猪流行性腹泻病毒CH/GX/2015/750A株的分离鉴定及全基因组序列分析

本研究旨在获得可在细胞培养中稳定、有效生长增殖的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）分离毒株,并对其全基因组序列进行测定分析。应用Vero细胞从广西腹泻仔猪肠道内容物中进行病毒分离,通过细胞病变和RT-PCR对细胞培养物进行鉴定,应用下一代测序技术对分离毒株全基因组序列进行测定。结果显示,成功分离到1株PEDV,命名为CH/GX/2015/750A。该毒株可稳定有效地在Vero细胞生长增殖,并引起典型的细胞病变;已在Vero细胞连续传代25代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在10^7.50TCID₅₀/mL。该毒株全基因组序列长28 038 bp;与22个参考毒株的全基因序列比对显示,核苷酸同源性为96.8%~99.8%,其中与YC2014株同源性最高,为99.8%。全基因组和S基因系统进化分析显示,PEDV CH/GX/2015/750A分离毒株属于Ⅱa亚群,与YC2014、PEDV-WS等变异毒株亲缘关系密切。结果表明,本研究分离获得的CH/GX/2015/750A毒株是PEDV地方流行变异毒株。     

苦玄参提取物对仔猪血清生化指标及免疫指标的影响

试验旨在探讨苦玄参提取物对仔猪血液生化指标、抗氧化功能和部分免疫指标的影响,为苦玄参提取物在仔猪生产中的合理利用提供理论依据。选取28~35日龄、体重相近的杜×长×大三元杂交断奶仔猪250头,随机分为5组(A、B、C、D、E组),每组5个重复,每个重复10头。其中A、B、C组依次为苦玄参提取物高、中、低剂量组,分别在基础日粮中添加3.5、1.75和0.875g/kg苦玄参提取物;D组为药物对照组,在基础日粮中添加4.0g/kg七补散;E组为空白对照组,饲喂基础日粮。预饲期7d,正试期30d。分别在用药14d后和停药14d后时,从每组中随机选取接近平均体重的10头仔猪于晨饲前进行前腔静脉采血,测定血清生化指标、抗氧化指标和免疫指标。结果显示:(1)各组仔猪血液生化指标差异均不显著(P0.05),说明苦玄参提取物对仔猪体内糖代谢、脂代谢及消化系统无显著影响;(2)从抗氧化指标看,添加苦玄参提取物14d后,B组一氧化氮(NO)含量极显著高于其他组(P0.01),A组总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于其他组(P0.01),B、D组显著或极显著高于C、E组(P0.05;P0.01);而停药14d后,E组谷胱甘肽(GSH)含量显著高于B、C、D组,各组其余指标差异均不显著(P0.05);(3)从免疫指标看,添加苦玄参提取物14d后,B组免疫球蛋白G (IgG)含量极显著高于其他组(P0.01),A组白细胞介素6(IL-6)含量显著高于B、D、E组(P0.05);而停药14d后,各组免疫指标差异不显著(P0.05);综上所述,日粮中添加0.875~3.5g/kg苦玄参提取物对仔猪无不良影响,且可在一定程度上增强机体的抗氧化功能和机体免疫水平。     

螺旋藻的急性和亚慢性毒性试验

[目的]旨在评价螺旋藻的毒性,从而为临床安全用药提供理论依据。[方法]以昆明小鼠为研究对象,进行急性和亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中,采用不同浓度的螺旋藻水溶液进行小鼠灌胃来测定螺旋藻的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,小鼠以（10．0、5．0、2．5g／kg）不同剂量连续饲喂28d,在给药第28天观察小鼠的临床体征、体重、饲料利用率、白细胞总数、血液生化指标和病理组织学变化。[结果]急性毒性试验各剂量组小鼠均无死亡,无法测出LD50最大耐受量为10g／kg。亚慢性毒性试验中用药组小鼠的临床体征、体重、饲料利用率、白细胞计数、血液生化指标与空白对照组小鼠相比,无显著差异（P〉0．05）。组织病理学观察,实质器官无异常病变。[结论]螺旋藻实际无毒,安全性好。     

苦玄参提取物中苦玄参苷ⅠA质量控制方法的建立

[目的]建立苦玄参提取物中苦玄参苷ⅠA的鉴别和含量测定方法。[方法]采用薄层色谱法对苦玄参苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定提取物中苦玄参苷ⅠA的含量,色谱条件为：Waters Symmetry C18（4.6×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈—水（35∶65）,流速1.0 m L/min,检测波长264nm,柱温35℃,进样量20μL。[结果 ]苦玄参苷ⅠA的薄层色谱鉴别方法专属性强;苦玄参苷ⅠA在20.06～104.10μg/m L的质量浓度范围内线性关系良好（R2=0.9992）,平均加样回收率为99.90%,RSD=0.53%。[结论]建立的方法专属性强,定量准确性高,适用于苦玄参提取物的质量控制。     

螺旋藻抗炎和免疫增强作用的研究

试验旨在探讨螺旋藻抗炎作用及其对机体免疫功能的影响。试验通过二甲苯致小鼠耳肿胀,构建小鼠体内炎症模型,以地塞米松为阳性对照药物,以小鼠耳肿胀为观察指标,探讨螺旋藻的体内抗炎作用;通过环磷酰胺构建小鼠免疫抑制模型,以不同剂量螺旋藻处理后测定免疫抑制小鼠及正常小鼠的脏器指数、血清白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）水平,同时结合脾脏及胸腺病理组织学观察,探讨螺旋藻对免疫抑制小鼠及正常小鼠免疫功能的影响。结果表明,在螺旋藻对小鼠体内抗炎作用影响的试验中,0.3%螺旋藻灌胃对小鼠耳肿胀的抑制率极显著高于地塞米松对照组和其他螺旋藻处理组（P<0.01）,且螺旋藻对各试验组小鼠的脏器指数无不良影响,差异不显著（P>0.05）;在螺旋藻对小鼠免疫功能影响试验中,与空白对照组相比,环磷酰胺阳性对照组脾脏指数和胸腺指数极显著下降（P<0.01）;肝脏指数极显著上升（P<0.01）,其它各剂量螺旋藻处理组小鼠胸腺指数跟空白对照组相比差异不显著（P>0.05）,各组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平差异不显著（P>0.05）;通过病理组织学观察发现,环磷酰胺阳性对照组小鼠的脾小体萎缩、胸腺小体减少、淋巴细胞及网状细胞变性坏死,而各剂量螺旋藻处理组的脾小体和胸腺小体结构清晰完整、淋巴细胞增多。综上,螺旋藻能降低地塞米松和环磷酰胺对小鼠的免疫抑制,并且能修复小鼠脾脏和胸腺损伤,说明其在抗炎和缓解免疫抑制方面具有一定的作用。     

克氏螯虾的疾病防治

预防方法 在生产中要达到预防效果,必须做到如下5点:①购买虾苗时,宜选择虾体强壮、受伤较轻的虾苗.在投放前可用1‰～2‰的食盐水浸洗虾体10分钟～15分钟.并要彻底清塘消毒,每667平方米可用生石灰15公斤～20公斤全池泼洒.     

不同提取方法对马尾藻多糖含量的影响

[目的]比较不同提取方法对马尾藻多糖提取效果的影响。[方法]分别采用水提醇沉、梯度醇提和101果汁澄清剂提取马尾藻多糖,经纯化后用苯酚-硫酸法测定提取液中有效成分多糖含量。[结果]101果汁澄清剂法提取的马尾藻多糖含量和纯度均优于其他2种方法,精制马尾藻多糖的含量为6.55%,红外光谱确认为较纯的多糖结构。[结论]101果汁澄清剂法提取马尾藻多糖的方法为最优,稳定且可行性高。     

使用能量利用效率评估豆粕对于玉米的相对能值及其对保育仔猪生长性能的影响

试验旨在评估豆粕相对于玉米的能值,并测定提高日粮中豆粕水平对保育仔猪的影响。总计2233头猪(品种PIC337×1050),初始平均体重10.98 kg,分配到92个饲养栏中,每个饲养栏20~27头仔猪,性别混合。断奶后,所有仔猪饲喂21 d相同日粮,按完全随机试验设计,根据体重将仔猪分为不同处理组。处理组日粮分别含21%、27%、33%、39%豆粕,并通过改变饲料氨基酸水平和玉米水平来配制平衡日粮,试验期饲喂21 d。仔猪称重并测定采食量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和热量效率(CE)。采用SAS的GLIMMIX程序,以随机效应和处理组作为固定因子分析数据。建立单自由度对比来检测随豆粕水平增加的线性和二次效应。对ADG有二次效应趋势(P=0.090),当豆粕水平为33%时有显著提高。随着日粮豆粕水平提高对于ADFI有降低趋势(线性,P=0.092)。随着日粮豆粕水平提高,仔猪的料重比呈提高趋势(二次,P=0.066),33%豆粕处理组仔猪的料重比最高,但39%豆粕处理组又回到对照组水平。随着豆粕水平提高,CE呈增加趋势(线性,P=0.001;二次,P=0.065)。以CE方式测定4个数据点评估豆粕能值为玉米能值的105.4%,11.78 MJ/kg净能。当去除39%豆粕处理组的CE值时(含39%豆粕水平时呈二次趋势),仅使用CE应答的线性趋势部分来计算豆粕能值为玉米能值的121.1%,净能为13.54 MJ/kg。综上,试验结果表明饲喂豆粕水平达33%时可提高ADG、F/G和CE,豆粕能值为玉米能值的105.4%~121.1%,这要比当前推荐的豆粕能值为玉米能值78%数据要高很多。该结果意义重大,因为它增加了日粮配方中豆粕的能值。     

要注意给羊修蹄甲

正每年要给羊进行一次修蹄工作。过长的蹄甲不仅对羊无用,反而使羊行走困难,影响羊只的采食,对其生长发育和健康极为不利。如果长期不修,还会引起腐蹄病、四肢变形等疾病。特别是种公羊,可直接影响配种工作的正常进行,有的甚至失去配种能力。修蹄最好在多雨潮湿的季节进行,因雨水多,草地和牧场潮湿,其蹄甲也变得较柔软,有     

福州乌龙江浦上岛生态问题及修复策略建议

随着城市的发展,乌龙江的生态环境问题受到越来越多的关注,而江中的浦上岛作为乌龙江生态系统的一部分,生态环境问题更是不容小觑,浦上岛现存在着生态系统破坏,水体污染,水陆过渡带消亡等问题,本文以生态修复视角出发,运用调查分析法,从岸坡修复,水体净化和植物多样性三个方向展开,采用垃圾清理,改善水质、修建河岸缓冲植物带、丰富浦上岛生物多样性等方法,从而激活浦上岛生态系统活力,希望能为恢复城市河流内众多洲屿的生物多样性提供参考和借鉴。