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431.
猪巨细胞病毒(PCMV)是引起新生仔猪死亡、鼻炎、肺炎和生长速度减缓的重要病原之一,我国尚无有效的诊断方法.为建立检测PCMV的ELISA方法,本研究以重组PCMV囊膜糖蛋白B(gB蛋白)为包被抗原,优化反应条件:抗原包被量0.4 μg/mL,待检血清稀释度1∶100,37℃包被2h后4℃过夜,5%脱脂乳37℃封闭2h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用2h,抗体临界值为S/P≥0.354判为阳性,S/P≤0.295判为阴性,介于二者之间为可疑,建立了PCMV抗体间接ELISA检测方法.与猪瘟、猪伪狂犬病、猪附红细胞体病、副猪嗜血杆菌及猪圆环病毒2型等血清抗体无交叉反应,批间和批内重复性较好,对江苏省259份仔猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,从而为PCMV检测和流行病学调查提供了有效方法. 相似文献
432.
乳铁蛋白生理功能研究现状 总被引:10,自引:0,他引:10
乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的铁结合糖蛋白。本文阐述了乳铁蛋白促进铁吸收、调节免疫、抗菌、抗病毒、阻断氧自由基和促进双歧杆菌生长等生理功能,并对其应用前景进行了展望。 相似文献
433.
生长激素释放因子肝脏定向表达复合物在家兔体内的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
外源基因在体内的转染及表达存在转染效率低、表达时间短等缺点,利用受体介导基因转移技术,可以将基因定向转入到特定组织,并且能提高转染效率和表达时间。在本试验中,利用肝脏去唾液酸糖蛋白受体(ASGR)将生长激素释放因子(GRF)基因定向转入到家兔肝脏组织并得到了表达。首先通过DNA阻滞试验确定质粒DNA与多聚赖氨酸(poly—L—lysine,PLL)的结合比例及反应液的最佳NaCl浓度,然后将PLL与α—D-吡喃半乳糖苯基异硫氰酸盐(α—D—galactopyranosylphenyl isotlhiocyanate)(物质的量之比为8:1)在pH9.0的Na2CO3溶液中进行糖基化反应,得到糖基化的PLL(galPLL)后透析除去未反应的糖并测定反应物糖含量。将糖基化的PLL与克隆有GRF基因的pcDNA3-GRF质粒(质量比为3.16:1)在1.031mol/L的NaCl溶液中进行连接,最终得到DNA—galPLL复合物,电镜观察其结构。耳缘静脉注射质粒复合物到家兔体内(1.5mg/只),用RT—PCR和ELISA检测不同组织的表达情况。结果注射后7d家兔的肝脏RT—PCR结果呈阳性,27d仍能检测到GRF蛋白,但同时在其他的组织也检测到表达。并且进行了增重试验,发现定向转移GRF基因到家兔的肝脏对家兔的生长有一定的促进作用。 相似文献
434.
马立克氏病病毒648株囊膜糖蛋白gI基因的克隆和表达的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
根据马立克氏病病毒(MDV)强毒株GA的基因序列,设计和合成一对引物,以特超强毒648株基因组DNA为模板,通过PCR技术,扩增其囊膜糖蛋白gI基因阅读框(ORF)中,除去其N-端编码疏水区的165个碱基对(bp)以外的蓁部分;将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆到表性载体pGEX-6P-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,将重组质粒转化进大肠杆菌BL21株,在1.0mMIPTG浓度和30℃的条件下诱导,gI-GST基因融合蛋白获得了理想的表达;经聚丙烯酰胺凝脉电泳,West-ern-blot试验,通信班下其表达的融合蛋白产物大小为预期的63KD。将表达产物回收后免疫小鼠,所得抗血清可与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)在免疫荧光试验(FA)中呈细胞膜阳性染色。试验结果表明,在大肠杆菌中表达的648株MDVgI基因的融合蛋白产物保留了天然蛋白的某些抗原性。 相似文献
435.
436.
根据已发表的犬瘟热病毒OP株核酸序列设计2对引物,以犬瘟热病毒OP株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板,应用RT—PCR扩增出F基因的769、832bp片段。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGKX—6p—1载体中谷胱甘肽—S—转移酶(GST)基因的下游,再将重组质粒转化入宿主菌BL21中,在37℃ 1.0mmo1/L IPTG诱导下,F基因2个片段获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定所表达的融合多肽大小分别为54000、56000。将表达产物回收后混合免疫小鼠,IFA显示,免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应,并表现出1:16的中和抗体活性,表明体外表达的F多肽保留了天然蛋白的部分抗原性。 相似文献
437.
438.
对猪伪狂犬病毒鲁A株(PRVLA株)gE基因进行了克隆和序列测定。应用DNAStar程序分析了PRV国内外各分离株以及PRV与HSV-1、BHV-1、EHV-1、CHV-1、MDV-1、SHV-SA8、SVV、ILTV的gE基因。PRV各分离株的gE基因有很高的同源性。不同疱疹病毒的gE核苷酸和氨基酸的同源性很低,但具有相似的结构。对上述α疱疹病毒的gE氨基酸序列进化树分析可以将其分为四个特定的组:单纯疱疹病毒组,水痘疱疹病毒组,类马立克氏病病毒组,传染性喉气管炎病毒组,推测α疱疹病毒的gE基因在进化上可能起源于ILTV的gE基因的或其前体基因。而且gE基因的进化趋势与其宿主的进化情况一致。 相似文献
439.
选择素家族(selectin fam ily)是近年来发现的细胞黏附分子中的一个家族,该家族中有L-选择素、E-选择素和P-选择素3个成员。其中L-选择素(L-selectin,又名CD62L)是一种典型的单链跨膜糖蛋白,在促进白细胞与内皮细胞黏附、介导白细胞内信号转导和激活,以及引起炎症反应中淋巴细胞向炎性组织渗出的过程中起重要作用。在感染及炎症反应过程中,炎症介质首先活化血管内皮细胞,使其表达黏附分子相应的配体,即血流中的白细胞(中性粒细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞及单核细胞)通过表面表达的L-selectin与其相应内皮细胞配体结合,使随机运动的白细… 相似文献
440.
猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)和长颈广鹿瘟病毒(Giraffe pestvirus)为黄病毒科瘟病毒属成员,其病毒结构、抗原性和遗传特性密切相关。CSFV囊膜结构(糖)蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。囊膜结构(糖)蛋白Erns/E0(gp48)具有RNA酶活性,在病毒增殖及中和病毒感染中发挥重要作用,是诱导机体产生保护性免疫应答的第二抗原蛋白。E2和Ens与细胞表面受体的相互作用介导CSFV对细胞的感染过程。本文综述CSFV囊膜结构(糖)蛋白Erns和E2的生物学特性研究进展。 相似文献