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为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,在含有5 g/L微载体的DMEM培养基中接种Vero细胞(30~40 cells/球),设定p H、温度、溶氧值和转速分别为7.2、37℃、50%和55 r/min,培养方式为批次培养(0~48 h)+灌流培养(48~96 h)组合方式,培养Vero细胞3~4 d或细胞密度达到200 cells/球以上时,按照MOI=0.0001~0.001吸附接毒,调低温度(33℃)继续培养100~120 h,即可获得高滴度病毒液(10~(6.5)~10~(7.2)TCID_(50)/0.1 m L),经无菌检验合格后,配制水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养),疫苗符合《中国兽药典》三部(2015版)的规定。试验建立了7 L生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗的新工艺,为进一步规模化生产奠定了基础。 相似文献
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牛传染性鼻气管炎活疫苗安全性和免疫保护效果研究 总被引:1,自引:1,他引:0
本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6~8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2 mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6~8月龄牛,接种剂量为1 mL(1头份),疫苗接种后28 d使用检验用强毒进行攻毒,检验疫苗对攻击用强毒的保护效力。结果表明,不同月龄牛接种疫苗后体温正常,无任何临床可见异常,后备母牛接种疫苗后精神状态及食欲均良好,无流产、死胎及木乃伊胎出现。疫苗接种牛对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达5/5。 研究结果表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。 相似文献
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以国内外具有代表性的86份烤烟中部叶为试验材料,研究了襄阳平原烤烟挥发碱、多酚、有机酸含量与其他烟区烟叶的差异.结果表明:(1)襄阳烟叶挥发碱含量为(0.29±0.07)%,不同烟叶产区挥发碱含量表现为巴西津巴布韦襄阳豫中云南;(2)襄阳烟叶多酚总量为(23.91±2.27)mg/g,不同烟区烟叶多酚总量表现为豫中襄阳云南巴西津巴布韦;(3)襄阳烟叶有机酸总量为(125.92±13.65)mg/g,不同烟区烟叶有机酸总量表现为襄阳豫中云南巴西津巴布韦;(4)襄阳平原烤烟具有挥发碱较低、多酚含量较高、多元有机酸总量高、高级脂肪酸总量较低,非挥发有机酸总量高的特点,其较好的调和作用可用于卷烟配方中,且聚类分析表明襄阳平原烤烟化学成分与豫中最为相似,初步认为襄阳平原烤烟具有浓香型烟叶品质特征. 相似文献
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为了筛选到有效干扰牛叉头框M1(forkhead box M1,FOXM1)基因特异性siRNA,试验设计并合成3个靶向干扰牛FOXM1的5-羧基荧光素(FAM)标记siRNA,对siRNA转染剂量进行优化,筛选出干扰效果较好的siRNA,并检测干扰FOXM1后MDBK细胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达水平。结果表明:siRNA的最佳转染剂量为1.5μL(20μmol/L),3个特异性siRNA的干扰效率分别为34.2%、52.0%及72.5%,干扰牛FOXM1基因效果最好的siRNA是siRNA-929,它能够阻止细胞中LC3-Ⅰ型向LC3-Ⅱ型的转化,使自噬过程受到抑制。说明试验成功筛选到干扰牛FOXM1基因的特异性siRNA。 相似文献