微卫星标记与鹿苑鸡体重的相关性初探

利用29对微卫星标记对鹿苑鸡基因组进行扫描,共发现124个等位基因,各座位等位基因数2～10个。通过统计软件SPSS,对29对微卫星标记与鹿苑鸡12周龄体重相关性进行了分析。结果表明：位于8号和3号染色体上的3对微卫星标记ADL278、LEI166、MCW222与鹿苑鸡12周龄体重呈显著相关。位于8号染色体ADL278座位上,基因型为CC个体的12周龄体重显著高于其他基因型个体。位于3号染色体的LEI166座位上发现3个等位基因,但仅检测到5种基因型,基因型AA缺失;在检测到的5种基因型中,基因型为AB个体的12周龄体重显著高于基因型为BB、BC、CC个体;AC个体的12周龄体重与其他基因型个体无显著差异。MCW222座位亦位于3号染色体,在该座位上,基因型为BC个体的12周龄体重显著高于基因型为AA、AB、AC、CC个体;基因型为BB个体与其他基因型个体12周龄体重差异不显著。     

我国11个地方鸡品种体尺、生态特征多元统计分析

利用主成分和聚类分析对我国11个地方鸡品种（白耳鸡、藏鸡、大骨鸡、河南斗鸡、固始鸡、狼山鸡、鹿苑鸡、丝羽乌骨鸡、仙居鸡、萧山鸡、北京油鸡）的体尺、体重和生态特征资料进行多元统计分析。结跟表明：主成分分析选取前3个特征值作为3个主成分（占总信息量的88．659％）,并根据各品种的前3个主成分值计算相似系数,进行聚类分析,11个地方鸡品种可划分为高海拔型和低海拔型两类,这说明生态因子亦是品种分类中一个重要因素。     

角蛋白家族基因及其与动物毛发性状关系的研究进展

角蛋白基因家族由众多结构和功能相似的基因组成,分为角蛋白中间丝蛋白(KIF)和角蛋白关联蛋白(KAP)2个基因家族。角蛋白是动物毛发的结构蛋白,决定毛发纤维的基本特征,是在寻找控制毛皮性状主效基因时的首选候选基因。角蛋白基因的表达与遗传多样性有关,角蛋白的多态性与毛皮动物的毛发性状具有相关性。本文从角蛋白基因的结构与定位、多态性与毛发性状、表达差异与毛发性状、基因表达调控等方面对毛皮动物角蛋白基因的研究进展进行综述,为进一步研究角蛋白在动物生产中与经济性状的关系提供理论基础。     

中国部分地方鸡种血浆、肌肉磷脂含量比较研究

对我国肖山鸡、白耳鸡、狼山鸡、乌骨鸡、油鸡、白耳鸡(♂)×肖山鸡(♀)、肖山鸡(♂)×白耳鸡(♀)7个地方鸡种进行了血浆、肌肉磷脂含量的比较研究.结果表明:①血浆中磷脂含量由高到低依次为乌骨鸡、狼山鸡、白耳鸡、白耳鸡(♂)×肖山鸡(♀)、肖山鸡、肖山鸡(♂)×白耳鸡(♀)、油鸡,其中乌骨鸡显着高于其它鸡种(P<0.05),狼山鸡、白耳鸡显着高于肖山鸡、肖山鸡(♂)×白耳鸡(♀)、油鸡,白耳鸡(♂)×肖山鸡(♀)显着高于油鸡(P<0.05);②肌肉中磷脂含量由高到低依次为肖山鸡、乌骨鸡、狼山鸡、肖山鸡(♂)×白耳鸡(♀)、白耳鸡、白耳鸡(♂)×肖山鸡(♀)、油鸡,但鸡种间不存在显着性差异(P>0.05);③血浆、肌肉磷脂含量有公鸡高于母鸡的趋势,但差异不显着(P>0.05).血浆、肌肉磷脂含量及12周龄体重相关分析显示,血浆磷脂含量与肌肉磷脂含量呈极显着正相关(P<0.01),血浆磷脂含量与12周龄体重呈显着负相关(P<0.01),而肌肉磷脂含量与12周龄体重相关不显着(P>0.05).     

热应激下公兔睾丸组织形态和精液转录组分析

旨在深入了解公兔在热应激环境中睾丸组织形态改变及相应基因谱，对揭示热应激下公兔精液质量下降的机理具有重要意义。本研究选取了6只具有相同饲养水平，体况和体重相近的8月龄新西兰种公兔，通过建立热应激模型得到热应激组(8月份，HS)和未热应激组(5月份，NHS)各3只，分别采集2组公兔的睾丸和精液。通过HE染色，比较不同条件下睾丸组织结构的差异，并利用Illumina Hiseq高通量测序技术对精子进行转录组测序分析，通过生物信息学方法对2组样本间的差异表达基因进行GO、KEGG富集分析，并通过RT-qPCR方法验证转录组测序数据。公兔睾丸组织切片结果显示，与NHS组相比，HS组的睾丸中央出现明显的空泡化和撕裂，生精上皮较薄，受损情况显著，精子细胞数量下降。进一步以■和P<0.05为阈值，共筛选出与精子热应激响应相关的差异表达基因1 676个，包括ATP5MC1、MDH2、ALDH7A1、GAPDHS、PRPS1等，其中上调基因894个，下调基因782个。GO分析结果显示，差异表达基因富集在应激反应、蛋白质代谢过程、催化活性等相关条目上，KEGG结果显示，差异表达基因富集到MAPK、P...     

肺炎支原体感染猪模型的建立及相关指标分析

旨在建立肺炎支原体感染猪模型。选取姜曲海猪和杜洛克猪的杂交一代为试验动物,随机分成感染组和对照组,人工接种猪肺炎支原体,试验期40 d,期间观察猪群临床症状,称体质量,检测血清抗体和IgG水平,屠宰后检查肺组织病变,并采用qRT-PCR检测免疫相关分子基因的表达。结果显示,试验16 d后感染组出现支原体肺炎临床症状;试验30 d后,感染组的体质量极显著低于对照组;试验20 d后,感染组血清肺炎支原体抗体阳性,IgG质量浓度极显著高于对照组;试验40 d时屠宰,病理检查发现,感染组表现严重的肺组织病变,脾和肺组织的 IL-1β、 TLR4、 IL-4、 IL-2基因表达显著高于对照组。结果表明,感染组表现出典型支原体肺炎临床表现和病理变化,成功建立肺炎支原体感染猪模型。     

KRT16在长毛兔毛囊发育过程中的表达规律及功能探究

旨在探究KRT16在长毛兔毛囊发育过程中的表达规律及功能。本试验选取12只健康的6月龄皖系长毛兔，于剪毛后在生长期、退行期和休止期选取背部皮肤采样。通过克隆得到兔KRT16基因的编码序列，利用生物信息学软件对KRT16编码序列(CDS)的生物学特性进行初步分析。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析KRT16在毛囊不同时期表达量。在毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cell, DPC)中过表达和敲低KRT16,探究KRT16对毛囊生长发育相关基因的调控作用，以及对DPC增殖的影响。结果显示，KRT16基因的编码序列全长1 431 bp,可编码476个氨基酸，在不同哺乳动物中表现出高度同源性。实时荧光定量PCR结果显示，在毛囊发育周期中，KRT16在毛囊发育周期呈现出不同的表达水平，在生长期高表达。通过在兔毛乳头细胞中过表达与敲减KRT16,检测毛囊发育相关基因的表达水平变化，过表达KRT16后，SFRP2和TGFβ1基因的mRNA表达量极显著下降(P<0.01),BCL2、CCND1、EGF、LEF1和CTNNB...     

新西兰白兔CYP11A1基因的克隆、生物信息学分析及其对繁殖相关基因的影响

【目的】旨在通过分析细胞色素P450家族成员11A1（CYP11A1）的生物信息功能及其在新西兰白兔卵巢颗粒细胞中对繁殖性能相关基因的调控作用，为探究其在卵泡发育过程中调控功能奠定基础。【方法】根据GenBank上兔CYP11A1基因的序列，设计特异性引物，以新西兰白兔卵巢组织cDNA为模板，PCR扩增并克隆CYP11A1基因序列，构建pcDNA3.1-CYP11A1过表达重组载体；用Mega 5.1在线软件构建系统进化树，并通过生物信息学软件对CYP11A1蛋白的氨基酸组成、理化性质、磷酸化位点、保守结构域、二级结构、三级结构、亚细胞定位、蛋白互作进行预测分析。分离新西兰白兔卵巢颗粒细胞，并通过免疫荧光法鉴定颗粒细胞特异性抗体卵泡刺激素受体（FSHR）的表达。设计3条干扰CYP11A1基因表达的引物（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3），筛选出干扰效率最高的1条，并将其与pcDNA3.1-CYP11A1过表达重组载体转染到卵巢颗粒细胞中，用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞中羟基类固醇17-β脱氢酶1（HSD17B1）、骨形态发生蛋白15（BMP15）和促卵泡刺激素受体（FSHR）等繁殖相关基因mRNA表达水平。【结果】成功克隆新西兰白兔CYP11A1基因，其CDS全长序列为1 557 bp，编码518个氨基酸，其中亮氨酸含量（10.6%）最高，精氨酸（7.6%）、缬氨酸（7.4%）和丙氨酸（7.2%）次之。进化树分析显示，CYP11A1蛋白序列与家鼠、人和猩猩的距离最近。生物信息学分析显示，CYP11A1蛋白理论等电点为7.4，正负电荷残基数各占50个，脂肪族氨基酸指数为82.16，不稳定性指数39.54，其中氨基酸序列中亲水性残基数量多于疏水性残基；CYP11A1蛋白具有40个潜在的磷酸化位点，其中以苏氨酸、丝氨酸和酪氨酸最为丰富；CYP11A1蛋白二级结构由α-螺旋（48.31%）、无规则卷曲（40.22%）、延伸链（7.42%）和β-转角（4.04%）组成，三级结构为弯曲螺旋状。亚细胞定位预测结果显示，CYP11A1蛋白主要分布于线粒体（52.2%）、细胞质（17.4%）和细胞核（13.0%）中，还具有1个p450家族的结构域，并与多个繁殖性能相关的蛋白（STAR、CYP21A2、CYP17A1和FDX1）相互作用。分离的兔颗粒细胞表达FSHR，可以用于后续试验；CYP11A1基因在颗粒细胞中过表达后，HSD17B1和FSHR基因表达量极显著上调（P＜0.05），BMP15基因表达量显著上调（P＜0.01）；干扰CYP11A1基因表达后，BMP15和FSHR基因的表达量极显著下调（P＜0.01），HSD17B1基因表达量显著下调（P＜0.05）。【结论】CYP11A1是一个稳定、亲水、相对保守且具有抗氧化和类固醇激素合成功能的蛋白。CYP11A1基因可调控卵巢颗粒细胞中与繁殖性能相关的基因HSD17B1、BMP15、FSHR的表达，说明CYP11A1基因在母兔繁殖过程中发挥一定作用。