运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究

将Ｏ、Ａ型ＦＭＤＶＲＮＡ分离纯化，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增其聚合酶编码基因，可检测到Ａ型１０－６倍稀释、Ｏ型１０－４倍稀释乳鼠肌肉毒。Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ扩增该基因内部片段，进一步说明该方法准确可靠。ＲＴ－ＰＣＲ一步完成使整个检测时间不超过１２小时，可在本病的诊断和检疫中推广此法     

无规定动物疫病区监测要求及思考

监测是证明无疫状态的关键因素,是无疫区建设管理和评估工作不可或缺的组成要素。本文论述了无疫区监测的重要性,列举了国际国内无疫区监测要求实例,探讨了监测中存在的问题及有关思考,从而提出了在制定监测方案时明确监测目标、确定监测方式的建议,以期为无疫区建设提供相关参考。     

福建圣农肉鸡无高致病性禽流感生物安全隔离区经济效益评估

为评估我国生物安全隔离区建设成效,选择福建圣农肉鸡无高致病性禽流感生物安全隔离区为研究对象,按照全国农牧渔业丰收奖经济效益计算办法,对项目建设期间(2012—2016年)的经济效益进行评估。结果显示:此项目单位规模新增纯收益0.258 7元,总经济效益为1 923.252 08万元,年经济效益为384.650 4万元,推广投资年均纯收益率为0.815 9。综合评估认为,福建圣农生物安全隔离区建设获得明显经济效益,生物安全隔离区划是促进我国肉禽养殖行业健康发展的一种重要模式。     

动物疫病区域化管理现状与动力机制分析

本文总结了无疫区和无疫小区建设现状与取得成效,分析了国家拉动、地方推动、产业驱动等3大动力源对保障动物疫病区域化管理推进质量和推进速度的相关影响。针对动物疫病区域化管理在认识、措施落实和保障等层面存在的问题,提出了做好顶层设计,强化政府推动,完善支持政策,建立长效机制等政策建议,以期为加快推进动物疫病区域化管理工作提供借鉴。     

山东部分鸡致病性大肠杆菌菌株抗药性测试

用２４株致病性大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）,对２１种药敏试纸进行抗药性测试。结果表明２４株Ｅ．ｃｏｌｉ抗药性相当严重,每种药物的敏感性也有差异。 ２１种药物只有 ２种药最敏感, ８种药完全不敏感,其余 １１种药也只对 ３－ ８个菌株产生高度敏感, １－９个菌株产生中度敏感,对８－１９个菌株产生完全不敏感。     

应用RT-PCR方法快速检测水泡性口炎病毒

针对水泡性口炎病毒(VSV)的两种血清型设计了2对引物，建立RT-PCR方法，用于检测VSV。VSV接种细胞出现明显的细胞病变，经RT-PCR检测为阳性，而检测口蹄疫、猪水泡病均为阴性，说明引物具有较好的特异性。     

多重RT-PCR检测猪口蹄疫病毒、猪水泡病病毒和猪水疱性口炎病毒的研究

建立了一种同时检测猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)和猪水疱性口炎病毒(VSV)三种病原体的多重RT-PCR方法。参照文献报道的基因序列,设计合成了三对特异性引物;PCR扩增条件进行优化后,用这三对引物对同一样品中的FMDV、SVDV、VSVRNA模板进行扩增,结果同时得到了三条特异性条带,大小与试验设计相符:FMDV(208bp)、SVDV(862bp)、VSV(638bp),且对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸扩增结果为阴性;三种病毒RNA模板检出的最小量均为10fg。试验证明,此方法经济、快速、敏感、特异,可用于FMDV、SVDV和VSV这三种猪水泡性疾病的鉴别诊断及流行病学调查。     

抗PRRSVGP5和M蛋白独特型抗体替代抗原诱导机体产生中和抗体的研究

制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗独特型抗体(Ab2),探讨Ab2替代抗原对机体免疫调节作用的研究。用纯化的PRRSV-GP5(GP5-Ab1)蛋白和抗PRRSV-M(M-Ab1)蛋白单抗免疫大白兔,当免疫血清琼扩效价达1:16以上,加强免疫后心脏采血分离血清,分别纯化兔抗PRRSV-GP5IgG(GP5-Ab2)和抗PRRSV-MIgG(M-Ab2)血清,分别用GP5-Ab2、M-Ab2以及GP5-Ab2与M-Ab2混合型三种分别免疫未免PRRS疫苗的小猪,同时设PRRS弱毒苗、灭活苗和空白组作对照,免疫后21d采集猪血清,间接ELISA检测免疫Ab2和PRRS疫苗的猪血清全为阳性,空白组仍然为阴性。经细胞中和试验证明免疫Ab2及PRRS疫苗的猪血清都具有中和抗体,说明Ab2在体内具有替代PRRSV的作用诱导机体产生具有中和效应的中和抗体,从而起到保护机体免受PRRSV的感染作用,为猪繁殖与呼吸综合征病新型疫苗的研究提供了新的思路。     

己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备

采用混合酸酐法,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原.经紫外分光光度计扫描鉴定,并通过聚丙烯酰胺电泳实验,推算出牛血清白蛋白与DES-HS的结合比是1:25～1:30.以己烯雌酚-牛血清白蛋白为抗原免疫家兔,制备出多克隆抗体,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定,抗血清效价均超过了1:10 000.     

用RT—PCR检测新城疫病毒的研究

用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测新城疫病毒（ＮＤＶ）。研究结果表明ＲＴ－ＰＣＲ可检测出Ｆ４８Ｅ９株、Ｌａｓｏｔａ株、Ⅰ系疫苗株、Ｌ株、ＳＹ１株等５株ＮＤＶ尿囊液为阳性,其敏感性可测至１０－３倍稀释尿囊液病毒。ＲＴ－ＰＣＲ还能直接检测出发病鸡气管中的ＮＤＶ。