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FRRSV和PCV-2双重PCR检测方法的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCCVR-2332)的ORF7保守序列和猪圆环病毒2型(PCV-2)(AF381175)的ORF2基因保守序列,设计合成了两对特异性引物。用这两对引物,通过优化的PCR条件,对PRRSV阳性毒株反转录后的cDNA模板和PCV-2毒株的DNA模板进行双重PCR扩增,同时得到两条与试验设计相符的432bp(PRRSV)和630bp(PCV-2)特异性条带,建立了同时检测PRRSV和PCV-2的双重PCR方法。并用此方法对在安徽省不同地区所采集的72头份病猪的淋巴结、肺、肝、脾、肾等组织进行检测,证明建立的PCR方法可用于临床诊断。 相似文献
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利血平增敏法检测环丙沙星药物残留的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
为了解环丙沙星对金黄色葡萄球菌(金葡菌)的抗菌活性及利血平对其抗菌活性的影响,采用对倍稀释浓度琼脂平板法测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值,同法测定利血平对环丙沙星对金葡菌MIC值的影响。结果表明利血平增强了环丙沙星的抗菌活性,增大了环丙沙星抑制金葡菌的抑菌圈直径,提高了环丙沙星在组织中检测的灵敏度。我们研究发现利血平加入后中心浓度由0.5 μl/ml变为0.0625 μl/ml,最低检测限由0.125 μg/ml降低到0.015625 μg/ml。 相似文献
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酶联免疫法测定鸡肝中氯霉素残留 总被引:7,自引:2,他引:7
运用酶联免疫检测试剂盒测定鸡肝中氯霉素的残留量.氯霉素标准液浓度在 0.025~2 μg/mL范围内线性良好,r=0.995 1,鸡肝中最低检测限为0.10 μg/kg.空白添加阳性样品浓度为0.1、0.5和1.0 μg/kg时,回收率分别为86.9%、89.1%和80.0%,板内变异系数<14.6%,板间变异系数<12.0%;本方法操作简单快捷、灵敏准确、方便实用,可作为鸡肝中氯霉素残留检测的快速筛选方法. 相似文献
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二氟沙星残留检测的Ci-ELISA方法建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以合成的二氟沙星(DIF)人工抗原为基础,制备出了高效价抗DIF血清(1∶29×104),并建立了DIF间接竞争酶联免疫吸附测定法(Ci-ELISA法)。标准曲线的线性回归方程为y=-0.223x+0.9631(r=0.9929),中值(I50)=119.21 ng/ml,最低检测限(LOD)=1.14 ng/ml,线性范围为1.14~10000 ng/ml,方法的平均批内变异系数(CV)为4.83%,平均批间CV为10.69%。DIF以浓度15~10000 ng/ml在鸡肉中添加时,回收率为81.24%~90.64%,变异系数为8.18%~11.75%。 相似文献
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为了解安徽省规模化猪场的高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)免疫抗体水平及感染状况,选取安徽省定点监测的12个规模化猪场及2个生猪屠宰场,采用间接ELISA和荧光RT-PCR方法,对319份猪血清样本和319份猪扁桃体样本进行了检测。结果显示,HP-PRRS平均免疫抗体阳性率为72.7%,病毒核酸阳性率为17.6%。检测结果表明,安徽省定点监测猪群的HP-PRRS免疫水平较高,但在养殖及屠宰环节仍存在带毒现象。显著性检验表明:免疫猪群的HP-PRRS抗体阳性率明显偏高,且病毒核酸阳性率低于未免疫猪群,说明疫苗免疫具有一定的保护作用;保育猪群及育肥猪群感染率相对较高,是该病防控的短板;中型猪场感染程度明显高于小型规模场以及屠宰场,提示中型规模猪场应做好严格的引种控制,以及人员和运输工具的出入控制;皖西南和西北地区感染情况较为严重,应加强这些地区生猪养殖及运输环节的卫生防疫。 相似文献