猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为3μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,包被时间为37℃作用2 h,1.5%BSA 37℃封闭3 h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用30 min,抗体临界值为OD450nm≥0.306判为阳性,OD450nm≤0.268判为阴性,介于二者之间为可疑。该方法检测6份已知PEDV阳性血清效价为1∶3 200,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和口蹄疫病毒血清抗体均为阴性,批间和批内重复试验变异系数2.5%～8.3%,对江苏、上海、浙江、安徽地区587份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,证明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查。     

猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

采用RT-PCR扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因并克隆至原核表达载体pET-28a,转化到宿主表达菌BL21后经IPTG诱导表达和Ni柱纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组N蛋白,其大小约为58 ku。将纯化重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合,PEDV间接ELISA方法筛选,制备获得4株能稳定分泌PEDV抗体的杂交瘤细胞株1C9、4C8、4F8和6A11。Western blot和间接免疫荧光试验证明其与PEDV均有特异性反应,单抗亚类鉴定均属于IgG1,轻链为κ型。杂交瘤细胞培养上清ELISA抗体效价为1∶1 600~6 400,腹水ELISA抗体效价达1∶1.024×105以上;4株细胞连续培养20代,其ELISA抗体效价基本一致。本研究为PEDV感染的诊断和致病机制研究提供了有用工具。     

影响药物作用的因素

药物的作用是药物与机体互相作用过程的综合表现,许多因素都可能影响或干扰该过程,使药物的效应发生改变。主要探讨给药途径、动物年龄和药物的理化性质对药效的影响,以期为临床用药提供参考。     

白术矮化病毒病病原的分子鉴定和部分序列分析

 本试验在生物学接种的基础上,利用非序列依赖性PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)对白术矮化病毒病病原进行了分子鉴定,序列测定及分析。结果发现,具有矮化症状的白术为黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)所侵染。为明确CMV白术分离物(CMV-Am)的分类地位,本研究进一步克隆了CMV-Am的外壳蛋白基因(CP)和移动蛋白基因(MP)全序列。序列比对分析表明,CMV-Am与CMV亚组ⅠB中株系XJ2序列同源性最高,核苷酸、氨基酸序列同源性分别为98.9%、99.1%。氨基酸序列同源性聚类分析表明,CMV-Am与中国大多数CMV分离物一样,属于CMV亚组ⅠB。     

三种鸡抗球虫药的效力比较试验

鸡球虫病是养禽业中常见的一种疾病,它对养鸡生产的危害十分严重,分布很广。在我国抗球虫药物的种类很多,但由于球虫耐药性的普遍存在,抗球虫应用效果不是很理想。试验通过挑选健康雏鸡随机分组,在人工感染鸡柔嫩艾美耳球虫条件下,评估3种抗球虫药物(磺胺氯吡嗪钠、马杜拉霉素、盐酸氯丙嗪)的抗球虫效果,并对3种抗球虫药物进行比较,以抗球虫指数(ACI)作为药物治疗效果的综合评定指标,为规模化养鸡场提供试验依据,以适应生产实际需要。     

三种鸡抗球虫药的效力比较试验

鸡球虫病是养禽业中常见的一种疾病,它对养鸡生产的危害十分严重,分布很广。在我国虽然已使用抗球虫药物的种类很多,但由于球虫耐药性的普遍存在,抗球虫效果不是很理想。本试验通过挑选健康雏鸡随机分组,在人工感染鸡柔嫩艾美耳球虫条件下,评估三种抗球虫药物（磺胺氯吡嗪钠、马杜拉霉素、盐酸氯丙嗪）的抗球虫效果,并对三种抗球虫药物进行比较,以抗球虫指数（ACI）作为药物治疗效果的综合评定指标,为规模化养鸡场提供实验依据,以适应生产实际需要。     

影响药物作用的因素

药物的作用是药物与机体互相作用过程的综合表现,许多因素都可能影响或干扰该过程,使药物的效应发生改变.主要探讨给药途径、动物年龄和药物的理化性质对药效的影响,以期为临床用药提供参考.     

局部麻醉药对神经传导作用的影响

本试验通过用普鲁卡因麻醉蟾蜍坐骨神经后,给与左右腿盐酸刺激,来验证传入神经纤维和传出神经纤维对局部麻醉药敏感度的差异。结果表明,传入神经纤维对局麻药比传出神经纤维敏感。     

一例犬膀胱尿道结石的诊治体会

尿结石又称尿石症，是指尿路中形成的盐类结晶凝集物，刺激尿路黏膜而引起出血、炎症和阻塞的一种泌尿器官疾病。临床上根据阻塞部位分为肾结石、输尿管结石、膀胱结石和尿道结石。且临床上以排尿困难和血尿、尿频、急剧腹痛问或呕吐，肾区及腹部触诊结石部位敏感等症状为特征，为犬猫常见的尿路疾病。本文以一例患膀胱尿道结石的公犬为例，阐述犬尿石症的基本治疗方法及体会。     

低聚果糖的生产工艺及应用

介绍了低聚果糖的理化特性,概述了其在动物生产、饲料、疾病防治等方面的作用,着重阐述了其不同生产方法的工艺特点,并展望低聚果糖在畜牧生产上的应用前景。