红褐色乌苏里貉MC1R基因的克隆及序列分析

为了探讨红褐色貉的促黑素细胞激素受体(MC1R)的序列长度、多态性以及与其他物种的同源性。以青岛莱西养殖基地的野生型乌苏里貉8只,红褐色乌苏里貉7只,吉林白貉6只,银黑狐6只为研究对象,用提取貉和银黑狐的毛囊DNA作为模板,根据GenBank已知序列(GenBank：HM852533.1)设计引物,利用克隆测序技术,通过SNP检测,分析MC1R基因在不同毛色乌苏里貉的表达水平和毛色之间相关性以及与其他物种的同源性。结果表明：本实验成功成功获得了红褐色貉MC1R基因序列长度为1329bp,与已知序列同源性98%,13处突变,与野生型乌苏里貉同源性达到99%,8处突变。通过酶切鉴定在MC1R基因约300bp处酶切得到2种基因型AB型和BB型,红褐色貉为AB型,野生型貉为BB型。根据实验结果推测MC1R基因存在红褐色毛色性状相关的功能突变位点,从而导致毛色突变。     

猪CTSZ基因的克隆及真核表达载体的构建

组织蛋白酶Z基因(Cathepsin Z gene, CTSZ)是影响猪生长、肉质等性状的一个重要候选基因.本研究以长白猪的背最长肌为试验材料,采用RT-PCR的方法克隆CTSZ基因CDS序列全长,对该序列进行了生物信息学分析,并构建pEGFP-N1-CTSZ融合表达载体,通过脂质体介导瞬时转染猪成纤维细胞,30 h后进行荧光表达检测.结果本试验克隆出猪CTSZ基因CDS全序列912 bp,并成功构建pEGFP-N1-CTSZ融合表达载体,瞬时转染后在猪成纤维细胞中表现为绿色荧光蛋白表达.本试验为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础.     

ConA与PHA在猪染色体制备中的比较

以13/17罗伯逊易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]、正常猪为实验材料,用刀豆素A(ConA)和植物血球凝集素(PHA)两种不同的刺激源刺激外周血淋巴细胞来制备染色体,并对两种刺激源的最佳使用浓度进行了研究:ConA的最佳浓度为:0.2 mg/ml,PHA的最佳浓度为:1 mg/ml,二者同样在最佳浓度时,ConA的制片效果显著优于PHA,t检验结果为:t0.05(18)=2.101＜t=2.135＜t0.01(18)=2.878.     

rob(13/17)纯合子猪的联会复合体分析

采用表面铺展法和硝酸银染色技术对rob(13/17)纯合子猪减数分裂的配对行为进行了联会复合体（synaptonemal complex,SC）的电镜观察和分析。结果表明，rob(13/17）纯合子猪的SC配对行为正常，未见三价体和侧生组分形成。SC的形成开始于偶线期，成熟于粗线期，解体于双线期。在减数分裂前期，性染色体轴呈强嗜银性，配对明显落后于常染色体。根据减数分裂前期性染色体的形态和行为，把性染色体的SC分为4个类型。     

貉α-卫星DNA的克隆及序列分析

根据蓝狐、银狐及犬口_卫星DNA序列设计引物RSP1和RSP2在貉基因组中经PCR扩增获得5条分子质量大小不同的DNA片段,分别命名为RSP1～RSP5,经克隆及测序获得14个RSP序列;序列分析表明,除RSP4外,同类RSP片段的不同序列的长度差异很小且同源性大于90%,不同种类的RSP片段的长度差异很大,最大为1 815 bp,最小为495 bp,但所有序列的3'端约500 bp序列都具有高度的同源性,大于90%;经Blast检索,所克隆的RSP序列的部分区域与蓝狐、银狐及犬α-卫星DNA序列具有约75%的同源性,证明所克隆的RSP序列为貉α-卫星DNA序列,但其单体大小及亚重复的组成还需进一步研究.     

基因多态性与经济性状的相关分析

利用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的394头后代猪进行分群;应用PCR RFLP技术在〖STBX〗POU1F1〖STBZ〗基因的扩增片段（1746 bp）中检测到1个RsaⅠ限制性内切酶的多态酶切位点A（3种基因型）;应用PCR SSCP技术检测1个〖STBX〗POU1F1〖STBZ〗基因第5内含子上的突变E（2种基因型）,同时结合生长和胴体品质测定记录研究基因型对生产性状的遗传效应。结果表明,位点A的基因型对生长有显著影响（P<0.05）,位点E基因型对生长和眼肌面积有显著影响（P<0.05）。研究结果初步揭示POU1F1多态性与生长、眼肌面积等存在相关,推测POU1F1多态性可作为罗伯逊易位杂合优势遗传机制的一种分子水平上的解释。     

猪肌内脂肪调控相关基因的研究进展

脂肪不仅是动物能量的主要来源,而且还与肉品的风味品质及食用价值有很大的关系.猪肌内脂肪的含量是影响猪肉品质的一个重要因素,它影响肉的嫩度、系水力、剪切力值、风味和多汁性.肌内脂肪的沉积受多种因素的影响,包括遗传、营养、环境等因素.该文首先介绍肌内脂肪对猪肉品质的影响,其次,再从基因水平阐述各种基因对肌内脂肪调控的相关研究进展,以期通过调控肌内脂肪含量获得更高品质的猪肉产品.     

施格猪与三江白猪及芦台白猪杂交试验报告

利用施格猪与三江白猪及芦台白猪进行级进杂交,分3批(共198头)进行对比试验,测定了各杂交组后代的生产性能和繁殖性能.结果,各杂交组后代平均日增重无显著差异,三江白猪各杂交组后代的日增重平均数为634.71g,芦台白猪各杂交组后代的日增重平均数为647.85g.芦台白猪各杂交组后代的胴体瘦肉率(61.5％)明显高于三江白猪各杂交组后代(55.02％).三江白猪及芦台白猪各杂交组后代经产母猪禽产活仔数12头左右,初产母猪9头以上.     

染色体方法学在畜牧兽医方面的应用

染色体是生物遗传物质——基因的载体,是当前研究生物遗传的物质基础。它对生物的进化、遗传、变异、发育和增殖等过程的调节和控制都起着极重要的作用。近十年来,在生物学、医学、农业等方面都在大力开展染色体的研究,以期达到解决生物学上一系列重大理论问题、防治疾病和改良品种等目的。本文仅就染色体方法学在畜牧兽医方面的应用,作一简单介绍。     

东北民猪的染色体组型及分带研究

本文采用外周血淋巴细胞短期培养方法,骨髓细胞染色体直接制片技术,以及G—分带、C—分带和银染技术,对东北民猪的染色体组型、G—分带带型以及结构性异染色质的分布.18S+28S rDNA的定位和数目进行了分析。结果表明,东北民猪二倍体细胞染色体数为2n=38。雄性为18对常染色体和1对性染色体XY;雌性为18对常染色体和1对性染色体XX。根据染色体测量结果,将所有常染色体分为四组:A组1—5对,为近中着丝点染色体;B组6—7对,为近端着丝点染色体;C组8—12对,为中着丝点染色体;D组13—18对,为端着丝点染色体。性染色体X为中着丝点染色体,其大小介于8号与9号染色体之间。Y为最小的中着丝点染色体。东北民猪染色体的G—分带带型与国内外其它品种的G—分带带型基本一致。经胰酶—Giemsa分带处理后,同一染色体在不同的长度可以显示出不同数目的G—带;染色体越长,所显带的数目就越多。C—分带分析揭示,东北民猪染色体的着丝点区均有结构性异染色质的分布,其中1—4号,13—18号染色体的着丝点区显著的深染,13—18号染色体的着丝点区,结构性异染色质分布范围大并呈现多态现象。几乎整个Y染色体都有结构性异染色质的分布。银染分析揭示,18S+28S rDNA定位于8号和10号染色体的次缢痕处,每个细胞18S+28S rDN A的分布范围为1—3