猪细环病毒检测方法研究进展

猪细环病毒（TTSuV）是近年来新发现的DNA病毒,在世界猪群中广泛存在,严重威胁着养猪业的发展,而且有潜在跨物种传播给人类的可能性,引起了养猪业的极大关注。通过综述TTSuV近年来检测方法研究进展,以期对科研工作者和广大养殖业主更好地防治该病提供参考。     

论种养结合模式

种养结合,可延长产业链,提高土地的经济利用率;同时改善畜禽的日粮结构,降低饲养成本,具有很好的社会效益和生态效益.实行种养结合,既降低成本又能增加收益,是转变我国农业发展方式的重要举措,对保证国家粮食安全和增加农民收入意义重大.本文从种养结合的含义、意义作用、技术原理及种养结合模式分类等几方面综合论述了有关种养结合的内容.     

泰安地区鸡源致病性大肠杆菌流行病学调查与耐药性分析

正本调查对鸡场采集的疑似鸡大肠杆菌病例的相关病料进行大肠杆菌的分离鉴定,共分离鉴定出14株鸡源大肠杆菌,以微量平板凝集试验鉴定分离菌株的O抗原血清型,分别属于O78、O2和O1等3个血清型,其中O78(6/14)、O2(6/14)为主要流行血清型,占分离菌株总数的85.71%。选取了20种常用治疗肠杆菌病的抗生素对14株鸡源大肠杆菌分离株进行药敏试验,对14株大肠杆菌     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株E11105 N基因的序列分析与原核表达

为研究PRRSV N蛋白的结构、功能以及N蛋白在病毒致病中的作用,以临床分离PRRSV毒株E11105为研究对象,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,经RT-PCR扩增出N基因片段,利用相关分子生物学软件对N基因序列进行分析;将N基因克隆连接到pColdⅠ原核表达载体上,经PCR、双酶切鉴定及序列测定后,得到重组质粒pColdⅠ-N,将pColdⅠ-N转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳及Western blot验证分析。结果显示,分离株E11105N基因与北美洲型代表株VR-2332、欧洲型代表株Lelystad virus(LV)、中国2006年暴发的高致病性PRRSV代表株JXA1、中国代表株CH-1a的核苷酸序列同源性分别为93.3%、34.7%、99.2%、95.4%,氨基酸序列同源性分别为94.4%、15.3%、94.4%、99.2%;系统进化树显示,E11105株N基因与美洲型代表株VR-2332、中国高致病性JXA1毒株的亲缘关系较近;分离株E11105N基因所编码蛋白不存在跨膜区;二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占20.33%和63.41%;预测该蛋白可能存在5个较为明显的B细胞优势抗原表位。SDS-PAGE蛋白电泳结果表明,重组N蛋白主要存在于菌体沉淀中,分子质量约为16.7ku;Western blot结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单克隆抗体识别,显色后条带约为16.7ku,与SDS-PAGE蛋白电泳的条带大小一致。     

羊源性成分LAMP检测方法的建立

根据羊cyt B基因设计3对特异性引物,运用GenieⅡ等温扩增荧光检测系统,以LAMP荧光检测方法为基础,建立了检测羊源性成分的LAMP方法,并对该方法进行了反应体系和条件的优化。试验结果表明:该方法操作简单、特异性好;灵敏度比普通PCR方法高100倍,比q PCR方法低10倍,达到5.928×10-3μg/μL;反应时间短,最快10 min即可完成反应。     

外源乙烯和1-甲基环丙烯处理对采后胡萝卜品质的影响

以胡萝卜为试材,采用乙烯及乙烯受体抑制剂(1-甲基环丙烯)处理,通过对贮藏60d后胡萝卜的品质劣变率(长须根率、腐烂指数、出薹率)、外观指数、可溶性糖含量及多酚氧化酶活性进行测定,研究了1-MCP对胡萝卜采后贮藏品质的影响。结果表明:1-MCP结合手洗贮藏可抑制胡萝卜贮藏期间的品质劣变率、抑制可溶性糖含量的损失、保持较高的外观指数及抑制多酚氧化酶(PPO)活性。手洗后贮藏则可有效改善胡萝卜贮藏期间的表皮褐变问题。     

1-MCP对‘岳冠’苹果贮藏品质的影响

以苹果新品种‘岳冠’为试材,用不同浓度1-MCP(1-甲基环丙烯)处理果实,并用0.04 mm保鲜袋包装,于(0±0.5)℃环境下贮藏,探究1-MCP处理对‘岳冠’苹果采后品质及相关酶活性的影响。结果表明,1-MCP处理有效降低呼吸强度和乙烯释放率,使果实呼吸高峰延迟15 d,延长了贮藏期,保持了果实的食用品质。处理浓度为1.0μL/L。     

基于实时环介导等温扩增技术快速检测玉米晚枯病菌

为了利用实时环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术,特异、灵敏、快速地检测检疫性病原菌玉米晚枯病菌（Cephalosporium maydis）,本研究选择种间遗传距离较高的Tef-1α和H3基因作为特异性基因,进行特异性引物的筛选、检测温度的优化、灵敏度和特异性检测等研究。实验结果表明,最佳引物组合为Tef-2,检测温度为65℃,最小检测限为0.10 pg/μL,且只对玉米晚枯病菌靶基因特异,检测应用结果可靠。环介导等温扩增技术能够用于玉米晚枯病菌的高效特异性检测,可为检验检疫部门对玉米晚枯病菌的检测工作提供有力的保障。     

环戊噁草酮对直播稻田杂草的室内活性及田间防效评价

为探究环戊噁草酮在直播稻田的科学使用技术,通过室内生物测定,明确了环戊噁草酮的杀草谱、生物活性及对8个主栽水稻品种的安全性,并验证了其在田间的防除效果。室内除草活性测定结果表明,在有效成分225 g/hm2剂量下,环戊噁草酮对牛筋草Eleusine indica、异型莎草Cyperus difformis、鳢肠Eclipta prostrata、香附子Cyperus rotundus及碎米莎草Cyperus iria 5种杂草的鲜重抑制率均可达90%以上,对直播稻田常见杂草稗草、马唐、鳢肠及碎米莎草的GR₅₀值 (有效成分,余同) 在82.15~189.17 g/hm2之间。安全性测定结果表明,在有效成分1800 g/hm2剂量下,环戊噁草酮对8种供试水稻品种安全,株高抑制率为1.89%~5.16%,鲜重抑制率介于1.47%~4.14%之间。环戊噁草酮在隆两优华占、梓两优5号、南粳9108、南粳46这4种水稻与稗草Echinochloa crus-galli、马唐Digitaria sanguinalis、鳢肠、碎米莎草4种杂草间的选择性指数在3.27~28.24之间,其中在水稻与鳢肠、碎米莎草之间的选择性指数明显高于对照药剂噁草酮。田间防效数据表明:在有效成分450 g/hm2剂量下,药后45 d,环戊噁草酮对直播稻田杂草的鲜重防效可达87.94%。研究表明,环戊噁草酮在直播稻田具有良好的应用前景。