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本研究利用体外表达获得的H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白包被ELISA板,建立鉴别诊断方法,对111份健康非免疫鸡血清及456份待检禽流感灭活疫苗免疫鸡血清进行检测发现,检测健康非免疫鸡血清的阴性率为100%,检测禽流感灭活疫苗免疫鸡血清的阴性率达到94%(429/456);检测62份禽流感病毒感染鸡血清,有55份呈阳性反应,敏感性为88.7%(55/62);进行NS1抗体消长规律试验,显示攻毒后第7天开始部分鸡血清NS1抗体水平上升,至14~21 d抗体水平达最高峰。 相似文献
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试验采用PCR方法扩增出猪嗜淋巴细胞疱疹病毒2型(porcine lymphotropic herpesviruses 2,PLHV-2)gB基因全序列,并进行测序,使用生物信息学软件对gB蛋白进行生物信息学分析和预测。结果显示,gB蛋白由876个氨基酸组成,分子式为C4500H6975N1199O1351S40,分子质量为100.77 ku,等电点为6.45,不稳定系数为38.58;二级结构预测以无规则卷曲为主要结构,1-39位氨基酸为信号肽,761-780位氨基酸为跨膜区结构,具有多种功能位点,存在多处天然非规则结构蛋白;三级结构显示有一个具有溶解作用的环状构象。综合多种方法分析预测结果表明,gB基因存在多个B细胞线性抗原表位,可作为PLHV-2疫苗的候选抗原。 相似文献
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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达 总被引:4,自引:0,他引:4
利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析.结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B.再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1.经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白.用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性. 相似文献
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采用杂交瘤技术,筛选并克隆出能够稳定分泌抗泰乐菌素(TYL)单抗的杂交瘤细胞株,免疫BALB/c小白鼠制备抗泰乐菌素单克隆抗体,建立泰乐菌素竞争ELISA检测试剂盒。结果表明,logit/log拟合标准曲线为y=-1.84x+2.02,相关系数r=0.9944,线性检测范围为1.5~121.5ug/L,半数抑制浓度(IC50)为10.3ug/L,灵敏度为1.5ug/L,检测限为1.5~3.0ug/L;肌肉、肝脏、蜂蜜的添加回收率分别为64%~99%、61%~102%、60.5%~95%;平均批内和批间变异系数均小于10%;泰乐菌素与替米卡星(TIL)的交叉反应为40%,与其他类抗生素无交叉反应;此泰乐菌素试剂盒在4℃可保存6个月以上。本文建立的竞争ELISA检测方法可用于动物源性食品中泰乐菌素残留的定量检测。 相似文献
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随着国际贸易的日益频繁,我国外来物种入侵数量呈上升趋势,本文对惠州进境粮食加工存放企业及周边开展外来杂草调查。本文通过实地调查,对惠州进境粮食加工存放企业及周边外来杂草的种类组成、分布、生活型、原产地、入侵途径和危害程度进行了分析。调查共发现外来杂草16科59种,其中检疫性杂草9种。菊科外来杂草种类最多,生活型以一年生草本为主;原产地以美洲为主,以无意引入为主,有6种外来杂草较严重地危害当地生态环境。本调查研究总结了惠州进境粮食加工存放企业及周边外来杂草的种类和类别,提出了防控建议,为构建进口粮食分类监管,构建生物安全防御体系提供参考。 相似文献