绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基基因(ndhB)的克隆及同源性分析

采用RT-PCR 技术克隆了绒毛白蜡NADH还原酶第二亚基cDNA 序列(FvndhB)。 FvndhB cDNA序列长893bp,由288个氨基酸残基组成,推测该序列编码的蛋白质相对分子质量为32.3kD,pI 为10.17。序列比对结果表明FvndhB与参考的8个物种的ndhBs在核酸水平上表现出较高的同源性,表明ndhB基因家族具有较高的保守性。其中与桑树的同源性最高,其次是银白杨,最后是日本柳杉。利用DNAMAN软件构建的系统进化树表明绒毛白蜡与其他植物亲缘关系较远。本研究首次从绒毛白蜡中克隆了ndhB基因,并对其进行了同源性分析,为进一步克隆绒毛白蜡ndhB全长基因及分析其表达特性奠定了基础。     

栽培型与野生型青蒿愈伤组织及毛状根的诱导

为了比较栽培型与野生型引种青蒿愈伤组织及毛状根的诱导差异,以2种类型青蒿种子为材料,在不加激素的MS培养基中诱导青蒿苗,并利用青蒿的根、茎和叶片在MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L诱导愈伤组织,发根农杆菌C58C1、ATCC15834和Accc10600诱导毛状根。结果表明青蒿愈伤组织诱导效率以根最佳,其次为茎和叶片。农杆菌C58C1和ATCC15834分别以青蒿的根和叶片的诱导率可达100%和70%;Accc10600菌种不能诱导青蒿叶片毛状根发生,但是可诱导根生出毛根的芽点。该研究为青蒿素的生物反应器规模化生产奠定了基础。     

腐胺对白桦悬浮细胞中激素和黄酮积累影响的初步研究

为明确腐胺对白桦悬浮细胞中激素和黄酮累积的影响,在白桦悬浮细胞生长的第8 天添加不同浓度的腐胺、脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、生长素(IAA)和玉米素核苷(ZR),采用紫外分光光度计法分析白桦悬浮细胞中黄酮含量和利用酶联免疫方法测定ABA、JA、IAA和ZR含量。外源腐胺和激素的添加均不同程度地提高了白桦悬浮细胞中黄酮的累积量,其中1 mmol/L 腐胺处理24 h 时增幅最高,增加了97.90%;激素中1 mg/LABA处理后增幅最高,增加了103.40%。腐胺和激素共同处理后黄酮含量的增幅均较其单独处理提高。其中1 mg/L 腐胺与5 mg/L JA 处理后黄酮含量增幅最高,比对照和腐胺处理分别增加了197.43%和103.57%。同时腐胺处理后增加了IAA 和ZR的含量,而降低了ABA和JA 含量。进一步分析其相关性发现,腐胺处理后激素、激素比与黄酮含量的相关性增幅不同,其中JA与黄酮含量的相关性增幅最大,由对照的-0.883 变为0.903。腐胺与ABA、JA、IAA和ZR协同促进了白桦悬浮细胞中黄酮的累积。     

抗体夹心BGT-ELISA方法的建立及在转基因白桦中的应用

以蜘蛛杀虫肽与Bt-toxinC肽融合蛋白基因(bgt基因)的表达产物的定量分析为研究目标,采用原核表达及纯化出融合蛋白His-BGT作为抗原进行兔免疫,得到相应的抗血清,采用ELISA法检测效价在1:10000以上,并对抗血清进行了免疫亲和层析,获得了高纯度的IgG,Westernblot检测具有较好的特异性。采用过碘酸钠法将抗体标记辣根过氧化物酶(HRP),得到第二抗体即酶标抗体,标记率在85%以上。建立起检测BGT杀虫蛋白的快速、灵敏的方法。应用该检测方法,分析了不同转基因白桦(BetulaplatyphyllaSuk.)株系中BGT蛋白含量占叶片可溶性总蛋白含量的0.05%～0.3%,并利用Westernblot验证了此方法是可靠的。说明抗体夹心BGT-ELISA方法能够定量分析转基因植株中BGT蛋白的含量,为转bgt基因植物的检测和应用奠定了基础。     

欧美山杨杂种工厂化育苗技术

为了降低欧美山杨杂种无性系的繁殖成本,以欧美山杨杂种(Populus tremula×P. tremuloides)优良无性系为研究材料,用自来水和绵白糖替代蒸馏水和蔗糖配制培养基,结合试管苗瓶外生根和扦插技术,提出了适合欧美山杨杂种工厂化生产技术的工艺体系,为欧美山杨杂种生产走上工厂化、产业化之路提供参考。     

盐胁迫下树木的K+和Na+含量变化特点及其耐盐性

通过几种主要造林树种在盐胁迫下体内Na+和K+含量变化的分析,对树木耐盐性及其机理进行了讨论.结果表明:不同树种的Na+和K+含量及在盐胁迫下的变化动态存在明显差异,说明其耐盐机制不同,树木的Na+和K+的质量比值,随NaCl的质量浓度的增加而上升、其上升幅度在耐盐性强的白榆中较小;在盐胁迫下,适当地增加Ca2+,可维持树木体内较低的Na+和K+的质量比,从而提高树木耐盐性.     

白桦组培再生系统的研究(Ⅱ)——影响因素及培养程序

在“白桦（Ｂｅｔｕｌａｐｌａｔｙｐｈｙｌａｓｕｋｓ）组培再生系统的研究（Ⅰ）”的基础上,以展叶顶芽、休眠腋芽和种子为最初外植体,通过初始培养获得无菌苗后,选取无菌苗的不同部位作外植体,如：茎节、嫩枝、愈伤组织等,经过诱导培养、分化培养及生根培养,形成再生植株。研究了培养基、激素种类及浓度、无性系、外植体类型、蔗糖浓度对诱导及生根的影响,提出白桦组培的最佳条件及程序。最佳无性系的一个外植体,经三次继代培养增殖达３０００株,最佳培养基上的生根率达９５％以上,Ⅰ、Ⅱ级苗的移栽成活率达９０％。     

金芒果枣多糖的提取工艺

以金芒果枣(Zizyphus jujube)为原料,利用超声波辅助提取,用醇沉法得到多糖沉淀,用去离子水溶解后,采用苯酚-硫酸法,在波长490 nm处测定吸光度,以葡萄糖标准品为对照品,计算金芒果枣多糖的提取率;并采用正交试验法,对影响多糖提取的提取温度、提取时间、料液比、超声功率4个因素进行考察,确定金芒果枣多糖提取的最佳工艺.结果表明,最佳提取工艺条件为提取温度70℃,提取时间20 min,料液比1∶20(m/V,g∶mL),超声功率150 W;此条件下得到的多糖提取率最高,为7.218％.     

茶条槭悬浮培养的动力学

对茶条槭细胞培养动力学进行研究,在培养周期内不同的培养阶段测定茶条槭细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗,电导率的变化,以及细胞的鲜质量与干质量的变化,从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律,为建立结构化动力学模型奠定基础.研究结果表明:1)茶条槭细胞悬浮培养周期约为15天,经过15天的悬浮培养,最大生物量和没食子酸含量分别达到了11.3 g·L-1和0.49％.细胞的最大比生长速率和没食子酸的最大比生成速率分别为0.541 d-1和0.682 d-1.没食子酸的比生成速率当细胞比生长速率在0.3～0.4d-1时较高.没食子酸的积累和茶条槭细胞的生长模型为部分生长偶联型.2)培养过程中培养基的电导率逐渐下降,到第21天时达到最低点,之后电导率略微上升.3)经过15天的培养后,培养基中磷源和蔗糖,消耗殆尽;在细胞培养前期细胞吸收铵盐较快,12天时已消耗殆尽,而细胞吸收硝酸盐开始速度较慢,6天细胞开始大量吸收硝酸盐,15天时培养基中的硝酸盐达到最低值.     

水曲柳种子园花粉飞散规律研究

[目的]研究影响水曲柳花粉成熟和飞散的关键因素,揭示花粉飞散规律,为水曲柳种子园的设计及升级改造提供依据.[方法]通过对苇河林业局青山林场水曲柳种子园进行初步研究,对水曲柳开花期间花粉在时间和空间分布,水平和垂直分布,及花粉的飞散规律进行观测研究.[结果]园内雄花于5月10日开始散粉,散粉期从5月10～15日,花粉浓度的时间和空间变化以及水平和垂直分布与环境因素有密切关系.花粉浓度的最大值（4 737粒）在9：00～ 15：00.[结论]影响花粉飞散的因素中,环境因子（风速、温度、相对湿度、风向）起主要作用.影响花粉量大小的因素中,温度占主导地位.