| 生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗 |
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| 引用本文： | 冯二凯,程悦宁,罗国良,易 立,王振军,郭 利,陈立志,程世鹏.生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗[J].中国兽药杂志,2019,53(6):41-47. |
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| 作者姓名： | 冯二凯 程悦宁 罗国良 易 立 王振军 郭 利 陈立志 程世鹏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院特产研究所,,,,,,,中国农业科学院特产研究所 |
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| 基金项目： | ：吉林省科技发展计划(20150204073NY)；吉林省“双十”重大科技攻关(20150201006NY)作者冯二凯,在读博士,主要从事毛皮动物疫苗悬浮培养工艺开发,tcsfek@126.com*通讯作者程世鹏,博士,研究员,主要从事毛皮动物疫苗、诊断制剂开发及疾病机理研究tcscsp@126.com ,程悦宁1,罗国良1,易 立1,王振军1,郭 利1,陈立志2, |
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| 摘 要： | 为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,在含有5 g/L微载体的DMEM培养基中接种Vero细胞(30～40 cells/球),设定p H、温度、溶氧值和转速分别为7.2、37℃、50%和55 r/min,培养方式为批次培养(0～48 h)+灌流培养(48～96 h)组合方式,培养Vero细胞3～4 d或细胞密度达到200 cells/球以上时,按照MOI=0.0001～0.001吸附接毒,调低温度(33℃)继续培养100～120 h,即可获得高滴度病毒液(10~(6.5)～10~(7.2)TCID_(50)/0.1 m L),经无菌检验合格后,配制水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养),疫苗符合《中国兽药典》三部(2015版)的规定。试验建立了7 L生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗的新工艺,为进一步规模化生产奠定了基础。
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| 关 键 词： | 非洲绿猴肾细胞 大规模培养 微载体 悬浮培养 生物反应器 |
| 收稿时间： | 2019/4/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2019/6/11 0:00:00 |
Suspension culture of Vero cells in bioreactor and preparation of mink canine distemper attenuated live vaccine |
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| Institution: | Institution of Special Animal and Plant Science of Chinese Academy of Agriculture Science,Jilin Changchun,,,,,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | African Green Monkey Kidney Large scale culture Microcarriers Suspension |
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