甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球作为口蹄疫病毒核酸疫苗递送载体的特性评价

旨在对制备的甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly （D，L-lactide-co-glycolide），PLGA]纳米微球作为口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）核酸疫苗递送载体进行评价。采用西佛碱反应和元素分析制备具有一定取代度的甘露糖修饰的壳聚糖衍生物（mannose modified chitosan，MCS），然后，经双重乳化挥发法制备得到甘露糖修饰的壳聚糖PLGA纳米微球（MCS-PLGA-NPs）。采用纳米粒径仪检测MCS-PLGA-NPs粒径分布和表面电势（zeta）、扫描电镜考察其形态、琼脂糖凝胶电泳观察其对质粒的吸附和吸附质粒后抵抗核酸酶降解能力、CCK-8法检测MCS-PLGA-NPs的细胞毒性、激光共聚焦观察巨噬细胞对MCS-PLGA-NPs-质粒DNA复合物的摄取、荧光显微镜和Western blot验证MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA在细胞中的表达。元素分析结果表明，成功制备了取代度为5%~10%的MCS。纳米粒径测定和扫描电镜结果表明，MCS-PLGA-NPs的zeta为正值、粒径分布均匀且形态规则呈球形。琼脂糖凝胶电泳结果显示，MCS-PLGA-NPs吸附质粒的能力随着其质量的增加而增强并且可以在一定程度上抵抗核酸酶降解质粒DNA。在细胞毒性试验中，不同浓度的MCS-PLGA-NPs与RAW264.7细胞共孵育24 h后，细胞存活率仍在85%以上。在细胞摄取试验中，用激光共聚焦显微镜可以明显观察到质粒DNA结合到纳米微球表面被RAW264.7细胞摄取。荧光显微镜和Western blot试验证明MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA可以在细胞中进行表达。综上表明，本研究成功制备了MCS以及具有递送核酸疫苗能力的MCS-PLGA-NPs，为FMDV核酸疫苗的递送研究提供了新的方向和见解，也为该递送载体携带特定抗原靶向抗原递呈细胞表面甘露糖受体以及应用于动物免疫的研究奠定基础。     

鸡球虫病疫苗研究现状及展望

本文主要就鸡球虫病疫苗相关研究进展进行综述。     

广西动物疫苗等防疫物资管理现状及建议

动物疫苗等防疫物资能有效预防、控制和消灭动物疫情,有效规范的管理和使用动物防疫物资,有利于提高动物防疫质量,促进我国畜牧业和公共卫生的健康稳定发展。分析广西动物疫苗等防疫物资管理现状,针对存在的问题,提出解决的合理化建议。     

猪传染性胃肠炎诊断及疫苗研究进展

猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性的肠道传染病,以引起仔猪严重腹泻和高死亡率为主要特征,不同年龄的猪均易感,严重危害养猪业的健康发展。要控制该病的发生与流行,必须要有相应的诊断技术及疫苗免疫接种。近年来,针对猪传染性胃肠炎的检测技术及疫苗研究取得了迅速发展。对该病的诊断技术及疫苗的研究进展作一综述。     

基层动物防疫中存在的问题和对策

村级动物防疫员是基层动物防疫实施的主体力量、动物防疫体系建设的重要组成部分和动物源性食品安全的保障者,对畜牧业健康稳定发展、经济发展及社会和谐稳定等起到了重要作用。目前,我国基层动物防疫工作仍存在一些不足,影响畜牧业的发展。主要综述我国基层动物防疫中存在的一些问题,并提出了相应对策,以为基层动物防疫工作提供参考。     

E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2 DNA疫苗的构建及保护力分析

为了构建E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗,并确定其抗球虫效力。采用RT-PCR方法分别克隆出鸡IL-2和E.tenella河北株EtMIC-2基因,并连接到pMD18-T载体上进行测序;将目的基因克隆到pcDNA3.0载体,构建重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,并转染293T细胞,用Western blot方法验证表达。将构建的重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗以50,100,150μg/只的剂量分别在14,21日龄胸肌注射免疫试验鸡,除阴性对照组外,28日龄时经口灌服孢子化E.tenella卵囊4×10~4个,研究其对E.tenella感染后的免疫保护效果。结果表明:成功构建了重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,且能在293T细胞中表达出融合蛋白;3个免疫组的ACI比阳性对照组分别提高了97.63%,127.02%和129.81%,其中免疫剂量为100,150μg时,ACI均达160以上,具有良好的免疫保护效果。     

四川省小反刍兽疫疫苗免疫效果评价试验

为掌握2017年四川省招标小反刍兽疫疫苗免疫效果,在疫苗使用环节抽取小反刍兽疫疫苗开展免疫效果试验。120只30日龄试验羊随机分成6组,将抽取的小反刍兽疫疫苗分别与6种口蹄疫疫苗联合免疫,于首次免疫当天、加强免疫后28d采集血清,使用ID.VET公司小反刍兽疫抗体竞争ELISA试剂盒进行检测,评价疫苗的免疫效果。检测结果显示,各试验组均无明显的免疫副反应,加强免疫后28d均达到农业部规定要求的70%水平以上,总体阳性率达到96.67%。试验结果表明,四川省招标采购的小反刍兽疫疫苗能诱导羊只产生整齐、高水平的免疫抗体,具有良好的免疫效果,为制订更合理的小反刍兽疫免疫程序和防控方案提供数据参考。     

猪圆环病毒疫苗临床免疫效果观察

猪圆环病毒2型(PCV2)是危害世界养猪业的一个重要病原,造成巨大经济损失。本试验选用PCV2 SH毒株水包油包水乳剂及其水佐剂灭活疫苗、进口的Ingelvac~?CircoFLEX~(TM)基因工程亚单位疫苗和国产的大肠杆菌表达的重组Cap亚单位疫苗,在确诊PCV2感染的某规模化猪场开展仔猪免疫试验。结果显示:两种PCV2 SH株灭活疫苗均能明显降低发病率和死亡率,降低病毒血症,提高日增重,其免疫效果与CircoFLEX疫苗相当,优于大肠杆菌表达的重组Cap亚单位疫苗,值得推广应用。     

CpG-ODN佐剂在猪口蹄疫疫苗免疫增强的应用

本研究将CpG佐剂同高端口蹄疫疫苗混合后免疫生长猪,经过液相阻断法对抗免疫后的体效价进行评估。结果表明,CpG佐剂同高端口蹄疫疫苗同时使用可以提高免疫抗体水平和免疫合格率。