公猪精液传播的疫病及其控制

<正>1垂直传播性疫病的传播途径垂直传播性疫病主要有两种传播途径,一种是母猪传给仔猪。母猪主要通过胎盘感染(胚胎子宫内感染)、分娩时直接或间接接触、乳汁传播(如仔猪流行性腹泻是近两年影响养猪业最严重的疫病,在其流行期间,母猪的乳汁可携带此病毒)和胚胎移植等形式将疫病传给仔猪。二是公猪传给母猪。公猪通过配种(包括人工授精和自然交配)将精液中携     

未知病毒检测方法在动物病毒病诊断中的应用

近年来,新发动物疫病多以病毒病为主,往往具有不可预测性且对畜牧业生产造成重大损失,因此如何快速诊断其主要病原成为防控新发疫病的关键因素。对新发疫情的传统诊断,往往需要依靠经验,逐步排除已知病原后才能确定疫情的主要因素,随着分子生物学及测序技术的发展,临床上出现了很多直接从病料中检测未知病毒的方法,这些方法逐渐成为确诊未知疫情的主要手段。作者主要阐述近年来应用于发现未知病毒的检测方法。     

A型猪塞内卡病毒CH-HNXC株灭活疫苗免疫效果评价

塞内卡病毒病（Senecavirus Disease，SVD）是由A型塞内卡病毒引起的一种水疱病。SVA属于小RNA病毒科、塞内卡病毒属中唯一成员，其基因组为单股正链不分节段的RNA病毒。SVA感染后各个年龄段猪群均可发病。临床上主要表现为猪鼻吻、蹄部水疱病变，母猪伴有发热和厌食，新生仔猪伴有腹泻、脱水等症状。     

猪流行性腹泻病毒单克隆抗体8A3的CHO细胞瞬时表达与稳转细胞池构建

为实现猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)的体外高效表达，首先利用基因工程技术获得了PEDV鼠源mAb 8A3的轻链和重链序列，然后构建真核表达载体pCHO1.0-8A3-H-L,再利用CHO细胞对mAb 8A3进行瞬时表达，最后经稳定转染以获得稳定表达8A3的CHO细胞池。结果显示，CHO细胞表达的mAb 8A3在免疫印迹和间接免疫荧光分析中均可特异性识别PEDV,且具有正确的IgG抗体构型；且CHO细胞表达的mAb 8A3可以中和G2a、G2b和G1基因型PEDV。实现了PEDV mAb 8A3的CHO瞬时转染表达，并获得了稳定表达8A3的CHO细胞池，为PEDV mAb稳定表达细胞系的筛选奠定了基础，同时为PEDV的诊断和治疗提供了新型基因工程抗体材料。     

犬腺病毒研究进展

<正>犬腺病毒(Canine adenovirus, CAV)分为2个血清型，犬腺病毒1型(Canine adenovirus 1,CAV-1)主要引起犬急性败血性肝炎，熊和狐狸脑炎；犬腺病毒2型(Canine adenovirus 2,CAV-2)主要引起犬科动物传染性喉气管炎和传染性腹泻等。CAV是目前已经发现的哺乳动物腺病毒属中致病性强、感染动物广的双股DNA病毒之一，该病毒在全世界范围内普遍存在，     

猪伪狂犬病病毒gB、gC和gD蛋白的表达及诊断抗原筛选

为研发猪伪狂犬病的免疫学诊断试剂，利用杆状病毒表达系统表达了猪伪狂犬病病毒(PRV)gB、gC和gD蛋白，并对蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定；将纯化后的3种蛋白分别制备成不同蛋白类型的疫苗免疫健康仔猪，比较蛋白的免疫原性；将3种蛋白分别作为包被抗原建立间接ELISA方法，检测从不同地区收集的临床血清，与PRV中和试验检测结果进行了比较。结果显示，成功拯救出重组杆状病毒rPRV-gB-His株、rPRV-gC-His株和rPRV-gD-His株，经IFA鉴定，均可与猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应；表达出的蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定，可见大小分别约为120 ku、65 ku和50 ku的蛋白条带；3种蛋白免疫原性比较结果显示gD蛋白疫苗免疫组猪血清中和效价最高(1∶22.4～1∶32.0);3种蛋白建立的间接ELISA方法检测30份临床血清，结果gD蛋白作为包被抗原建立的ELISA方法与PRV中和试验的符合率最高(100.0%)。表明gD蛋白是更好的诊断抗原，可用于PRV抗体检测试剂盒的开发。     

近5年国内猪重要传染病疫苗的研究进展

猪传染病是制约养猪业生产的主要因素，重大传染病的暴发或流行会导致严重的经济损失。我国动物疫病病原种类多、病原复杂、流行范围广。     

山东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及基因组序列分析

为了解目前我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行株基因组特征，本实验室于2020年从山东某养殖集团不同场区采集7份疑似感染PRRSV的组织样品，进行RT-PCR检测，将阳性样品接种猪肺泡巨噬细胞(PAM)分离病毒，利用间接免疫荧光试验(IFA)对分离病毒进行鉴定，经PCR对分离株全基因组序列分段扩增，采用生物信息学软件对分离株的ORF5基因及全基因组序列的同源性、NSP2氨基酸序列缺失特征和ORF5氨基酸变异位点及糖基化位点、ORF5基因与全因因组遗传演化关系分析以及全基因组的重组分析。结果显示：7份组织样品均呈PRRSV阳性，其中有6份阳性样品接种猪原代肺泡巨噬细胞(PAM)后产生细胞病变，且通过荧光显微镜可观察到特异性绿色荧光，表明分离到6株PRRSV；对6株PRRSV的全基因组序列扩增、测序、拼接，通过全基因组序列同源性对比发现6株PRRSV全基因序列之间的同源性约99.4%～100%，表明6株PRRSV是同一来源，选择其中1株(SDlz0720株)进行后续分析。序列分析结果显示：SDlz0720株NSP2氨基酸序列均具有“111+1+19aa”的缺失特征，与NADC30-...     

我国近5年类NADC30 PRRSV毒株序列的重组及限制性片段长度多态性分析

为了解我国类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株的流行和遗传变异情况，本研究利用生物信息学软件对本实验室2016-2020年获得的64条类NADC30毒株序列进行分析。Nsp2氨基酸序列比对结果表明，64株毒株均表现出与NADC30毒株一致的131个不连续的氨基酸缺失。其中，9株在Nsp2区域除该缺失特征外，另含有额外的氨基酸缺失。基于全基因组遗传演化分析结果表明，61株分布在Sublineage 1.8(类NADC30),3株分布在Lineage 8(HP-PRRSV)。而基于ORF5序列的遗传演化分析结果则更分散，56株分布在SubLineage 1.8,5株分布在Lineage 8,2株分布在Lineage 5(类VR2332),1株分布在Sublineage 1.5(类NADC34)。经RFP4和Simplot生物学软件进行重组分析结果表明，64株毒株中可能有44株为重组毒株，共表现出5种重组模式，其中以NADC30提供骨架，HP-PRRSV提供重组片段为主要模式。重组热点分布在非结构蛋白区域5′UTR～1 500 nt(Nsp1)、5 374～8 177 nt...     

鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗生产用菌株的筛选

为了筛选免疫原性良好的鸡传染性鼻炎灭活疫苗生产用菌株，本试验对分离的5株A型、3株B型和3株C型副鸡禽杆菌的致病性和免疫原性进行分析。首先通过毒力试验筛选毒力较强的菌株，对筛选出的菌株进行最小发病剂量测定，再将最小发病剂量定为攻毒剂量，进行免疫原性分析和最小抗原含量测定。毒力试验结果显示，11株分离株均具有较强的毒力，从中筛选出毒力较强的A型菌2株(HN3株和HB2株)、B型菌2株(HN5株和SD4株)和C型菌2株(HN1株和SD3株)。最小发病剂量测定结果显示，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株毒力最强，最小发病剂量分别约为2.0×10⁴、1.8×10³和2.3×10³CFU。免疫原性分析和最小抗原含量测定结果显示，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株具有良好的免疫原性，不仅可以抵抗同源菌株的攻击，还能对同血清型异源菌株提供良好的保护，免疫后血清HI抗体效价和阳性比例均较高，且与攻毒保护相关性较好，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株的最小抗原含量分别为5.0×10⁸、1.0×10<...