重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较

对临床上采集的899份猪血清样本。用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的间接ELISA进行检测．运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律。并扣国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测。结果表明。2种方法的符合率为91．73％。利用TG—ROC软件确定了自制的ELISA酶标板（NP—ELISA）的临界值。并标定试剂盒的特异性扣敏感性均为92．6％。ELISA的结果判定标准是：当以血清样本L为标准参考阳性血清时，样品与阳性血清的比值（S／P）小于或等于0．4为阴性；S／P在0．4与0．5之间为可疑；S／P大于或等于0．5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后，初步判定所建立的ELISA之所以出现较多的假阴性。可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体的ELISA研制——Ⅲ.ELISA试剂盒保存条件

对应用重组N蛋白抗原检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的ELISA诊断方法的主要成分（抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清）及组装成的试剂盒的保存条件进行了摸索。分别用5种方法时抗原包被板处理，结果表明用真空包装机抽真空后充入氮气法处理效果最好；酶标二抗在酶标抗体保存液中保存，能很好地保持ELISA测定结果的稳定性。时其他试剂盒组成成分的保存期分别测定后，组装成试剂盒，测定试剂盒的保存期为12个月。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化

以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种务件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。研究结果表明．重组抗原最适包被质量浓度为1mg／L,最适包被条件为4℃过夜．血清稀释度为1：40,待检血清和酶标二抗的反应时间分别为37℃ 30min和40min．底物用TMB溶液,37℃显色10min。本研究对ELISA板的蛋白稳定剂、血清稀释液的显色系统和终止液进行了研究。用全病毒进行的阻断试验结果表明．全病毒能够阻断阳性血清与包被重组N蛋白抗原的结合反应。用此方法对几种繁殖障碍性疾病的阳性血清进行检测．均为阴性．无交叉反应．表明建立的ELISA具有很好的特异性。板内和板间重复性试验结果为．同1份血清板内各孔的变异系数和板间各次的变异系数均小于7％．表明本方法的重复性好。     

血液传播的人猪共患病研究现状

概述了血液传播的人猪共患病包括一些虫媒病毒病、细菌病、寄生虫病和其他传染病的传播途径研究进展,这些人兽共患病中有些是外来人兽共患病,有些是自然疫源性疾病,有些是常见的旅行相关的细菌性疾病.这些病原微生物可通过伤口或昆虫叮咬等方式经血液传播疾病,通过对已研究的经血液传播的人猪共患病传播特点进行总结,为器官移植、动物疫病模...     

马病毒性动脉炎

马病毒性动脉炎由动脉炎病毒引起,对养马产业引起严重的经济损失。该病的临床表现和损伤类似于某些其他疾病,结合免疫组化的病理学检查、病毒分离和血清学检测可进行直接和准确的诊断。文章综合近年来的研究资料,着重对该病的临床损伤、发病机理及鉴别诊断做了简要叙述。     

青海省湟中县某奶牛场奶牛流产病因的血清学调查和分析

用试管凝集法(SAT)、间接血凝抑制试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)三种方法,对来自青海省湟中县田家寨镇某奶牛场发生过流产群的95份奶牛血清,进行布氏杆菌病、衣原体病和弓形虫病的血清学调查。结果:检出布氏杆菌病阳性血清1份,衣原体阳性血清15份,弓形虫阳性血清2份,血清阳性率分别为1.05%、15.79%和2.11%。初步说明引起该牛场流产的病因为布氏杆菌病、衣原体病及弓形虫混合感染。     

一株鸵鸟源新城疫病毒的分离及其分子生物学特性

从2005年山东省某鸵鸟饲养场发病鸵鸟分离出1株新城疫病毒，命名为SD01，采用一步法R-PCR扩增了该分离株F基因的重要功能区片段（535bp），并将其克隆到pMD18-T载体中，进行序列测定，研究了其分子生物学特性。序列分析结果表明，该分离株F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构一致（^112R—R—Q-K—R-F^117）；遗传进化分析表明，该分离株在分类地位上属于基因Ⅶd型，与目前报道的鸵鸟源和其他禽类NDV毒株基因型一样，说明目前我国流行的仍然是NDV基因Ⅶ型。提示，对于鸵鸟新城疫的防治，除进行疫苗免疫之外，采取生物安全措施也是非常重要的。     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗免疫效力试验

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）1987年最早发现于美国，1995-1996年我国大陆从进口种猪中检出该病并分离到病毒一。目前，该病在世界大部分地区已经广泛流行。由于用弱毒苗防疫后存在毒力返强或隐性发病的缺点一，灭活疫苗正受到越来越多的养殖场（户）的青睐。为预防和控制该病，自2002年以来，我们进行了猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的研究。经临床应用表明，该疫苗能有效地预防和控制由PRRSV感染引起的疫病。报告如下。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断

2002年10月胶东某规模化猪场发生以娃振母猪流产、产死胎．仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病，经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)。现将该场PRRS的诊治情况报告如下。     

牛海绵状脑病几种免疫学检测方法的比较

本文对免疫组化、免疫转印（Western-blotting)和酶联免疫吸附试验（ELISA）3种牛海绵状脑病（RSE）免疫学检测方法进行了综合比较。通过比较发现免疫组化及免疫转印法与标准品真实情况的符合率均为100%，ELISA的符合率稍差。免疫组化法操作简单、结果容易判断、价格低廉，是较适合我国使用的检测方法，用该方法对我国部分样品进行检测，结果均为阴性。