黄鳝性腺差异表达基因的筛选和克隆

运用ACP—DDRT—PCR技术筛选和克隆了黄鳝不同发育时期性腺组织的差异表达基因。结果显示：利用2个随机ACP引物筛选到2个表达差异显著的基因,并对这2条差异表达片段进行克隆、测序分析,获得这2个基因的部分cDNA序列,长度分别为408bp和421bp。同源性分析结果显示其中一个基因与黄鲈卵巢cDNA文库中的一个基因（GeneBankNo．G0657149．1）高度同源;而另一个基因无同源性序列,视为新报道的基因。进一步半定量RT—PCR检测,结果显示：这两个基因在黄鳝卵巢和间期性腺中的表达差异显著,因此推测其在黄鳝性腺发育以及性逆转过程中起着重要作用。     

黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析

应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝(Monopterus albus)Ⅳ期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库.正向差减杂交以间期性腺为试验方,Ⅳ期卵巢为驱动方;反向差减杂交以Ⅳ期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方.将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子.经PCR扩增鉴定插入片段范嗣为200～2000 bp.随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对.进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证.结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的.黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础.     

内生真菌对小花棘豆种子抗渗透胁迫能力的影响

以含有内生真菌的小花棘豆种子为材料,采用剥除种皮的方式构建内生真菌未感染的小花棘豆种群,通过比较内生真菌感染和内生真菌未感染种群在正常条件下(对照)和渗透胁迫条件下种子发芽、幼苗生长等方面的差异,探讨内生真菌对其宿主植物的直接和间接影响.结果表明:内生真菌对种子发芽率无显著影响;内生真菌可促进小花棘豆幼苗的生长.     

两种“吉富”罗非鱼耗氧率、窒息点的初步研究

[目的]为两种“吉富”罗非鱼的养殖结构优化及其运输提供理论依据。[方法]在恒温20±0．5℃条件下,用呼吸室法对“JNM”和“GTC”两种吉富罗非鱼的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。[结果]①平均体重为381．90±19．25g的“JNM”昼夜平均耗氧率为O．069±0．022mg/（g·h）;平均体重为302．00±7．76g的“GTC”昼夜平均耗氧率为0．033±0．017mg/（g·h）。②两种试验鱼的耗氧率与饥饿时间呈负相关,代谢率随着饥饿程度的加深而降低。③“JNM”和“GTC”的窒息点分别是：1．54±0．17、1．70±0．23mg/L。[结论]当温度在20±0．5℃时,“GTC”与“TNM”相比,需氧量大．窒息点低。     

饥饿对白斑狗鱼耗氧率、代谢率及主要生化指标的影响

在不同温度下[(3±0.5) ℃,(8±0.5) ℃和(13±0.5) ℃)]对白斑狗鱼的呼吸耗氧率、代谢率及主要生化指标(肝糖元,乳酸,酸、碱性磷酸酶)进行120 h的饥饿试验.试验结果表明:在水温为(3±0.5) ℃、(8±0.5) ℃和(13±0.5) ℃下,白斑狗鱼的耗氧率与饥饿时间呈负相关,分别由(0.005 1±0.001 7) mg/(g·h)、(0.016±0.001 9)mg/(g·h)和(0.025±0.005 4) mg/(g·h)下降至(0.001 1±0.000 35)mg/(g·h)、(0.009 8±0.001 2) mg/(g·h)和(0.015±0.003 2) mg/(g·h).代谢率随着饥饿程度的加深而降低,分别由(5.23±0.34) mg O2/(kg·h)、(16.05±23.89) mg O2/(kg·h)和(25.39±37.28) mg O2/(kg·h)下降至(1.08±0.052) mg O2/(kg·h)、(7.48±14.77) mg O2/(kg·h)和(14.99±21.94) mg O2/(kg·h).肝糖元随着饥饿程度的加深而减少,分别由(67.70±6.66) mg/g、(59.69±5.75) mg/g和(41.83±3.72) mg/g减少至(54.14±5.12) mg/g、(38.77±3.38) mg/g和(19.18±1.14) mg/g;肝组织中乳酸含量随饥饿程度的加深而增加,分别从(0.36±0.004) 1 mmol/g prot、(0.25±0.002 9) mmol/g prot和(0.15±0.003 4) mmol/g prot增加至(3.16±0.089) mmol/g prot、(0.87±0.008 4) mmol/g prot和(0.48±0.028) mmol/g prot;随着饥饿时间的推移,肝胰脏中的酸、碱性磷酸酶活力也出现不同程度的增强,在(3±0.5) ℃下,分别增加了217.36 U/g prot和157.85 U/g prot;在(8±0.5) ℃下,分别增加了27.67 U/g prot和34.43 U/g prot;在(13±0.5) ℃下,分别增加了98.62 U/g prot和10.95 U/g prot.     

黄鳝性逆转研究进展

黄鳝具有与其他脊椎动物不同的生理特性,即性逆转现象,这种独特的生理现象使它成为研究者热衷的研究对象之一。近年来,由于黄鳝的自然资源日趋下降,使得明确其性逆转的生物学机制日益重要,以解决市场对黄鳝苗种的需求。从组织学、内分泌学和分子生物学的角度综述黄鳝性逆转的研究现状。     

二氧化碳麻醉对白斑狗鱼的影响

在不同水温(8℃和13℃)试验条件下,观察了白斑狗鱼经二氧化碳麻醉处理后的麻醉行为,测定了其主要生化指标的变化.试验表明:(1)白斑狗鱼的麻醉行为是一个渐变的过程,可分为不被麻醉(O)、轻度麻醉(A1)、中度麻醉(A2)、深度麻醉(A3、A4).(2)麻醉效果随着水温的升高而增强.从8℃水温到13℃水温时,麻醉用时由17 min 21 s缩短至14 min 15 s,复苏用时由8min 29 s缩短至3min 14 s.(3)在不同温度下经过麻醉处理后,白斑狗鱼的肝糖原减少;乳酸增加,酸、碱磷酸酶的活性都有所增加.     

氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性研究

采用常规生物急性毒性实验法,研究了在pH7．85、水温8℃条件下,氨氮对白斑狗鱼成鱼的急性毒性。结果表明,白斑狗鱼对氨氮的耐受力不强,氨氮对白斑狗鱼成鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为45．85、35．26、27．24、24．92mg／L,安全浓度为2．492mg／L;非离子氨对白斑狗鱼的24、48、72、96h的半数致死浓度分别为0．613、0．471、0．364ms／L、0．333mg／L,安全浓度为O．033mg／L。     

6个玉米自交系配合力分析及应用评价

按P1×P2不完全双列杂交设计,用NCⅡ分析方法,对6个玉米自交系的9个性状的配合力及其群体遗传参数进行研究。结果表明:郑311、郑314和郑388的一般配合力高,可直接利用;而郑312、郑315和郑389综合性状较差,需改良后利用;郑388×昌7-2等8个组合具有较强的杂种优势,有一定的增产潜力。在育种工作中,对玉米的株高等7个性状宜早代选择,而对穗粒重等2个性状应进行晚代选择。     

温度对白斑狗鱼耗氧率、窒息点及主要生化指标的影响

在不同温度下,测定了平均体重为(597.2±96.3)g的白斑狗鱼(Esox lucius)的呼吸耗氧率、窒息点及主要生化指标。结果显示:在水温为3℃、8℃、13℃和18℃下,白斑狗鱼的耗氧率随着温度的升高而显著上升(P<0.05)。3℃时耗氧率最低;为(0.0047±0.000017)mg/g.h,18℃时耗氧率最高;为(0.029±0.0011)mg/g.h。当水温在13℃时,白斑狗鱼的昼夜平均耗氧率在(0.020±0.0031)mg/g.h,15:00耗氧率最低,11:00耗氧率出现最高值。Q10值的变化显示白斑狗鱼的耗氧率对温度具有敏感性,13～18℃时,Q10最小,此温度为白斑狗鱼的较适生长温度。在高温下(18℃),白斑狗鱼呼吸急促,呼吸频率达到(68.50±3.58)次/min;在低温下(3℃),白斑狗鱼呼吸缓慢,呼吸频率下降到(29.00±4.31)次/min。白斑狗鱼的窒息点随着水温的升高而增大,水温为13℃,其窒息点最高为1.68 mg/L,水温为3℃时,其窒息点最低为0.82 mg/L。随着水温的不断上升,白斑狗鱼的肝糖元含量、肝胰脏中的乳酸含量显著减少(P<0.05)。肝糖元含量由(67.70±6.66)mg/g降至(41.83±3.72)mg/g。乳酸含量由(0.36±0.0041)mmol/gprot降至(0.15±0.0034)mmol/gprot。肝胰脏中的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的酶活力随着水温的升高而小幅缓慢下降,分别由(21.51±0.69)U/gprot和(22.34±0.43)U/gprot降至(19.04±0.62)U/gprot和(18.10±0.41)U/gprot。