13/17易位杂合子猪互交后代主要生理生化指标测定

1991年2月我们获得3窝13/17易位杂合子猪互交后代,经核型鉴定发现有3种不同核型,即正常核型(2n=38,XX或 XY)、13/17易位杂合子[2n=37,XX或XY,rob(13/17)]、13/17易位纯合子[2n=36,XX或XY,rob(13/17)].为了进一步探明13/17易位纯合子及杂合子的种质特性,我们对这3种核型的11项生理生化指标进行了测定.     

白色力克斯兔、哈尔滨白兔及杂交后代血液蛋白多态性研究——Ⅰ.电泳图谱及多态性蛋白的基因分布

利用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法对白色力克斯兔(WR)、哈尔滨白兔(HW)及其杂种一代(F_1,♂WR×♀HW)和回交一代[B_1,♂WR×♀F_1包括分离出的力克斯毛型(B_1R)和正常毛型(B_1N)]血液中的红细胞酯酶(Es—1、Es—2和Es—3)、血清转铁蛋白(Tf)、前转铁蛋白(Prt)、后白蛋白(Po)、血红蛋白(Hb)、血清过氧化氢酶(Cat)、血清过氧化物酶(Pod)和红细胞乳酸脱氢酶(LDH)等10个蛋白位点进行了测定.结果表明,Hb、Cat、Tf和LDH呈单态,其他位点呈多态.在多态位点中,Es—1、Es—2、Es—3、Po和Prt分别出现3,3,3,3和6种表型,受2,2,2,2和3个共显性等位基因控制.Pod共有5种表型,在WR群体中只有表型Ⅰ呈单态.x~2检验表明,哈尔滨白兔在Es—1、Es—2、Es—3、Po和Prt5个位点上均处于平衡状态,而其他群体则不同程度出现不平衡状态.     

用RAPD技术研究9个家猪群体的遗传结构

利用RAPD技术对9个家猪群体的遗传多样性进行研究，包括13／17罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的3个群体、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体、及欧洲猪与易位杂合子猪产生的2个杂交后备猪群体。用17条已筛选出的产生多态性的随机引物对模板DNA进行扩增，共得到384条清晰稳定的多态型片段，片段长度在200～4000bp之间。根据多态性结果计算出群体间的共有带率F及遗传距离指数D，并以此绘制出群体的亲缘关系树状聚类图，确定了它们间的亲缘关系。     

獭兔体细胞染色体研究

对獭兔体细胞染色体常规组型、G-分带核型和18S+28S NoRs定位及数目分布进行了研究。结果表明,獭兔的染包体常规组型为2n=44,12m+11sm+12st+9t;獭兔G-分带核型与Read-ing会议制定的家兔标准G-带核型基本一致;獭兔的Ag-NoRs定位于13、16和20号染色体短臂的端部以及21号染色体长臂端部,单个细胞银染颗粒数目分布范围为1～6个,平均数为3.68个,众数为4。本研究还从细胞遗传学水平对獭兔的品种特征以及与其他品种家兔比较进行了分析.     

13/17染色体易位纯合子猪群随机扩增多态性DNA指纹分析

利用 6 0条随机引物对 13/ 17罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的群体基因组 DNA进行了RAPD分析 ,筛选出 2 2个产生多态性的随机引物 ,计算出 3个群体间及群体内的共有带率 (F)及遗传距离指数 (D) ,并以此绘制出群体的亲缘关系树状图。对群体的遗传多样性进行了研究 ,计算出遗传多样性指数 (Ho) ,并在此基础上进行了 t检验 ,结果表明了该群体的变异情况。该群体的变异主要来源于群体间的变异 ,群体间的变异大于群体内的变异。利用 RAPD技术可快速有效地检测亲缘关系较近的猪群体的 DNA多态性 ,RAPD技术在猪的基因组研究中有广阔的应用前景     

13/17罗伯逊易位猪SRY基因的克隆及其序列分析

以13/17罗伯逊易位纯合子(2n=36)、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]及正常猪为试验材料,根据猪SRY基因蛋白质编码区的核心序列,设计PCR引物,扩增得到SRY基因片段,随机选取克隆质粒进行测序分析。结果表明,13/17罗伯逊易位纯合子猪与正常猪的SRY基因的核心序列相比有1个碱基发生突变;而13/17罗伯逊易位杂合子猪与正常猪SRY基因的核心序列相比有5个碱基发生突变。     

银狐α-卫星DNA的克隆及序列分析

利用限制性内切酶Sac I酶切银狐基因组,经琼脂糖凝胶电泳,对特异性亮带进行克隆、测序及序列分析.结果获得9个银狐α-卫星DNA序列,该卫星DNA单体大小为737bp,G+C平均为52.7%,单体之间同源性为90%～97%,每个单体由3个约245bp的亚重复串联构成,亚重复之间的同源性为51%～57%.银狐与犬α-卫星DNA的同源性约为77%,而与蓝狐α-卫星DNA的同源性大于90%.α-卫星DNA在蓝狐基因组内的含量显著高于银狐.由于银狐(2n=34+Bs)与蓝狐(2n=50)染色体数目存在较大差异,因此推测α-卫星DNA可能参与了染色体易位,是染色体断裂与融合的靶序列.     

13/17罗伯逊易位猪生长抑素基因的多态性研究

采用微量全血培养法制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的309头后代进行核型鉴定,结果样本中存在3种核型的猪：正常核型猪（2n=38）、易位杂合子猪（2n=37）和易位纯合子猪（2n=36）;利用PCR SSCP技术检测发现生长抑素基因外显子1不存在多态性;其内含子的266～602 bp片段存在2个突变位点(T520C,G521T),但仅检测到2种基因型：AA和AB。遗传多态性分析结果表明,不同杂交组合后代及不同核型的猪群中AA基因型频率（频率范围为0.58～0.77）和A等位基因频率（频率范围为0.79～0.90）均显著高于其AB基因型频率（0.23～0.42）和B等位基因频率（0.10～0.21）;易位杂合子猪的AB基因型频率（0.42）均高于正常猪（0.25）及易位纯合子猪（0.40）。经卡方检验,差异不显著（P>0.05）,群体的基因型频率处于哈代－温伯格平衡状态。