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兔病毒性出血症基因工程苗研究概况 总被引:5,自引:0,他引:5
由于兔病毒性出血症 (RHD)组织灭活苗涉及的成本、生物安全及动物福利等问题 ,国内外学者正致力于 RHD新型疫苗的研制和开发。以 VP60表达为基础的亚单位疫苗经历了最初的原核、真核表达 ,目前正寻求在转基因植物中进行表达 ,以期获得大量、低成本的口服疫苗 ;而以牛痘、金丝雀痘病毒、黏液瘤病毒等作载体的重组活载体苗 ,无疑使 RHD疫苗正在向更安全、实用及对家兔、野兔均有保护作用方向发展 ,具有很大的发展潜力和前景。国外学者在RHD基因工程苗方面研究较为广泛和深入 ,而国内尚未有此方面报道 相似文献
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说真的,过去肥城在我们的印象中似乎只有肥城桃有点名气,而肥城真正在全省有了顶呱呱的名气,也就是近一两年的事。最能显示一个地方经济实力的财政收入,近年来肥城市是打着滚儿往上翻:1992年跨过亿元大关,1993年猛增到1.85亿元,一跃跻身于全省经济强县(市)、全国明星县(市)行列。省委副书记、副省长李春亭称肥城市是“山东脊梁上的一只虎。”听说肥城市去年10月又完成了一个大动作——村村通柏油路、通自来水、通程控电话、通电的“四通”工程。日前,记者到肥城市走马观花地看了一遭,所见所闻深切感受到“四通”工程在肥城大地所产生的轰动效应。 相似文献
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兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因克隆与序列分析 总被引:15,自引:2,他引:13
自感染RHDV致死的兔肝脏组织中提纯病毒,提取病毒总RNA,以RT-PCR方法扩增得到RHDV VP60基因全长片段,克隆到T载体中,经酶切分析及PCR鉴定后进行序列测定。同一毒株不同克隆产物进行3次测序,测序结果已输送到GeenBank中(注册号为AF453761)。将测得序列与GeneBank中记录的RHDV不同分离株进行比较。比较结果表明:各毒株间核苷酸的同源性为91%-98%,氨基酸同源性为94%-99%,氨基酸变异多发生在高变区,进一步证明了毒株的高度保守性,为明确我国RHDV地方株VP60蛋白的分子特征、分子诊断试剂及新型疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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依据我国及我省实验动物发展现状,结合国际发展趋势,在全国一盘棋前提下,利用我省的医药生产、生命科学研究及资源优势,着眼于我省医药卫生、生物技术和畜牧业研究与生产等领域的发展要求,加大实验动物和动物实验的研究及质量监控力度,完善法制建设,努力培育我省实验动物产业,走出一条即符合国情、省情,又有自身特色的实验动物发展道路。 相似文献
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禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白P27基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 总被引:6,自引:0,他引:6
从人工感染禽白血病劳斯肉瘤病毒的SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中提取RNA,通过RT-PCR方法扩增出720bp的gag P27基因片段,克隆至pMD18-T载体,酶切鉴定后进行序列测定和分析,表明该片段编码序列与国外RSV分离株(JO2342)的同源性达97.3%.将该片段亚克隆至pGEX-6 P-1原核表达载体,转化受体菌BL-21,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,证明目的基因得到高效表达,所表达蛋白是大小为56kD的融合蛋白,占菌体总蛋白的23%.表达产物经Glutathion Spharose4 B树脂亲和层析法纯化后,每100 mL菌液最终可获得5 mg重组t27蛋白,蛋白纯度在90%以上.用兔抗自然P27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组P27蛋白有抗原反应活性.用纯化的重组P27蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应.所制备的重组P27蛋白和多克隆抗体将为禽白血病的诊断及ELISA试剂盒的研制奠定基础. 相似文献
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禽脑脊髓炎病毒VP1基因的克隆及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
应用RT-PCR方法,扩增出AEV Van-roekel株结构蛋白基因VP1,测序结果表明VP1基因全长810bp,编码270个氨基酸;和AEV 1143株相比,核苷酸同源性为94.2%,氨基酸同源性为99.26%.将VP1基因定向克隆到pGEX-6p-1载体谷胱苷肽转移酶基因的下游,并把重组质粒转入宿主菌BL21中,经IPTG诱导后,VP1基因得以表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,确定表达的融合蛋白大小约为58Ku,且具有良好的反应原性.将表达产物纯化后免疫试验兔,琼脂扩散试验显示免疫血清能与禽脑脊髓炎琼脂扩散标准阳性抗原呈特异反应,表明重组VP1蛋白保留了天然蛋白的部分活性. 相似文献
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