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为进一步从T668基因编码的蛋白中寻找到敏感性及特异性较高的抗原表位,对T668主要抗原表位区进行抗原表位作图,进一步设计了一套共16条覆盖整个抗原表位决定区的短肽,并与GST融合表达,用Western blot筛选具有高反应原性的短肽。结果显示,N5EM4、N5EM5、N5EM7、N5EM8、N5EM9、N5EM116条融合短肽与感染旋毛虫的猪血清有强阳性反应条带,但均表现出较明显的假阳性。将筛选出的6条短肽人工合成后与牛血清白蛋白偶联,利用Dot blot进一步验证,结果显示融合短肽N5EM11-BSA表现出良好的反应原性和特异性。此抗原短肽的发现对进一步确定T668蛋白虫体定位、功能及旋毛虫病诊断试剂盒的研发奠定了基础。 相似文献
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华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库的构建及鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
构建华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础,也为进一步研究华支睾吸虫后囊蚴感染宿主的信号传导机制、探究其致病机理提供新的起点。从中国东北疫区(镇赉县)麦穗鱼肉里分离收集华支睾吸虫囊蚴,采用Trizol Reagent提取其总RNA,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA,反转录合成第1链cDNA及第2链cDNA,加EcoRⅠ接头,经XhoⅠ酶切,用CHROMA SPIN-400柱离心层析纯化后,与载体λZAP Express连接,Gigapack III Gold包装蛋白体外包装,构建华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库。结果表明,构建的华支睾囊蚴cDNA表达文库的库容量为9.15×105 PFU,重组率为99.5%,扩增后文库滴度为1.6×1010PFU/mL。成功构建了一高质量的华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库。 相似文献
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东北地区4株猪,犬旋毛虫间及与国际标准虫株间的杂交试验 总被引:2,自引:0,他引:2
为了给中国旋毛虫虫株的分类提供依据,将分离自中国东北地区的4株猪,犬源旋毛虫虫株分别接种于小鼠,按常规分离出肌幼虫,纯化后,设8个杂交试验组,将每2个虫株的雌,雄幼虫体各5条混合,以食管灌注法接种于小鼠,42d后扑杀,消化,集虫,计数回收肌幼虫数。同法进行了哈尔滨猪株,犬株与国际标准虫株Trichinella spiralis(T.s).T.nativa(T.na)之间的杂交试验。 相似文献
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本世纪40年代以来,关于毛形属的分类学问题一直争论不休,直到近年来国外的研究日趋成熟,目前确认的有8个种:T.spiralis,T.natira,T.pseudospiralis,T.nelnom,T.britovi,T.5,T.6,T.8.虫种的鉴定一般有形态学、生物学、分子生物学、免疫学以及遗传学等.近年来随着生物技术的发展,许多学者从基因水平对虫种的分类又提供了一些新的依据,然而我们认为作为不同种株的鉴定其种间杂交仍然是分类中 相似文献
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致病性嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物菌株的分离鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行了细菌分离鉴定,共检出46株嗜水气单胞菌疑似菌,通过生化试验结合PCR扩增气溶素基因Aer,确定其中22株为致病性嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性,其中有4株对喹诺酮类药物耐药,并且为交叉耐药,耐药菌检出率为18.2%,纸片扩散法检测其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌负染后电镜观察,耐药菌表面有许多大小不同的球形结构,而敏感菌表面则为细丝状菌毛结构。 相似文献