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281.
逆转录病毒载体介导的猪瘟病毒E2基因在真核细胞中表达及动物免疫试验初报 总被引:3,自引:0,他引:3
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒表达载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFVE2基因在SP2/0细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,用流式细胞仪检测证明,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。为下一步利用细胞免疫小鼠研制抗猪瘟病毒单克隆抗体打下基础。 相似文献
282.
283.
284.
利用RT-PCR技术扩增出不含信号肽的猪瘟病毒石门株的E2基因,将其克隆到PGEX-T-Easy 载体上,用BamH Ⅰ和HindⅢ进行双酶切,回收目的基因。将目的基因克隆到表达载体质粒pPROEX-HTb中,获得 重组质粒PPRO,EXE2,用pPROEXE2转化大肠杆菌,诱导含重组质粒PPROEXE2的大肠杆菌BL21表达E2基因蛋 白,研究E2蛋白与猪瘟阳性血清反应的特异性。结果表明,受体菌诱导后能表达E2基因蛋白,所表达的E2蛋白能 与猪瘟阳性血清发生特异性很强的反应。 相似文献
285.
无菌采取犬抗凝血,分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验,探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素P(PHA-P)、犊牛血清(FCS)对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上,研究不同浓度犬、猪转移因子(transferfactor,TF)对犬淋巴细胞增殖的影响,增殖的结果用MTT法测定。结果表明,当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml,PHA-P为12.5μg/ml,FCS为10%时,淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下,犬、猪TF浓度在0.195 ̄25mg/ml时,对淋巴细胞转化增殖均有促进作用,但犬、猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml,且犬、猪TF单独作用于淋巴细胞的效应明显优于与PHA-P的协同作用。结果证实,同源或异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果,同时研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了实验依据。 相似文献
286.
本试验发现了乳汁中干扰因素对17β—雌二醇放射免疫测定方法的影响规律。在标准曲线中设立一个乳汁干扰因素对照点(N_1 管),计算时用 N_1 管的cpm(每分钟计数)减去与标准曲线 Bi 管(i=0,1,……6)条件一致的N_2 管的 cpm,其差数就是乳汁干扰因素所造成的 cpm。将 cpm 加入标准曲线的 Bi 管中,这时 Bi 管内的 cpm〔 (N_1一N_2)〕与乳汁样品管的 cpm 条件一致。用标准曲线 Bi 管校正后的 cpm 计算出的回归方程,所求出的乳汁17β一雌二醇含量很接近其真实含量。 相似文献
287.
猪脐静脉血管内皮细胞的分离与培养 总被引:5,自引:0,他引:5
采用1g/L胶原酶灌注猪脐静脉,消化分离内皮细胞并在适宜条件下培养。对培养细胞的生长特性进行检测,并对细胞进行第 因子相关抗原(F- RAg)和扫描电镜形态学鉴定。结果表明,70%细胞在24h内贴壁,第3~5天生长迅速,第4~5天长成单层。培养的细胞呈单层贴壁生长,典型铺路石状,第 因子相关抗原(F- RAg)检测阳性,证明培养的细胞为血管内皮细胞。 相似文献
288.
在过去的20多年中.虽然我国养殖业生产有了很快的发展.畜禽饲养量和畜产品产量有了很大的提高.但我国的养殖业水平还不高.尤其是畜产品的卫生质量还存在着严峻的问题。虽然我国肉类总产量占世界肉类总产量的28%.但是我国出口的肉类仅占总产量的1%。我国的活猪.活鸡、冻肉的出口地方只有香港地区和东欧.而要向欧盟、日本、美国等地出口却非常困难.主要原因是我国畜产品的卫生质量不过关。要提高我国畜产品在国际市场的竞争能力和保障广大消费的身体健康.就要从提高畜产品卫生质量入手.采取有效措施.从根本上解决我国动物性食品安全问题。 相似文献
289.
290.