猪支原体肺炎研究进展

猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,严重危害养猪业的健康发展.随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易引发其他病毒或细菌等病原的续发或并发感染,导致猪呼吸道疾病综合征,使得疫情变得更为复杂,增加猪病诊断与防控的难度,造成巨大的经济损失.论文根据猪肺炎支原体的最新研究进展,从病原学、流行病学特点、主要抗原蛋白的研究、诊断、疫苗研制、防控措施等六个方面做一综述,从而为猪肺炎支原体的进一步研究及该病的防控提供新思路.     

支原体肺炎对陆川猪呼吸功能的影响及防治对策

猪支原体肺炎 （Mycoplasmal Pneumonia of Swine,MPS）俗称猪喘气病,是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,MHP）引起的一种猪特有的接触性传染病,具有接触传染性高、死亡率低和诱发性强的特点,广泛存在于世界各地。陆川猪原产于广西陆川县,是国家级地方优良品种,具有肉质鲜美、耐粗饲、抗逆性强、母性好、繁殖力强、遗传力稳定等诸多优点。     

1株白鹭源新城疫病毒致病特性及全基因组序列测定分析

2011年从广西防城港市1只患病白鹭中分离到1株新城疫病毒(命名为WBE-10),为了对其主要生物学特性及基因组序列进行研究,对该毒株进行了1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)的测定和全基因组扩增(RT-PCR)。结果显示:该病毒的ICPI值为1.846,表明该毒株属于强毒株,F基因的112～117位氨基酸序列为112R-R-R-K-R-F117,符合NDV强毒株的特征,该结果与ICPI的测定结果一致;F基因绘制的遗传进化树表明该毒株属于基因VIIa型,与Sukorejo/019/10株的亲缘关系最近,该分离株在全基因组序列与印度尼西亚鸡分离株Sukorejo/019/10较接近。本试验为进一步了解候鸟源携带新城疫病毒与家禽新城疫疫病传播、暴发之间的联系提供一定的科学依据。     

应用PCR技术鉴定猪源隐秘杆菌的感染

隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,A.pyogenes),又名化脓放线杆菌,是一种多形态、无运动性的革兰阳性杆菌.Ramos[1]根据16S rRNA基因进行系统进化分析后将其分类到隐秘杆菌属.该菌常导致牛[2]、羊[3]和猪发病[4],表现为肺炎、关节炎[5-6]等.近年来,猪场发病的病因及病原致病机理呈复杂趋势,尤其断奶仔猪肺炎和腿部疾病也越来越明显,不但影响猪的生长性能,而且降低肉猪的商品价值.2011年7月～2012年3月,广西兽医研究所细菌研究室在开展副猪嗜血杆菌病流行病学调查时发现,广西南宁市、贵港市和玉林市分别有3个规模猪场断奶仔猪零星出现以体温升高、关节炎、少量淡黄色稀薄脓汁、心包炎,部分死亡小猪肺部有小坏死灶为主要特征的疾病,临床症状与副猪嗜血杆菌病、链球菌病相似.此外,南宁市和贵港市的两个猪场曾免疫过副猪嗜血杆菌商品苗,但免疫效果不佳.最后,经过PCR鉴定确诊3起病例均由猪源隐秘杆菌引起,报告如下.     

鸡毒支原体强弱毒株荧光定量PCR鉴别检测方法的建立

为建立一种能鉴别鸡毒支原体(MG)强、弱毒株的快速检测方法,本研究根据GenBank中MG强毒株和弱毒株的基因组序列,选取特异性保守区序列设计了2对引物和2奈探针,分别用于强弱毒株和弱毒株的检测,优化反应条件,建立了能区分MG强、弱毒株的荧光定量PCR检测方法.该法特异性强,对鸡常见呼吸道病原体的反应均为阴性;灵敏度高,可检测到100拷贝/μL的模板;稳定性好,批内和批间试验Ct值的变异系数小.本研究建立的MG强、弱毒鉴别检测方法简便、快捷,为该病的防控与净化提供新方法、新思路.     

复合益生菌发酵饲料对“2+4”模式肉鸽生产性能的影响

旨在探讨"2+4"饲养模式下,复合益生菌发酵饲料对肉鸽生产性能的影响。试验选取同一批孵化的360只乳鸽,体重、年龄相近的90对亲鸽,分成复合益生菌发酵饲料组(Ⅰ组)和普通饲料组(Ⅱ组)开展对比试验。结果表明,Ⅰ组7日龄、 14日龄、 21日龄、 28日龄乳鸽平均体重比Ⅱ组分别提高2.6%(P>0.05)、 6.5%(P<0.01)、 5.8%(P<0.05)、 5.8%(P<0.05);Ⅰ组料重比3.49:1低于Ⅱ组3.67:1 (P<0.05);Ⅰ组乳鸽硬嗉病患病率1.67%,低于Ⅱ组患病率5.56%(P<0.05);哺育期21d,Ⅰ组雌性亲鸽平均体重减轻指数2.35%,低于Ⅱ组的5.51%(P<0.05);哺育期Ⅰ组雌性亲鸽产蛋时间较Ⅱ组平均提前1.6d (P<0.05)。综上所述,复合益生菌发酵饲料能提高乳鸽和亲鸽的生产性能,降低乳鸽硬嗉病患病率,缩短养殖周期,提高肉鸽生产效益。     

中药对猪场常见病原菌的药敏特性及联合抑菌活性评价

以常见的50味中药提取液对大肠杆菌、巴氏杆菌、链球菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和放线杆菌等6种猪场常见病原菌进行药敏试验,并在测定单味中药对上述病原菌最小抑菌浓度(MIC)的基础上,采用微量棋盘稀释法进行中药两两联用抑菌活性试验,通过计算抑菌浓度指数(FICI)判断药物互作效应。药敏试验结果表明,乌梅、大黄、黄芩、金银花、连翘、野菊花和五倍子对6种猪场常见病原菌均表现为高度敏感。药物MIC测定结果显示,以乌梅、大黄、桂枝、金银花、连翘、野菊花和五倍子等7味中药对6种猪场常见病原菌的MIC较低,故选取这7味中药进行两两联合用药试验。在中药两两联用抑菌活性试验中,乌梅+桂枝、大黄+桂枝、桂枝+连翘、桂枝+野菊花、桂枝+五倍子呈拮抗效应;乌梅+五倍子、大黄+连翘、大黄+野菊花、大黄+五倍子、金银花+连翘、金银花+野菊花、连翘+野菊花呈协同效应;乌梅+大黄、乌梅+金银花、乌梅+连翘、乌梅+野菊花、大黄+金银花、桂枝+金银花、金银花+五倍子、连翘+五倍子、野菊花+五倍子呈相加效应。     

三种对虾病毒多重实时荧光PCR检测方法的建立

根据基因库中白斑综合征病毒（WSSV）、传染性皮下及造血器官坏死病毒（IHHNV）和桃拉综合征病毒（TSV）的基因序列,设计了WSSV 、IHHNV和TSV的三对特异性引物和三条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了能够同时检测WSSV 、IHHNV和TSV的三重实时荧光PCR方法。该方法特异性好,对WSSV 、IHHNV和TSV的检测敏感性分别达到20000、20和20000个模板拷贝数;此外抗干扰能力强,对WSSV 、IHHNV和TSV不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测这三个病毒。对保存的45份经常规PCR检测仅为WSSV 、IHHNV和TSV阳性的样品进行二重实时荧光PCR检测,结果都为阳性,其中2份为WSSV和IHHNV混合感染。本研究建立的三重实时荧光PCR方法用于WSSV、IHHNV和TSV的检测具有特异、敏感、快速、定量等优点。     

竹鼠源致病性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定

为确定南宁隆安县某竹鼠养殖场发生竹鼠死亡的原因,从发病的竹鼠肝、肺及肾脏中分离得到2株可疑细菌,经形态观察及16S rRNA序列分析,鉴定两株细菌均为雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)。经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。测序结果显示,该菌16S rRNA与雷氏普罗威登斯菌(AB680422)同源性高达99.9%。药敏试验显示,对头孢吡肟、头孢唑林、头孢氨苄等药物高度敏感;对青霉素、氯霉素、氟苯尼考、复方新诺明等药物有抗性。这些研究结果表明,雷氏普罗威登斯菌是隆安县某竹鼠养殖场竹鼠致死的病原菌。本文在国内外首次报道了雷氏普罗威登斯菌对竹鼠有较强的致病性。     

鸡细小病毒二温式PCR检测方法的建立

根据鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV)的保守基因NS1设计了1对特异性引物,建立并优化了能够快速检测ChPV的二温式PCR方法。结果表明:该二温式PCR只对ChPV敏感,扩增产物为302 bp的特异性条带,其最低能检测到38.6 fg的ChPV DNA;而对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒不敏感。对60份临床样品进行检测,检出率为20%(12/60)。说明所建立的ChPV二温式PCR方法是一种快速简便、特异性强、敏感性高的检测方法,适用于ChPV的临床检测。