双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

[目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带;且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85％以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。     

拐枣水提取液对小白鼠解酒的作用

以酒醉小白鼠为研究对象,通过"翻正反射"动物实验,观测拐枣水提取液对小白鼠的醉酒率、醉酒潜伏时间和醒酒时间的影响。结果表明,与模型对照组相比,拐枣水提取液实验组的小白鼠醉酒率下降,醒酒时间明显缩短,差异达极显著水平(P0.01);高剂量实验组小白鼠的醉酒潜伏时间较低剂量组明显延长,有显著差异(P0.05)。可见,拐枣水提取液对小白鼠醉酒具有一定的解酒作用。     

6种常见药物对杂交鳢的急性毒性试验

[目的]为杂交鳢的苗种培育及鱼病防治提供参考。[方法]在室内静水条件下,采用常规生物毒性方法研究6种常见药物（甲苯咪唑、铜铁合剂、硫酸铜、敌百虫、三氯异氰尿酸、甲醛溶液）对杂交鳢的急性毒性效应。[结果]6种药物对杂交鳢的安全浓度分别为硫酸铜0.09mg/L、铜铁合剂0.07mg/L、敌百虫0.17mg/L、三氯异氰尿酸0.36mg/L、甲苯咪唑0.029mg/L、甲醛溶液24.57mg/L;杂交鳢对供试药物的敏感性依次为：甲苯咪唑〉铜铁合剂〉硫酸铜〉敌百虫〉三氯异氰尿酸〉甲醛溶液。[结论]硫酸铜、敌百虫、三氯异氰尿酸、甲苯咪唑和甲醛溶液对杂交鳢的安全浓度均与常规使用浓度相当或低于常规使用浓度,因此这些药物均可用来防治相应的杂交鳢疾病。     

河川沙塘鳢线粒体细胞色素b(Cytb)基因序列分析

采用特异性引物PCR扩增获得了河川沙塘鳢细胞色素b基因序列,并与塘鳢科其余22种细胞色素b基因序列进行比对,运用Mega 3.1软件通过NJ法构建了塘鳢科鱼类系统发育树。结果显示:2尾试验鱼构成1支;Eleotris、Hypseleotri 2个属构成1支;Odontobutis、Perccottus glehni 2个属构成1支;Bostrychus、Butis、Oxyeleotris、Ophiocara 4个属构成1支;Ptereleotris heteroptera单独构成1支。该研究结果可为深入探讨沙塘鳢属及塘鳢科鱼类的系统分类与重新整理提供依据。     

杂交鳢池塘养殖技术

以池塘专养模式研究杂交鳢的养殖技术。杂交鳢鱼种放养密度为7000尾／667m^2、5000尾／667m^2;采用膨化颗粒饲料投喂,结合水质调控和病害防治等技术,取得了较好的效果：平均饲料系数为1．367,平均单产3447．5kg／667m^2。杂交鳢售价13元／kg,除去养殖成本,平均每667m^2利润达7327．8元,经济效益显著。     

杂交鳢和乌鳢池塘养殖对比试验

对杂交鳢和乌鳢进行池塘养殖对比试验.前者投喂人工饲料,后者投喂冰鲜鱼,结合水质调控和病害防治等技术,杂交鳢成活率80.9%,乌鳢53.9%;杂交鳢平均单产为5.2 kg/m~2,饵料系数1.367;乌鳢1.8 kg/m~2,饵料系数4.29.整个养殖过程杂交鳢塘换水2次,乌鳢塘换水6次.     

台湾泥鳅池塘高效养殖示范

正泥鳅肉质细嫩,营养丰富,作为滋补佳品,具有广阔的市场前景,尤其是近些年来,国际国内的泥鳅消费市场需求日益增大、销售价格连续走高,泥鳅的人工养殖也迅速升温。近几年引入杭州试养殖的台湾泥鳅,具有生长快、规格大、养殖周期短、产量高、易驯养等生产上的优势,在杭州地区取得较好的经济效益。鉴于此,2014—2015年,笔者在杭州地区进行了池塘高效养殖模式研究与示范,取得了较好的效果,现总结如下。     

黑水虻对乌鳢（Channa argus）生长性能、饲料利用及营养组成的影响

试验旨在研究黑水虻幼虫干虫、虫粉替代鱼粉对乌鳢生长性能、饲料利用及肌肉营养组成的影响。选取初体重为（6.87±0.62）g的乌鳢幼鱼135尾,随机分成3组,每组3个重复,每个重复15尾鱼。分别用黑水虻幼虫干虫（BSF,粗蛋白33.30%、粗脂肪39.20%）、黑水虻幼虫虫粉（DBSF,粗蛋白53.00%、粗脂肪11.80%）替代基础饲料（鱼粉含量40%）50%的鱼粉。试验包括鱼粉组（D0组）、干虫组（D1组）和虫粉组（D2组）三种硬颗粒缓沉性饲料,开展为期60 d的养殖试验。结果表明：黑水虻干虫和虫粉替代50%鱼粉对乌鳢生长性能、饵料系数和成活率等无显著性影响（P>0.05）。与鱼粉组（D0组）相比,黑水虻干虫对乌鳢的摄食率有显著的负面影响（P<0.05）,脏体比显著提高（P<0.05）。黑水虻干虫和虫粉替代试验饲料50%鱼粉对鱼体和肌肉的粗蛋白含量无显著性影响（P>0.05）,干虫组（D1组）鱼体粗脂肪含量显著高于其他组（P<0.05）,肌肉粗脂肪显著高于鱼粉组（P<0.05）。替代50%鱼粉后干虫组（D1组）和虫粉组（D2组）肌肉部分必需氨基酸含...     

硝基呋喃类代谢物抗原合成及在胶体金试纸条上的应用

在酸性条件下,以4-羰基苯甲醛为衍生化试剂分别与4种硝基呋喃类代谢物(AOZ、SEM、AMOZ和AHD)反应制成相应半抗原:CPAOZ、CPSEM、CPAMOZ和CPAHD,采用碳二亚胺法将半抗原与牛血清蛋白偶联合成人工抗原:CPAOZ-BSA、CPSEM-BSA、CPAMOZ-BSA和CPAHD-BSA,产物经紫外扫描鉴定,表明抗原偶联牛血清蛋白成功。在此基础上研制成4种硝基呋喃代谢物快速胶体金试剂条,最低检出限分别为0.5、1.0、1.0、2.0μg/kg,相互间的交叉反应率小于0.1%。     

孔雀石绿胶体金快速检测试剂板的研制及应用

为建立孔雀石绿免疫胶体金快速检测试剂板,采用杭州南开日新生物技术有限公司实验室自制的包被抗原孔雀石绿-卵清蛋白偶联物(MG-OVA)、抗孔雀石绿单抗作为原料,将各组分经过调试优化后组装成试剂板。结果表明,该试剂板对阴性水产样品的检测结果与液相-串联质谱法(LC-MS/MS)完全符合,对水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的最低检出限分别为1μg/kg和3μg/kg,整个检测所需时间约30min。该试剂板具有快速、灵敏、准确的特点。