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非洲猪瘟病毒(ASFV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)是危害养猪业的3种重要病毒,但目前国内外尚无可同时检测这3种病原的方法。为建立一种可同时检测上述3种病原的方法,本研究以ASFV的B646L基因、PRV的g E基因及PCV2的rep基因为靶基因,采用Prime 3 web软件分别设计特异性引物和探针。采用相应引物分别构建上述3种靶基因的重组质粒,经测序鉴定后分别作为质粒标准品,并均稀释到1×105拷贝/μL后按照体积比1∶1∶1混匀后作为模板,采用方阵法对引物、探针、酶和各反应条件等的优化,初步建立ASFV、PRV和PCV2多重荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法标准曲线Ct值与相应质粒标准品浓度均存在良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.99。利用该方法同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪细小病毒(PPV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病原,结果显示,本实验建立的该方法仅特异性扩增ASFV、PRV和PCV2,与其他病原均无交叉反应,特异性强;分别利用该方法与已公布... 相似文献
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为进一步摸清商丘市玉米收割机质量情况,商丘市农业机械化技术推广鉴定站组成调查队,深入各县(区)农机专业合作社、种粮大户、经销商等农机推广第一线,开展了2021年玉米收割机质量调查活动。一、调查方案确立商丘市位于河南省东部苏、鲁、豫、皖四省结合部的平原地区,全市下辖8个县(区),常驻人口656万人,耕地面积865.5万亩,主要种植小麦、玉米和花生,是典型的农业大市和农机化大市,也是全国粮食核心主产区之一。2021年全市玉米种植面积647.82万亩,"三秋"期间全市共投入玉米联合收割机1.55万余台(含引进外地台数)。 相似文献
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为探究虫草素抗弓形虫的效果及作用机制,本研究将不同浓度的虫草素与弓形虫RH株共同作用48 h后,采用CCK8法筛选对细胞安全的虫草素浓度。结果显示,以1μg/mL~200μg/mL (以对细胞的抑制率均为0判定)的虫草素为细胞的安全浓度。将巨噬细胞接种弓形虫RH-GFP株,同时分别加入1μg/mL~100μg/m L虫草素,根据弓形虫的荧光强度,计算虫草素对弓形虫的半数抑制浓度(IC50)。结果显示,虫草素对弓形虫的IC50为31.24μg/mL,且其对弓形虫的抑制作用与虫草素的浓度呈正相关。将巨噬细胞接种弓形虫RH株,同时加入100μg/mL虫草素,2 h后采用间接免疫荧光试验(IFA)检测并统计黏附与侵入细胞的弓形虫数量,分析虫草素对弓形虫黏附与侵入细胞的影响;24 h后采用吉姆萨染色后统计细胞感染率;收集上述各组细胞样品,一部分细胞采用q PCR检测细胞中弓形虫B1基因的转录水平,分析虫草素对弓形虫增殖的影响;一部分细胞采用IFA检测并统计每孔细胞100个空泡(PV)中的弓形虫速殖子的数量,分析虫草素对弓形虫复制水平的影响。结果显示,与... 相似文献
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粮食烘干作为农业生产全程机械化中的一环,在确保国家粮食安全、保障农民增收方面具有重要战略意义。文章对粮食烘干机进行需求分析,指出现阶段烘干机发展中的制约因素,并提出发展建议。 相似文献
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为了缓解农村老龄化问题带来的养老服务问题,以长三角地区为例,利用数据调查法分析了长三角地区农村养老服务的发展状况。分析认为长三角地区农村养老服务的发展缓慢,农村老人存在经济、生活、精神等方面的养老需求,相关部门应强化长三角地区养老服务的人员队伍与基础设施,构建多元化的农村养老服务模式,促进乡村振兴的全面建设。 相似文献