淇河鲫IL-8 cDNA克隆及组织表达分析

IL-8是最早发现的趋化因子,属于CXC亚家族,与鱼类非特异性免疫水平关系密切。实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从淇河鲫总RNA反转录产物中获得了641 bp IL-8cDNA序列,其中包含102 bp的5’非编码区,242 bp的3’非编码区和297 bp的开放阅读框。该基因编码由98个氨基酸残基组成的前体蛋白,前22个氨基酸残基为信号肽。肽链中含有4个保守半胱氨酸,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分隔,形成CXC结构。第一个半胱氨酸前缺乏ELR基序,其组成是DPR。由氨基酸同源性分析和进化分析可知,淇河鲫IL-8与鲤、鳙、草鱼、鲢等鲤科鱼类的进化关系较近,与鲤IL-8的同源性最高(94%)。通过实时荧光定量PCR检测,淇河鲫IL-8在被检测的8个组织中都有表达,其中在肌肉中的表达量最高,其次为脾脏、头肾和脑等。研究结果对调控淇河鲫非特异性免疫能力,提高淇河鲫健康养殖水平具有一定参考价值。     

水产动物营养与饲料学实验教学的改革与探索

正近年来,我国水产饲料工业发展突飞猛进,2013年全国水产饲料总产量近2000万吨,约占全球水产饲料总量的45%,占中国饲料工业总产量的10%。与水产饲料工业的快速发展相适应,水产动物营养与饲料学研究领域热点较多,研究方法和技术手段日新月异,研究成果不断涌现。全国水产养殖专业的毕业生约有20%从事水产动物营养与饲料领域的教     

灌喂牡丹籽油对草鱼急性肝损伤的保护作用

为研究牡丹籽油（peony seed oil,PSO）对草鱼急性肝损伤的保护作用，实验设置对照组（0）、CT组（注射四氯化碳，CT）、PSO 2.5组（2.5 g/kg）、PSO 5.0组（5.0 g/kg）和PSO 7.5组（7.5 g/kg）5个处理组，每个处理3个重复，选取草鱼（92.2±15.78）g 75尾，进行为期8 d的试验，期间连续灌喂PSO7 d，末次灌喂3 h后，对照组注射橄榄油，除对照组外其他处理组皆注射2.25 mL/kg CT,24 h后取样；观察草鱼肝胰脏组织形态，检测血清中生化指标及肝胰脏中抗氧化相关酶活性。结果显示，与CT组相比，PSO 2.5组、PSO 5.0组和PSO 7.5组肝细胞的空泡化程度和脂滴含量减少，PSO 7.5组血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平也显著降低（P<0.05）;PSO 5.0组和PSO 7.5组血清和肝胰脏中的三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量显著低于CT组（P<0.05），而PSO 5.0组血清和肝胰脏中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量显著高于CT组（P<0...     

黑水虻油替代豆油对草鱼生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响

为研究黑水虻油替代豆油在草鱼生产实践中的效果，本实验以黑水虻油替代草鱼基础饲料中0（SO）、25%（BSO25）、50%（BSO50）、75%（BSO75）和100%（BSO100）的豆油并配制成5种等氮等脂的饲料，饲喂草鱼[初始体质量（13.37±1.07 g）]56 d后检测生长性能、体成分、血清生化指标、抗氧化能力、肠道和肝脏组织结构及肠道菌群组成等变化。结果显示，各组之间草鱼增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、饲料系数（FCR）、肥满度（CF）、脏体比（VSI）和肝体比（HSI）变化均不显著。与SO组相比，BSO25和BSO50组血清超氧化物歧化酶（SOD）活性显著增加，SM75和SM100组的丙二醛（MDA）含量均显著降低，BSO50、BSO75和BSO100组的过氧化氢酶（CAT）活性均显著上升。BSO100组肝细胞呈现为不规则形状，血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）及低密度脂蛋白（LDL-C）的水平均显著高于SO组。BSO100组群落多样性指数Sobs、Shannon和丰富度指数Chao、Ace均显著高于SO组。研究表明，在本实验条件下，黑水虻油替代饲料中100%的豆油虽然不会影响草鱼的生长，能提高草鱼抗氧化能力及肠道菌群的丰度和多样性，但在BSO100组中，草鱼肝脏受损，长期饲喂会对机体产生不利影响，因此在草鱼饲料中黑水虻油不应全部替代豆油，建议替代比例不超过75%。     

脂源性外泌体的功能及其在水生动物中的研究进展

外泌体是一种由多种细胞分泌的30～150 nm的小囊泡,其通过转运蛋白质、脂质、mRNAs和microRNAs等方式影响或改变受体细胞的行为,已被证明是一种细胞间通讯的新模式。研究发现外泌体参与了脂肪合成及肥胖、肝脏脂肪变性、胰岛素抵抗、免疫调节、炎症反应、肿瘤发生、血管以及神经生成和成骨等过程。本文阐述了外泌体的形成与生物学特性、分离及鉴定的方法,重点阐述了脂肪来源的外泌体在机体生理及病理过程中的潜在作用,并概述了水生动物外泌体的研究进展,以期为脂肪代谢及有关疾病的病理机制与潜在干预靶标的研究提供新的思路和途径,也为更多地了解外泌体可能在鱼类糖脂代谢紊乱中的作用提供理论基础。     

淇河鲫IL-8原核表达系统的构建及多克隆抗体的制备与鉴定

为揭示淇河鲫(Carassius auratus var.Qihe)白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的功能,本研究构建了原核表达系统,并制备了兔抗鲫IL-8多克隆抗体。首先采用RT-PCR法扩增淇河鲫IL-8基因编码序列中不含信号肽的基因片段,克隆到pET-32a(+)载体后转化入Rosetta菌株构建原核表达系统。经IPTG诱导表达出相对分子质量约27.8 kD的目标融合蛋白。将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,效价达1︰10~5。经免疫亲和层析纯化的抗体能特异性识别重组和天然的淇河鲫IL-8蛋白。比较不同组织的免疫组化和荧光定量PCR结果,IL-8蛋白量和mRNA的表达量在不同组织间变化趋势一致,在肌肉、脾和头肾均检测到较高的表达量,肠道的表达量较低。本研究为进一步探讨淇河鲫IL-8的生物学功能奠定了基础。     

饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能，肝脏脂肪酸组成及Δ6 fad，elovl5mRNA表达的影响

为了探讨饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能和LC-PUFA合成代谢的影响,本研究以鱼油和混合植物油(花生油和紫苏籽油)为脂肪源配制5组等氮等脂饲料。对照组(D1)以鱼油为唯一脂肪源,其他5组实验饲料以花生油和紫苏籽油为脂肪源,且LNA/LA比分别为0.02(D2)、0.46(D3)、1.09(D4)和1.53(D5)。8周养殖实验后,分析各处理组鱼体的生长性能指标、肝脏脂肪酸组成,肝脏Δ6 fad-a/b和elovl5-a/b基因表达水平。结果显示,与对照组相比,植物油饲料对鱼体增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FCR)无显著影响,但显著影响了鱼体肝脏LC-PUFA水平,提高了肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达水平。在各植物油组之间,饲料LNA/LA比显著影响了鱼体WGR和SGR指标,其中D2和D4组鱼体生长表现较好;随着饲料中LNA/LA比的升高,鱼体肝脏LC-PUFA水平,以及Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达水平也随之增加,其中D4组鱼体肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA表达量最高,且其LC-PUFA含量显著高于D2和D3组。由此可见,植物油饲料尽管不影响鲤正常生长,但影响了鱼体肝组织LC-PUFA含量。然而,饲料中添加适宜的LNA/LA比(1.09∶1)可促进鲤肝脏Δ6 fad-a和elovl5-a mRNA的表达,最大限度地提高鱼体内源LC-PUFA合成量,从而有效地降低植物油饲料对鱼体组织LC-PUFA含量的负面影响。