白色力克斯兔、哈尔滨白兔及其杂种血液蛋白多态性研究——Ⅰ 电泳图谱及多态性蛋白的基因分布

利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对白色力克斯兔(WR)、哈尔滨白兔(HW)及其杂种一代(F_1,WR×HW)和回交一代(B_1,WR×F_1)血液中的红细胞酯酶(Es—1,Es—2和Es—3)、血清转铁蛋白(Tf)、前转铁蛋白(Prt)、后白蛋白(Po)、血红蛋白(Hb)、血清过氧化氢酶(Cat)、血清过氧化物酶(Pod)和红细胞乳酸脱氢酶(LDH)等,10个蛋白位点进行测定。结果表明,Hb、Cat、Tf和LDH在所有被测群体中呈单态,Es-1、Es-2、Es-3、Po和Prt呈多态,分别受2,2,2,2和3个共显性等位基因控制,并表现出3,3,3,3和6种表型。X~2检验表明,哈尔滨白兔在Es-1、Es-2、Es-3、Po和Prt位点均处于平衡状态,其它各群体各有自己的平衡位点和非平衡位点。Pod在白色力克斯兔中呈单态,在其它群体均呈多态,该位点遗传机制不明。     

13/17罗伯逊易位猪POU1F1基因多态性与经济性状的相关分析

利用外周血淋巴细胞培养制备染色体标本,对13/17罗伯逊易位猪的3种杂交组合的394头后代猪进行分群;应用PCR-RFLP技术在POU1 F1基因的扩增片段(1746 bp)中检测到1个RsaⅠ限制性内切酶的多态酶切位点A(3种基因型);应用PCR-SSCP技术检测1个POU1 F1基因第5内含子上的突变E(2种基因型),同时结合生长和胴体品质测定记录研究基因型对生产性状的遗传效应。结果表明,位点A的基因型对生长有显著影响(P<0.05),位点E基因型对生长和眼肌面积有显著影响(P<0.05)。研究结果初步揭示POU1 F1多态性与生长、眼肌面积等存在相关,推测POU1 F1多态性可作为罗伯逊易位杂合优势遗传机制的一种分子水平上的解释。     

猪A-FABP基因真核表达载体的构建及其组织表达

本实验以长白猪背最长肌为实验材料,进行组织RNA的提取及A-FABP基因的克隆,构建p EGFPN1-A-FABP真核表达载体,并通过脂质体转染成纤维细胞,48 h观察荧光表达。同时应用荧光定量PCR法检测猪7种不同组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、腿肌)中A-FABP基因的差异表达。结果表明:成功构建p EGFP-N1-A-FABP融合表达载体,并在细胞中表达绿色荧光蛋白;A-FABP基因在7种组织中均有表达,其中背最长肌和腿肌中A-FABP基因的表达量最高,与其他组织相比差异极显著(P0.01),而脾脏和肾脏中的表达量相对于心脏、肝脏和肺脏差异显著(P0.05),而A-FABP基因表达量在心脏、肝脏和肺脏中差异不显著(P0.05)。表明该基因能够在真核载体和细胞中表达,并且在猪不同组织的表达具有差异性。     

转基因技术对畜牧业发展的意义

转基因技术的飞速发展不仅为基因表达、调控和遗传研究提供了一个理想的实验体系,更为生物定向改良和分子育种提供了一种较佳的方法,使其成为基因工程和育种的最有效途径。该文简要阐述了转基因技术的进展,并从动物基因工程育种、生物反应器、异种器官移植、人类疾病模型及环保型转基因动物等方面阐述了转基因技术对畜牧业发展的意义,最后阐述了转基因技术的展望。     

红褐色乌苏里貉和吉林白貉 KIT 基因第二外显子的克隆及多态性分析

选取野生型乌苏里貉、红褐色乌苏里貉和吉林白貉各3只为研究对象,利用克隆测序技术,得到长为276 bp的KIT基因第二外显子序列,分析其多态性及与其他物种的同源性。结果显示：红褐色乌苏里貉KIT基因第二外显子与犬、狐、家猫、虎鲸、野猪、马的同源性分别为97％,97％,92％,89％,87％,87％;对野生型乌苏里貉、红褐色乌苏里貉和吉林白貉KIT基因第二外显子序列进行对比分析发现,3种貉序列完全匹配,说明在此处未发生突变。     

转外源基因(pGH)在猪染色体上整合状况

应用地高辛标记技术,对通过睾丸注射法制备的转基因猪进行荧光原位杂交,确定外源pGH(猪生长激素)基因在染色体上的整合位点及数目.选用睾丸注射法制备的140日龄转基因长白猪6头与同期同龄非转基因猪2头进行血细胞培养及荧光原位杂交.结果显示,外源基因已整合于染色体上,但在染色体上的整合位点具有随机性,而且不同的转基因猪阳性个体外源基因在染色体上的整合位点有差异,但集中分布于1、6、8、13号染色体上;非转基因猪染色体上无杂交信号;个体杂交信号数越多,其生长速度越快.     

猪13/17罗伯逊易位染色体的显微分离及DOP-PCR扩增

以13／17罗伯逊易位杂合子猪[2n=37，XY或XX，rob（13：17）]为材料，制备其有丝分裂中期染色体，利用显微分离技术对13／17罗伯逊易位染色体进行分离，并将单条染色体进行简并寡核苷酸引物PCR（degenerate oligonucleotide primer-PCR．DOP-PCR）扩增，其扩增片段大小主要在0．2～2．5kb之间；以DOP-PCR扩增产物为模板，分别以猪13、17号染色体近着丝点微卫星标记S0282和SW335为扩增目的基因，对D0P-PCR扩增产物进行鉴定，结果表明DOP-PCR产物来源于13／17罗伯逊易位染色体。该方法的成功建立为进一步从分子水平上研究家猪13／17罗伯逊易位所引起的表型效应的遗传机制以及筛选猪13和17号染色体上新的分子遗传标记奠定了基础。     

兴安落叶松鞘蛾性引诱剂在发生期监测上的应用

利用100μgZ5-10：OH性引诱剂诱捕器于2001年在内蒙古大兴安岭绰尔林业局对兴安落叶松鞘蛾成虫发生期进行监测。结果表明，3种不同虫口密度林分成虫羽化的始，盛和末期及持续期基本一致，成虫始见期为6月20－22日，末期为7月10－12日，持续期22－24天，根据监测的发生期，能够切实指导成虫期的生产防治。     

转双基因(pGH/IGF-Ⅰ)猪胎儿成纤维细胞系的建立及鉴定

本研究旨在建立转双基因（pGH/IGF-Ⅰ）猪胎儿成纤维细胞系,保存转双基因猪的成纤维细胞以便于后续细胞水平研究。试验采用胰蛋白酶消化法对猪胎儿躯干组织进行原代培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功分离出转双基因猪胎儿成纤维细胞,并对细胞进行了形态学观察、冻存前和复苏后细胞活力检测、生长动力学分析、波形蛋白免疫组化及微生物污染检测等生物学特性分析。结果显示,原代细胞经过胰蛋白酶消化和差速离心分离培养出成纤维细胞,冻存前细胞活力为94.3%,冻存3个月后细胞复苏后活力为91.2%;细胞生长总趋势呈“S”型,经历了潜伏期、指数生长期和平台期3个阶段;细胞波形蛋白在成纤维细胞中呈阳性反应;细胞的细菌、真菌、病毒和支原体检测均为阴性。结果表明本试验成功建立了转双基因猪成纤维细胞系。     

补齐短板 提高丘陵山区玉米全程机械化生产水平

实现丘陵山区玉米全程机械化发展是保障粮食安全和稳粮、节本、增产、增收的一项重要举措,是转变传统玉米在耕种收环节的生产方式和提高生产效率的重要基础。文章分析了当前制约师宗县丘陵山区玉米全程机械化推广过程中存在的农业机械化作业地理条件受限、农作物种植结构分散、规模化程度低、农机装备不足、机具适用性差等问题。提出加强农机作业基础设施建设、加快推进玉米耕种收转型升级、协调农机技术与农艺技术融合发展等对策,从而提高师宗县玉米全程机械化生产水平。