U+3B8FNPR1同源基因全长cDNA的分离与表达分析

 NPR1是水杨酸诱导抗病基因表达的重要调控因子之一，主要作用于水杨酸信号转导途径的上、下游。采用稀释池PCR法，筛选U+3B8F（Prunus salicina var. cordata）叶片全长均一化cDNA文库，分离U+3B8F叶片NPR1同源基因的全长cDNA；用不同浓度的水杨酸喷施一年生U+3B8F嫁接苗嫩叶，采用荧光定量PCR技术检测所获得的NPR1同源基因的表达量差异。试验结果表明，共获得了4个NPR1同源基因的全长cDNA，分别命名为PsNPR1、PsNPR3.1、PsNPR3.2和PsNPR3.3，其长度分别为2 442、1 827、2 244和2 615 bp，其ORF长度分别为1 788、1 770、1 767 和1 782 bp，分别编码596、590、589和594个氨基酸的蛋白质；氨基酸序列比对结果表明，U+3B8F这4个NPR1同源基因的编码区均含有BTB/POZ和ANK两个保守域及核定位信号（NLS）；PsNPR1与拟南芥的AtNPR1和AtNPR2聚为一簇，PsNPR3.1、PsNPR3.2和PsNPR3.3与拟南芥的AtNPR3和AtNPR4聚为另一簇。PsNPR1在喷施1.0 mmol ? L-1水杨酸的叶片中表达量最高；PsNPR1、PsNPR3.1、PsNPR3.2在响应1.0 mmol .  L-1水杨酸诱导过程中表达量持续上升， 30 h表达量最高，之后呈下降趋势，因此，水杨酸诱导抗病基因高表达的最佳处理浓度为1.0 mmol ? L-1，最佳响应时间为30 h。     

低温胁迫下三角梅若干生化指标的变化

采用电导法测定紫花、橙红和斑叶三角梅叶片在低温胁迫下的电解质外渗率,配合Logistic方程拟合曲线,计算其低温半致死温度（LT％）;通过观察3个品种三角梅越冬期间的冻害等级,测定叶片的丙二醛含量、保护酶（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶）活性和可溶性蛋白质含量来研究其耐寒性的强弱．结果表明：紫花、橙红和斑叶三角梅叶片的￡％分别为-3.48、-2.99和-2.37℃;低温持续时间的延长会导致三角梅叶片的电解质外渗率升高;三角梅不同品种间耐寒性的差异与越冬期间的冻害等级、叶片丙二醛含量、保护酶活性和可溶性蛋白质含量相关;紫花三角梅的耐寒性高于其他两个品种．     

贮藏温度对中国水仙鳞茎碳水化合物含量的影响

以中国水仙‘金盏银台’品种3年生休眠鳞茎为试验材料,研究在5、15、25、35℃和室温(CK)贮藏下鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖和淀粉含量的变化。结果表明:鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽淀粉含量变化受贮藏温度的影响显著;不同贮藏温度下内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖含量都基本稳定在一定的水平,而淀粉含量整体波动较大。在鳞茎贮藏期的叶芽和花芽分化期间,不同温度对淀粉水解产生显著影响,对可溶性糖的影响不显著,淀粉水解跟主芽的发育密切相关。因此,通过淀粉来研究了解水仙鳞茎贮藏期间碳水化合物的变化更适宜。      

荔枝果皮BPox的分离纯化及其在果实成熟过程中的表达

【目的】植物第III类过氧化物酶具有广泛的生理功能。前期研究发现荔枝果皮具高活性的离子结合态过氧化物酶（BPox）,与果实的着色、成熟密切关联,但其特性、作用机制不清楚。明确BPox的生化特性及其基因表达变化,为进一步研究BPox参与荔枝果实着色和成熟机制奠定基础。【方法】以‘乌叶’荔枝成熟果果皮为材料,通过提取及Streamline Phenyl、CM-52、Phenyl Sepharose HP和Superdex 200等柱层析,纯化获得BPox。测定BPox的最适反应pH、最适反应温度、底物特异性、抑制剂等生化特性。采用双倒数法测定其催化愈创木酚、(-)-表儿茶素的K_m值及V_max。应用MALDI串联质谱鉴定BPox的肽段序列,克隆BPox的cDNA。分别测定盛花后58、69、76、80和90 d荔枝果皮BPox的活性变化,应用荧光定量PCR分析BPox的基因表达变化。【结果】从荔枝果皮纯化得到BPox最主要的2个组分,分别命名为BPox-2和BPox-3。凝胶过滤层析和SDS-PAGE结果显示,BPox-2和BPox-3的表观分子量分别约为30 kD和34 kD。BPox-2和BPox-3的最适反应pH均为6.0,最适反应温度分别为40℃和45℃;二者具有相似的底物特异性;DTT、ASA和L-Cys等能强烈抑制其活性。BPox-2和BPox-3催化愈创木酚的K_m值分别为2.97和2.58 mmol∙L^-1,其V_max分别为38.72×10⁶和23.06×10⁶ U∙mg^-1;其催化(-)-表儿茶素的K_m值分别为3.49和3.24 mmol∙L^-1,V_max分别为38.72×10⁶和23.06×10⁶ U∙mg^-1。尽管BPox-2和BPox-3的肽质量指纹（PMF）不同,串联质谱分析显示,二者均具一个序列为TASLSAANSDLPSPFADLATLIAR的胰酶水解肽段。克隆得到BPox2的cDNA,大小为960 bp,共编码319个氨基酸。cDNA编码的多肽链N端包含1段26个氨基酸残基的信号肽,C端缺乏液泡分选序列,具1个潜在的N-糖基化修饰位点。幼果期,荔枝果皮BPox的活性表现弱;至盛花后76 d,果皮开始着色变红,BPox的活性迅速启动升高直至果实成熟。qPCR的结果显示,在盛花后的58和69 d,果皮BPox2的转录水平很低;盛花后76 d,BPox2的表达急剧上升,达到高峰,为盛花后69 d的60.56倍,而后下降。至盛花后90 d,其表达水平又显著上升。【结论】荔枝果皮的BPox-2与BPox-3最适反应pH、最适反应温度、底物特异性等与荔枝果皮可溶性Pox组分相似,但其对愈创木酚和(-)-表儿茶素的催化效率显著高于SPox。BPox-2与BPox-3同为BPox2所编码,因翻译后修饰差异而形成同工酶。BPox参与荔枝果皮的着色和成熟进程,其活性受转录水平调控。     

植物叶绿体SOD的转录调控与功能研究进展

对叶绿体SOD的遗传分类、转录调控过程以及SOD在叶绿体中的功能进行综述分析.叶绿体SOD的转录表达与铜分子伴侣(CCS)及Cu离子浓度密切相关.不同Cu离子浓度能够使不同类型SOD在叶绿体中选择性表达;在植物叶绿体中,SOD还可以进行电子传递、调节电子转移以及保护光合作用等.研究SOD缺失突变体及超表达对植物的影响,对分析SOD的功能具有重要意义.     

琯溪蜜柚汁胞粒化原因分析

观测分析了溪蜜袖汁胞的粒化过程、症状及若于相关因素。结果表明,汁胞粒化现象在果实生长后期（9月中下旬）开始出现,与果实正常种子数的有无与多寡有关。扫描电镜和透射电镜观察,发现汁胞的粒化是从顶端开始,外表横纹的消失是重要的外表特征;粒化汁胞细胞壁加厚,纤维、半纤维增多,高尔基体增加,核体积增大。并首次观察到粒化汁胞的细胞多核仁现象。     

低温胁迫下杧果叶片若干生理生化变化

比较从台湾省引进的 4个木亡果品种爱文、台农 1号、金煌、四季木亡果及我省本地土木亡在低温胁迫下叶片若干生理生化的变化 .结果表明 :木亡果受冻的临界低温因品种而异 ,为 - 2 - - 3℃ ,从台湾引进的 4个品种在 - 2℃经 6h即已受冻 .低温持续时间不同 ,木亡果受冻的临界低温也不同 ,本地土木亡 - 2℃经 18h与 - 3℃经 6h叶片的相对电渗率相同 .木亡果品种间耐寒性差异与叶片束缚水 /自由水比值以及可溶性蛋白质、游离脯氨酸、可溶性糖质量分数相关 ,土木亡上述诸项值均高于从台湾引进的 4个品种     

越冬期番石榴叶片脂质的过氧化状况

以本地种番石榴和台湾珍珠番石榴为材料 ,测定其叶片在越冬期间活性氧代谢的变化 .结果表明 :在越冬期 ,随着温度的降低超氧物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 (POD)、过氧化氢酶 (CAT)活性增强 ,在 1月 2 0日达最大值后下降 ;还原型谷胱甘肽 (GSH)含量呈类似趋势 ;台湾珍珠番石榴的抗坏血酸 (ASA)含量呈下降趋势 ,而本地种番石榴的 ASA含量先升后降 ;膜脂过氧化产物 (MDA)含量在整个越冬期呈上升趋势 ;在越冬期 ,本地种番石榴叶片 SOD、POD、CAT活性 ,以及 GSH、ASA含量均高于台湾珍珠番石榴     

成熟期不同橄榄品种（系）果实代谢组及其差异

橄榄果实风味独特,富含多酚、黄酮、氨基酸等多种生理活性物质,这些物质与其风味品质关系密切。目前对橄榄果实代谢物进行系统研究的报道较少,为解析橄榄果实的主要代谢成分并对3个品质类型存在差异的品种（系）（‘长营’‘檀香’‘灵峰’）进行比较,以期为橄榄果实品质形成、优良品种选育等研究提供理论基础。采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）的广泛靶向代谢组技术,测定3个橄榄品种（系）成熟期果实代谢物,并结合多元统计分析方法及3个品种（系）果实总酚、总黄酮、木质素含量数据进行分析,结果表明：‘檀香’总酚、总黄酮含量最高;‘灵峰’总酚、总黄酮及木质素含量最低;‘长营’总木质素含量则很高,与其化渣差的特点相吻合。利用广泛靶向代谢组学技术共检测出黄酮、酚酸类、氨基酸及其衍生物、有机酸、脂质、核苷酸及其衍生物、鞣质、糖及醇类、木质素和香豆素等13类524种代谢物,其中黄酮类代谢物数量最多,主要为槲皮素类、木犀草素类和山奈酚类。各品种（系）代谢物差异显著,主要的差异代谢物为黄酮类、酚酸类和氨基酸及其衍生物。‘长营’相比‘檀香’存在161种差异代谢物（上调代谢物116种、下调代谢物45种）,‘檀香’相比‘灵峰’存在164种差异代谢物（上调代谢物51种、下调代谢物113种）;‘长营’相比‘灵峰’存在146种差异代谢物（上调代谢物51种、下调代谢物95种）。差异代谢物KEGG通路富集分析发现,3个品种（系）中,‘檀香’的黄酮代谢及氨基酸代谢最为活跃,积累更多的槲皮素类、木犀草素类、山奈酚类、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等黄酮及氨基酸类物质;‘灵峰’较‘长营’的黄酮代谢相对较弱,黄酮类物质积累相对较少,这可能是造成‘檀香’橄榄风味更为浓厚,而‘灵峰’橄榄风味较为清甜的原因之一。     

九里香、柚花瓣HPL基因保守序列的克隆与分析

根据GenBank中登录的一些植物的脂氢过氧化物裂解酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR技术从芸香科的2种植物(九里香、柚)的花瓣中扩增出该基因的cDNA片段。测序表明,片段大小为512bp。2个片段均包含HPL基因的4个活性中心,并且同源性很高。