降,两者具有相似的消长规律;对同一时期的卵黄抗体和血清抗体S/P比值进行统计学比较,P值小于0.05,相关系数为0.931,表明两者差异性不显著,相关性很好;阴阳性符合率比较,阳性符合率为97.8%,阴性符合率为100%,总体符合率为98.4%,阴阳性复合率很高。试验证明,同一时期的卵黄抗体和血清抗体的相关性很好,可用卵黄抗体检测方法代替血清抗体检测,从而为监测SPF鸡群感染REV提供新的技术手段。     

鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗抗体消长规律观察

<正>疫苗免疫仍是预防禽流感的有效手段之一,被一些国家和地区采用[2～4]。有关禽流感疫苗的免疫效果及抗体消长规律国内学者做了一些研究工作[5～8],但作为我国现阶段使用的主要疫苗,重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)免疫鸭的抗体动态变化尚未见报道。     

Ⅰ群禽腺病毒penton蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

在同源性分析基础上,确定了12个血清型penton蛋白同源性最高的2段基因并通过linker进行连接,以该串联基因原核表达蛋白为抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备并筛选到2株可分泌FAdV-Ⅰ penton蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系(Mab-penton-6#和Mab-penton-9#).2株单克隆抗体小鼠腹水经间接...     

“后牛瘟时代”的全球牛瘟研究

2011年，联合国粮食及农业组织(FAO)和世界动物卫生组织(WOAH)联合宣布根除牛瘟。这是历史上首个消灭的动物疫病，也是继天花之后全球第二个被消灭的传染病，自此，世界进入“后牛瘟时代”。牛瘟再暴发风险依然存在，维持全球牛瘟无疫状态意义重大。就维持全球牛瘟无疫状态的框架性文件、牛瘟病毒保藏机构以及宣布消灭牛瘟后所发表的实验性研究等进行了综述，为提升公众风险意识、应对牛瘟再暴发提供参考。