牛副流感3型病毒Nano-PCR、LAMP方法的建立及初步应用

试验旨在建立牛副流感3型病毒（bovine parainfluenza type-3 virus,BPIV3）纳米PCR（Nano-PCR）与环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）新型快速分子检测技术,对其进行特异性和敏感性对比试验,并对10份临床样品进行了检测。特异性与敏感性试验结果显示,建立的Nano-PCR和LAMP方法只对BPIV3特异,而对牛呼吸道合胞体病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒无交叉反应;建立的Nano-PCR和LAMP方法具有相同的敏感性,均是普通PCR的10倍,最低核酸检出量均为4.16×10²拷贝/μL。临床检测结果显示,建立的两种方法阳性符合率为100%,且阳性检出率均高于普通PCR。因此,本试验建立的Nano-PCR和LAMP方法为BPIV3的临床诊断提供了更快速、敏感、可靠的工具。     

低分子量有机酸对植烟土壤酶活性和细菌群落结构的影响

【目的】土壤生物学性质是可反映土壤质量的重要指标,论文旨在阐明根系分泌物中的低分子量有机酸对土壤生物学性质的影响,为改善土壤质量提供科学依据。【方法】利用化学试剂模拟烟草根系分泌物中的6种低分子量有机酸进行室内培养试验。根据烟苗生长前期根系分泌有机酸的数量及前人研究结果,检测1、2和3 g·kg^-1（碳土比）3种浓度处理的6种有机酸（苯甲酸、肉桂酸、月桂酸、邻苯二甲酸、肉豆蔻酸和棕榈酸）25℃黑暗环境下培养植烟土壤30 d后对4种土壤酶活性（过氧化氢酶、碱性磷酸酶、脲酶和蔗糖酶）的影响并应用高通量测序方法检测6种低分子量有机酸的2 g·kg^-1浓度处理细菌群落结构之间的差异。细菌群落结构差异性分析采用系统进化树、主成分分析、相对丰度直观展示图和物种丰度聚类热图等方法。【结果】肉桂酸3种浓度处理的蔗糖酶活性均小于对照,对土壤蔗糖酶活性的抑制作用最强;肉桂酸、邻苯二甲酸和苯甲酸对土壤脲酶活性的抑制作用较强,其3种浓度处理下的土壤脲酶活性均小于对照;肉桂酸和苯甲酸对土壤过氧化氢酶的活性抑制作用较强,其中苯甲酸3 g·kg^-1浓度处理土壤过氧化氢酶活性在所有处理中最低;邻苯二甲酸、肉桂酸和苯甲酸对土壤碱性磷酸酶的活性抑制作用较强,3种浓度处理下的土壤碱性磷酸酶活性均低于对照,其中苯甲酸3 g·kg^-1处理最低。相对丰度直观展示图结果表明2 g·kg^-1浓度处理的月桂酸与其他6种处理存在较大差异,蓝藻门、Chloroplast、Streptophyta和Streptophyta-unclassified的含量分别在门、纲、目和科水平上明显大于其他6种处理,与系统进化树和主成分分析图显示的结论一致,其他处理的细菌群落结构在属以上水平差异不明显,在属水平上7个处理间有较大差异。【结论】低分子量有机酸的浓度对于土壤酶活性具有重要影响,土壤细菌或许不是影响土壤酶活性的主要原因。     

南漳县不同烤烟新品种适宜施肥量研究

在南漳烟区,以中烟102和中烟103为试材,研究了不同施氮量对烤烟生育期、农艺性状和经济性状的影响。结果表明:中烟103表现较好,农艺性状和经济性状均优于中烟102,适宜在南漳烟区种植,施氮量以75 kg/hm2为宜。     

豇豆早春双膜覆盖春提早栽培技术

<正>早春双膜覆盖栽培豇豆,初夏上市,市场空间大,加之双膜覆盖可促进根系生长,投资少,节省人力,能防止旱涝灾害,并提早开花结荚,较露地栽培增产40%~50%,经济效益可观。1品种选择宜选择早熟、耐低温、高产、抗病的品种,如之豇28-2、株豇2号等。2整地做畦结合深翻整地,每亩施入腐熟农家肥1 500~2 000 kg、草木灰50~100 kg。整平耙细,然后做小高畦。畦南北向延长,畦高10~15 cm,畦宽60 cm,畦沟宽30 cm,做好后立即在畦上覆地膜。宜在定植前15天左右铺好,以利增温保墒。     

秋延后大拱棚黄瓜高产栽培技术

1 品种选择 宜选用适应生育前期高温、长日照及后期低温、短日照的品种,如津杂31号、津春3号、津绿3号、津优3号等.     

走出奶牛养殖误区

目前我国许多奶牛养殖户(场)在苜蓿草和饲料添加剂的利用、如何正确认识育种的作用、如何正确解决奶牛粪污处理问题、奶牛业发展模式及对节粮型畜牧业的认识等方面都存在着误区。本文对这些误区均加以澄清。     

牛病毒性腹泻病毒Real-timePCR方法的建立及其应用

本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9%,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍。该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2%。本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断。同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴。     

狂犬病病毒Vero ERA株G蛋白333位点精氨酸突变株的构建

狂犬病病毒糖蛋白（G）在病毒的致病性中起着主要作用,其第333位点精氨酸（Arg）是决定病毒神经细胞侵嗜性的重要分子基础之一。为研制更加安全有效的狂犬病减毒活疫苗,本试验采用负链RNA病毒反向遗传学方法,在体外将狂犬病病毒Vero细胞适应株ERA糖蛋白G333位点精氨酸突变为谷氨酸,构建减毒株ERAGΔ,减弱了其潜在的毒力返强的危险。救获的ERAGΔ突变株在Vero细胞上表现出与ERA株亲本病毒相似的生长动力学特性。本研究成功构建并拯救出了狂犬病病毒ERA减毒疫苗株,为研制开发狂犬病病毒无毒疫苗提供了候选株。     

烟草漂浮育苗替代基质研究

为了筛选出烟草漂浮育苗替代基质配方,采用花生壳、河沙、腐殖土、玉米芯、煤渣、食用菌废料等材料进行了混配,采用配方对比方法进行烟草育苗试验,研究了不同处理基质的理化性状及其对烟草出苗率、成苗率和农艺性状的影响。结果表明,花生壳与河沙以60∶40的体积比及花生壳与腐殖土以50∶50的体积比进行混配的配方处理育苗效果最好,与商品基质的差异最小,且成本较低,具备作为烟草漂浮育苗基质的条件要求。     

分次追钾对襄阳烤烟钾含量及品质的影响

通过大田试验,研究了不同的追施钾肥方式和比例对襄阳烤烟物理特性、常规化学成分、中性致香物质和感官质量评价的影响,结果表明:分次追钾可以改善烤烟的物理特性,协调烟叶化学成分,显著提高了烤后烟叶的钾含量和有机钾指数,提高一些重要的香气物质含量,感官质量评价得分较高。以追钾2次的效果最好。