陕西关中地区鸡产蛋下降综合征的调查

对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感，疫苗注射对该病的发生     

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法.结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min.对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%.     

采用花粉管通道法遗传转化月季石榴的研究

以月季石榴为试验材料,结合花粉管通道法和农杆菌介导法进行浸染转化,探究了不同浸染介质及不同授粉方式对坐果率、出芽率、阳性率的影响。对授粉后花粉管的萌发进行观察,发现在授粉后24 h进行菌液浸染可能使菌液深入到花粉管,从而提高转化效率。对转化后的1819棵实生苗进行GUS染色和初步筛选,获得了82棵待检测植株;使用PCR扩增技术对转基因阳性植株进行鉴定,得到了14棵转PgLCBF1基因的月季石榴植株。对不同处理组合所获得的月季石榴的坐果率、出芽率、阳性率的研究结果表明:当浸染介质为5%蔗糖、授粉方式为授粉后24 h浸染时,月季石榴的遗传转化效果较好。     

牡蛎中GⅡ型诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的优化与评价

为了解决目前巢式PCR法检测牡蛎样品中GII型诺如病毒时存在的非特异性扩增、假阴性等问题,本研究对NCBI数据库中在线获得的所有GII型诺如病毒序列进行系统分析,重新设计出针对GII型诺如病毒检测的通用型巢式PCR引物(NG2OF/NG2OR),并从基因型覆盖度、特异性、灵敏度和实际样品检测的稳定性几个方面对新设计的引物进行评估。结果显示：(1)新引物的特异性好,只对GII型诺如病毒进行有效扩增,且不受牡蛎样品本底的影响。(2)新引物灵敏度高,最低可检测至26.4个拷贝。(3)在对92个牡蛎样品进行检测时,新引物的阳性检出率为28.3%,比经典引物高出7.5%。因此,新建立的GII型诺如病毒巢式PCR检测方法在检测牡蛎样品时特异性更强,灵敏度更高,为牡蛎中诺如病毒的检测提供了一种新的、可靠的技术手段。     

2020年新疆地区规模化猪场猪PCV2抗体检测与分析

为了解新疆地区2020年规模化猪场猪圆环病毒2型的免疫抗体水平,选择新疆地区6个规模化猪场,针对不同日龄段的猪采集血清样品333份,采用猪圆环病毒2型ELISA抗体检测方法进行抗体检测分析。结果发现,2020年新疆地区规模化猪场猪圆环病毒2型平均抗体阳性率为77.78%（259/333）,平均抗体阳性率符合国家标准。但各猪场免疫效果参差不齐,抗体阳性率最高的为A场,阳性率达100.00%;阳性率最低的为C场,仅48.78%,低于（70%）的国家标准。不同日龄段的猪抗体水平也存在一定的差异,抗体阳性率最高为种公猪,达96.30%;而保育阶段猪抗体水平最低,仅有47.92%,低于国家标准。     

狼山鸡-AA肉鸡嵌合体的制作及其转基因鸡研究

试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体.共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%.获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%.对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾丸发育异常.PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,2只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞.结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因鸡是可行的.试验Ⅱ:利用脂质体介导法,在体外将外源pEGFP质粒转入到鸡X期胚胎细胞中,培养8 h开始有外源基因的表达,体外培养12 h后获得了21.43%的转染效率.将转染后的鸡胚盘细胞移入到受体AA肉鸡的胚下腔,孵化6 d后在8个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为40%(8/20).     

云南省边境地区送检牛血清样品蓝舌病病毒抗体检测与血清型鉴定

为了解云南边境地区的蓝舌病流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对云南省边境地区5个州市12个县（市）的1 580份牛血清样品进行蓝舌病病毒抗体检测,同时从检出的阳性血清中,每县（市）随机选取15~55份,采用微量血清中和试验进行血清型鉴定。结果显示：12个边境县（市）均检出阳性血清样品,但有一定的地区差异,其中芒市最高（94.1%）,沧源县最低（17.0%）;本地牛和境外牛血清样品阳性率差异不大（P＞0.05）,均在70.0%以上;各县（市）均存在5个以上血清型的交叉感染。结果表明,蓝舌病在云南边境地区广泛存在,且呈多种血清型混合流行态势,需要持续开展血清学调查。本研究为我国西南边境地区蓝舌病防控提供了数据参考。     

新疆规模化牧场奶牛病毒性腹泻病毒持续感染状况的流行病学调查

牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（BVDV）引起的牛的一种急性、热性、接触性传染病,可造成牛只的免疫抑制和持续感染,导致牛只繁殖率下降、流产、死胎以及犊牛多种疾病高发和高死亡率,严重影响养殖经济效益和可持续发展。以新疆不同养殖模式、不同年龄奶牛、不同区域（南疆和北疆）为研究对象,采集血清和耳组织,应用双抗夹心ELISA抗原法等方法,对7 个牧场的11 592 头奶牛BVDV的持续感染（PI）牛进行了检测。结果表明,各牧场均存在BVDV的PI阳性牛,场阳性率100.00%;群体阳性率为0.79%（91/11 592）。其中,南疆牧场的感染率高于北疆牧场,成母牛感染率高于犊牛,传统型牧场感染率高于现代化牧场。提示需要高度重视,全面开展PI牛的检测和淘汰阳性牛是控制该病的关键。     

2012～2017年我国部分地区规模化猪场PRV野毒流行病学调查

为了监测我国规模化猪场伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒感染情况,本研究采用伪狂犬g E抗体ELISA检测试剂盒对2012年2月~2017年7月送检的我国11个省份925个规模化猪场的44809份猪血清样品进行PRV野毒抗体检测。结果显示,925个猪场中有508个野毒阳性猪场,占检测猪场总数的54.91%,检出9153份阳性猪血清,平均阳性率为20.42%。其中种猪的野毒感染情况最明显,检出率较高,阳性率为23.19%;育肥猪的阳性检出率最低为17.22%。调查表明,我国规模化猪场猪群中仍存在PRV野毒感染。同时,本调查分析了不同地区、不同日龄猪的PRV野毒感染情况及该病的流行趋势,为我国伪狂犬病的净化提供思路。     

乐都县牛羊布氏杆菌病的血清学调查

2011-2013年利用虎红平板凝集法和试管凝集实验对乐都县雨润乡、碾伯镇、高庙镇和洪水乡四个乡镇的3210份牛、羊血清进行布氏杆菌血清抗体的检测,受检的365份牛血清,检出3份阳性,阳性率为0.82％,8份可疑血清,可疑率为2.19％.受检的2845份羊血清,检出15份阳性,阳性率为0.53％,21份可疑血清,可疑率为0.74％.