碱蓬干草饲喂水平对羔羊肌肉及器官组织中矿物元素的影响研究

盐生植物碱蓬是北方盐渍化草地一种潜在的饲料资源,其矿物元素富集的特征增加了家畜采食后的矿物质缺乏和不平衡的风险.本试验重点研究了羔羊日粮中添加0％,25％,50％碱蓬干草饲喂50 d后,对羔羊肌肉组织、心、肝、肾中矿物元素含量的影响.试验结果表明,日粮中添加碱蓬对肌肉组织中钙含量有显著的影响(P＜0.05),随着碱蓬含量的增加,羊肉中钙含量显著的减少;铁含量随碱蓬增加有提高的趋势,而且接近显著的水平,铜含量表现降低的趋势,但统计差异不显著.肝中铁和铜的含量变化也表现出与肌肉组织相似的趋势.添加碱蓬对心和肾组织中的各种矿物元素无显著的影响.因此,短期饲喂碱蓬干草对羔羊组织中矿物元素无明显的不利影响,但长期饲喂应关注动物发生铁过量和钙、铜缺乏的风险.     

PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用

PCR是一种体外核酸扩增技术 ,具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点 ,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。文章系统地阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 ,并对引物基因设计、PCR扩增过程中的技术参数和常见疑难问题做了归纳总结。同时简要介绍了PCR技术的研究进展 ,展望了今后微生物检测的发展方向     

家蚕丝氨酸蛋白酶BmSP141的表达特征及对饥饿的响应

【目的】分析家蚕(Bombyx mori)丝氨酸蛋白酶基因BmSP141序列信息,明确其时空表达模式,结合饥饿与重新喂食处理对其表达的影响,探究该基因在家蚕中的功能。【方法】对家蚕丝氨酸蛋白酶基因BmSP141进行T-A克隆,得到其编码区核苷酸序列;应用生物信息学在线网站对该基因编码区推导的氨基酸序列、分子量、结构域等信息进行分析;利用ClustalX1.8和MEGA5.02软件对BmSP141与其他物种的丝氨酸蛋白酶进行多序列比对和系统发生树分析;构建原核表达载体p28-BmSP141,并转化到Rosetta（DE3）菌株中诱导表达,利用镍柱亲和层析纯化重组蛋白。利用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR方法对其组织和时期表达特征进行分析;采用蛋白质免疫印迹（Western blot）技术,分别分析BmSP141蛋白在家蚕5龄第3天各组织的表达情况和5龄幼虫中肠的表达变化;通过免疫荧光定位分析BmSP141蛋白在4龄幼虫中肠的分布情况;利用实时荧光定量PCR和Western blot方法对饥饿处理和再喂食后BmSP141的表达情况进行分析。【结果】BmSP141编码含有292个氨基酸的蛋白,其中第1-17位氨基酸为信号肽,其成熟体蛋白预测分子量为25.9 kD,等电点为7.8。同源序列比对表明,BmSP141与烟芽夜蛾丝氨酸蛋白酶和蓓带夜蛾丝氨酸蛋白酶序列同源性较高,分别达到62%和63%。这些同源序列具有保守的催化三联体,与活性相关的基序也很保守,但与胰凝乳蛋白酶保守的底物特异性位点相比,BmSP141的底物特异性位点发生改变。在16和37℃条件下诱导后,重组蛋白均以包涵体形式表达,经镍柱亲和层析纯化后得到了较纯的重组蛋白,并用该蛋白制备了效价较高的多克隆抗体。组织和时期表达特征分析表明,该基因主要在家蚕幼虫的中肠组织特异性表达, 且在幼虫起蚕到食桑期表达逐渐增加,但眠期表达下降,蛹期和成虫期表达水平较低。Western blot分析也表明,BmSP141蛋白仅在家蚕中肠组织表达,且从5龄起蚕到上蔟表达量先增加后降低。免疫荧光定位结果表明,BmSP141定位于中肠上皮细胞的细胞质中,进一步证实BmSP141在中肠特异表达。在转录和翻译水平,BmSP141饥饿处理后表达量显著下调,而重新喂食后其表达量上调,表明BmSP141的表达受到消化道食物的诱导。【结论】家蚕丝氨酸蛋白酶BmSP141在中肠组织表达,在幼虫期食桑期高表达,蛹期和成虫期表达水平较低,受消化道食物的诱导而上调表达,推测该基因可能参与家蚕中肠的消化过程。     

河南太康县2007年棉花良种补贴品种示范总结

2007年太康县承担了国家棉花良种推广补贴项目,补贴面积3.33万hm2.通过采取一系列行之有效的措施和扎实的工作,顺利地完成了项目供种任务,取得了较好成效.一是有效促进了棉花优势区域发展,进一步优化了棉花生产区域布局.二是调动了农民植棉积极性,稳定了棉花种植面积.     

不同温湿度对储存期棉种发芽率的影响

棉花作为太康县种植面积较大的经济作物，是种植业收入的主要来源。对促进农民增收、农村稳定有很大作用。但由于棉种的存放不科学，造成发芽率降低，不能一播全苗，直接影响其产量，通过对不同温湿度储存条件下棉种发芽力试验。分析棉种适宜储存环境及其种子的复苏能力。为加快棉花产业发展，为农业增效，农民增收服务。     

生物技术综合大实验教学探讨

生物技术综合大实验教学是培养学生动手能力、创新能力及逻辑思维能力的重要手段。从课程设计的思想及目标、课程设计内容及教学模式3个方面探讨生物技术类综合性实验教学改革,以为生物技术综合大实验教学提供指导。     

尤质高产玉米新品种郑韩358的选育

1选育过程 1．1选育目标 选育配合力高、农艺性状优良、遗传传递力强的玉米自交系,组配产量高、品质优良、抗病性好、适应性广的玉米杂交种。     

丝苗米优质高产栽培技术

近年来优质丝苗米品种,在广东省稻作区广泛种植。结合兴宁市生产实际,对丝苗米的特点以及优质高产栽培技术进行简单的总结探讨,以提高丝苗米的品质、增加经济效益。     

番茄ZF遗传转化再生体系的研究

番茄 ZF无菌苗出芽后 5～ 7d,子叶切成 0 .5 cm× 0 .5 cm小块 ,下胚轴切成 1cm的小段作为外植体 ,以 MS为基本培养基 ,玉米素 1.0 mg/ L,6 -苄基腺嘌呤 1.0 m g/ L 分别与吲哚乙酸 0 .0 5 ,0 .2 ,0 .5和 1.0 mg/ L配成 7个激素组合 ,经诱芽比较 ,确定 MS+BA1.0 m g/ L+IAA0 .2 mg/ L 为最佳生芽培养基 ,MS添加吲哚乙酸0 .0 ,0 .0 5 ,0 .1和 0 .2 mg/ L 进行生根比较 ,确定 MS+IAA0 .0 5 mg/ L 为最佳生根培养基。卡那霉素 (Kan)临界浓度确定为 2 5 mg/ L。转化培养过程为 :外植体于生芽培养基 2 6℃ ,2 6 0 0 lx光下预培养 2 4 h。农杆菌 L BA4 4 0 4过夜培养 ,用 MS培养液稀释 10～ 2 0倍 ,侵染外植体 5 m in,2 8℃黑暗共培养 4 8h。然后在 MS+BA1.0 mg/ L+IAA0 .2 m g/ L+Kan2 5 mg/ L+Cef2 0 0 mg/ L 筛选培养基上诱芽 ,每 14 d转接 1次。芽长至 2 cm时 ,切下转至 MS+IAA0 .0 5 mg/ L+Kan2 5 m g/ L+Cef10 0 m g/ L 培养基上生根。     

肌注猪促生长激素释放因子(pGRF)基因质粒后猪神经内分泌生长轴激素的变化规律

试验探讨pGRF基因质粒在猪体内的表达效应及作用机理。将10头体重相近([15.24±0.53)kg]、遗传基础相似的健康杜×长×大三元杂交阉公猪安装颈静脉血导管,随机分成2组。试验开始时,试验组每头猪左侧臀部肌肉注射4.5mgpGRF基因质粒,第30d时,试验组每头猪右侧臀部肌肉注射相同剂量pGRF基因质粒,对照组两次分别注射2ml生理盐水。测定采样血浆中GRF、SS、GH及IGF-I的浓度。结果表明:①第一次注射pGRF基因质粒8d时,试验组GH的水平较对照组有显著提高(P<0.05),第12dGH水平达最高,为对照组的157%(P<0.01);第8、12、17、22d的IGF-I水平分别为对照组的185%(P<0.01)、237%(P<0.01)、200%(P<0.01)、131%(P<0.05);第12d试验组的SS水平较对照组有明显下降(P<0.05),其余时间无明显变化;GRF的水平在第12d分泌量达到最高,为对照组的143%(P<0.01),17d为对照组的133%(P<0.05),此后逐步下降又上升,与对照组的水平差异不显著。②在此试验条件下,基因质粒在5～8d开始缓释表达,12d左右达到表达高峰,其有效剂量持续时间在20d以上。③第二次注射基因质粒后,试验组第33d以后GH的水平逐渐升高,到45dGH水平达到峰值,为对照组的144%(P<0.05);第39、45、60d的IGF-I水平分别为对照组的166%(P<0.05)、173%(P<0.05)、117%(P<0.05);GRF的水平在45d分泌量达到最高,为对照组的138%(P<0.05),其余时间无明显变化;SS水平较对照组无显著差异。④相关分析表明:注射基因质粒后,试验组GH与GRF的相关系数为0.81(P<0.01),与SS的相关系数为-0.65(P>0.05);GH、GRF与IGF-I存在着正相关,SS与IGF-I存在负相关性,除GH与IGF-I的相关系数为0.67,达到显著正相关水平(P<0.05),其余指标与IGF-I均未有显著相关。