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猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为3μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,包被时间为37℃作用2 h,1.5%BSA 37℃封闭3 h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用30 min,抗体临界值为OD450nm≥0.306判为阳性,OD450nm≤0.268判为阴性,介于二者之间为可疑。该方法检测6份已知PEDV阳性血清效价为1∶3 200,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和口蹄疫病毒血清抗体均为阴性,批间和批内重复试验变异系数2.5%~8.3%,对江苏、上海、浙江、安徽地区587份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,证明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查。 相似文献
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通过对泾阳县玉米种植区矮花叶病毒病发生情况的田间调查,结合玉米矮花叶病毒病的发生特点,对泾阳县春播玉米矮花叶病毒病突发原因进行分析,并提出了综合治理对策。 相似文献
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以川农泡椒1号为试验材料,研究遮阳网+薄膜、遮阳网和露地3种栽培模式对川农泡椒1号品质的影响。试验结果表明,在夏季采用避雨栽培后,辣椒品质有所下降,其中VC、还原糖的含量均极显著低于对照,总糖含量差异不显著。而在避雨栽培的两种模式中,遮阳网+薄膜模式比遮阳网模式VC含量高5.4%,差异显著;还原糖高10.8%,差异极显著;总糖高0.8%,差异不显著。 相似文献
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采用RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因并克隆至原核表达载体pET-28a,转化到宿主表达菌BL21后经IPTG诱导表达和Ni柱纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组N蛋白,其大小约为58 ku。将纯化重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合,PEDV间接ELISA方法筛选,制备获得4株能稳定分泌PEDV抗体的杂交瘤细胞株1C9、4C8、4F8和6A11。Western blot和间接免疫荧光试验证明其与PEDV均有特异性反应,单抗亚类鉴定均属于IgG1,轻链为κ型。杂交瘤细胞培养上清ELISA抗体效价为1∶1 600~6 400,腹水ELISA抗体效价达1∶1.024×105以上;4株细胞连续培养20代,其ELISA抗体效价基本一致。本研究为PEDV感染的诊断和致病机制研究提供了有用工具。 相似文献
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重庆渝北区子姜大棚升温栽培技术 总被引:1,自引:0,他引:1
大棚升温栽培子姜,即在大棚中利用锅炉和耐热管组合进行升温栽培子姜,较一般设施栽培具有升温快、温度可控、成本低、操作简单等几大优点。通过加温,子姜上市时间提前到春节前后,效益大大提高。 相似文献
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2000和2001年江苏省稻瘟病菌的群体结构 总被引:2,自引:0,他引:2
利用Pot2-rep-PCR技术分析了2000及2001年采自江苏省五大稻区稻瘟病菌的DNA指纹。单元型和系谱分析结果表明:稻瘟病菌在DNA水平上具有很高的多态性;不同的年份及地区间稻瘟病菌的群体结构存在明显差异,但也有部分菌株属于相同系谱甚至同一单元型,而JSL17是各稻区均有分布的优势系谱;来自不同地区、相同寄主品种的菌株有相似的遗传背景,说明寄主品种的遗传背景在病菌进化的变异中起着重要的作用。 相似文献
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该文通过萧县2013年与2005年森林资源规划设计调查结果显示的森林资源总量的变化情况,分析了目前萧县森林资源现状、存在的问题,提出了森林资源可持续发展的对策建议。 相似文献