重组犬瘟热病毒抗原表位T^ITB和犬细小病毒vp2基因的真核表达

将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T^ITB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上，命名为pFastBacHTc—T^ITB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因，将其克隆至pMD18-T载体，测序后将vp2基因插入T^ITB基因下游，命名为pFastBacHTc-T^ITB-VP2，进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中，获得携带犬瘟热病毒T^ITB细胞表位和犬细小病毒vp2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T^ITB-VP2，转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T^ITB-VP2蛋白，大小约为70ku。经Western blot分析，表达的蛋白可与犬细小病毒阳性血清反应，具有良好的免疫原性。     

阿留申病细小病毒的分离及VP2基因遗传衍生分析

水貂阿留申病（Aleutian disease of mink，AD）是水貂的一种慢性传染病，病原为阿留申病细小病毒（Aleutian mink disease parvovirus，AMDV），属细小病毒科、细小病毒属。AD自1940年发现以来至今60年里，已经普遍存在于世界各地人工养殖的水貂种群中。对水貂养殖业造成了不可估量的经济损失。     

幼犬犬瘟热人工感染试验

应用不同接种途径,进行幼犬的犬瘟热人工感染,进行临床症状、病理变化、电镜负染观察。结果表明,各种接种途径均可使幼犬发病,但不能100％发病乃致死亡。其临床症状及经过差异较大,其中以急性型为主要经过。     

定量测定羊关联性恶性卡他热病毒DNA的竞争性PCR方法的建立

此项研究中建立了用于定量测定羊关联性恶性卡他热 (Sheep- associated malignant catarrhal fever,SA- MCF)病毒 DNA的竞争性聚合酶链反应 (Comppetitive polymerase chain reaction,c PCR)方法。该分析中采用同一引物 ,分别将一固定但未知含量的待测目的 DNA(target DNA)与一系列已知含有不同拷贝数量的竞争性 DNA(com petitive DNA)同时扩增。经4 0次扩增后 ,在 30～ 30 0 0 0 0 DNA拷贝范围内 ,目的 DNA与竞争性 DNA之间其扩增产物具有明显的线性竞争关系 (r=0 .98)     

圈养东北虎FPV感染情况的初步调查与研究

猫泛白细胞减少症是由猫泛白细胞减少症病毒引起的高度接触性传染病,近些年来该病严重影响着我国圈养大型野生猫科动物的健康.至今,国内外对大型野生猫科动物的FPV流行状况研究甚少.鉴于此,本研究分别于2006年11月、2007年2月和2007年7月随机收集62份、36份、45份虎粪便,利用PCR方法对其带病情况进行检测.结果表明,FPV的阳性率分别为54.8%,25%和0.在以上实验研究的基础上,对该圈养大型野生猫科动物群体中FPV的感染带毒情况和流行特点进行了探讨.     

黑熊原发性肝细胞癌并发转移观察报告

肝细胞癌在人类及多种动物中屡有发生,而在黑熊尚未见报道。现将我室外检中遇到的一例报告如下。该例黑熊为某熊类养殖场自繁的1岁熊,1989年12月生,雄性,于1990年2月19日发现患病,2月21日晨死亡。     

马MHC-I基因研究进展及其多态性分析方法探讨

主要组织相容性复合体I (Major histocompatibility complex I,MHC-I)分子与细胞内源性抗原在内质网中结合形成MHC-I/抗原复合物并呈现于细胞膜上,被CD8+T细胞TCR识别,诱导细胞免疫.MHC-I分子也可作为NK细胞的抑制性受体的配体,抑制NK细胞介导的溶细胞作用,在天然免疫中发挥作用[1].基于MHC-I分子的上述重要作用,开展马MHC-I基因的相关研究将有助于对马属动物免疫机制的了解,有效促进马属动物的疫病研究和抗病育种等方面研究的开展.     

一株野鸭源基因Ⅲ型新城疫病毒主要生物学特性及基因组序列测定分析

为研究分离自黑龙江三江自然保护区的野生绿头鸭粪拭子中的一株新城疫病毒(命名为Mallard/CH/HLJ383/06)主要生物学特性及基因组序列,本实验对病毒F基因序列进行测定,结果表明该病毒分离株属于NDV基因Ⅲ型,病毒的1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)为1.81,高于NDV中等毒力病毒株ICPI值,预示该病毒分离株毒力有增强趋势.15日龄SPF鸡致病性试验表明,该病毒分离株可导致雏鸡发病但不死亡,致病性仍低于与其ICPI值相近的基因Ⅶ型毒株.对该病毒分离株进行全基因组序列分析表明:该病毒分离株与Ⅰ系疫苗病毒Mukteswar、江苏2株基因Ⅲ型分离株(JS/7/05/Ch,JS/9/05/Go)结构蛋白氨基酸同源性高达99.0%～99.7%;与疫苗株Mukteswar相比,3株基因Ⅲ型病毒分离株在F蛋白中只有1个共同的氨基酸位点变异(A203T);HN蛋白中存在15个变异氨基酸,但位置各不相同;L蛋白中变异位点最多,为28个,其中有4个变异位点为3个分离株所共有.以上结果初步表明,Mallard/CH/HLJ383/06株可能是由疫苗株Mukteswar在野禽、家禽生态系统中传播进化而来,并由于宿主或免疫压力而发生毒力变异;分离株L蛋白氨基酸位点的变异,可能是导致病毒株毒力返强主要因素之一.     

鸭肠炎病毒研究进展

鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV),又名鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV),是能够引起鸭、鹅和天鹅等水禽的一种急性、接触性的传染病.其特征是侵害血管、组织出血、消化道黏膜糜烂、淋巴器官出现病变及实质器官有退行性的病变.鸭肠炎病毒自出现到现在已有80多年的历史,本文简要阐述鸭肠炎病毒的研究进展.     

SYBR Green荧光RT-PCR法快速检测毛皮动物源犬瘟热病毒

根据犬瘟热病毒(CDV)H蛋白基因的保守序列设计了1对引物,经过各反应体系和反应条件的摸索和优化,建立了CDV的SYBR GreenⅠRT-PCR荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,建立的方法特异性较好,几种非CDV病原体检测均为阴性;敏感性实验表明其敏感性可达1个TCID50,高于普通RT-PCR和胶体金检测试剂盒;重复性试验表明所建立的检测方法非常稳定;临床检测中,在39份样品中检测到28份阳性样品,高于普通RT-PCR方法的检出率。该方法检测成本低、特异性强、敏感性高、重复性好,可推广应用于毛皮动物CDV的大规模高通量的检测。