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不同处理玉米的有机物质瘤胃降解率及小肠消化率的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
用3头带瘤胃瘘管的杂种肉牛测定玉米、无机保护剂处理玉米、有机保护剂处理玉米、10%和30%鲜血处理玉米有机物质(OM)和非蛋白质有机物质(NPOM)的瘤胃动态降解率,OM分别为53.03%,43.91%,53.57%,35.73%和38.85%,NPOM分别为53.67%,48.06%,55.72%,39.24%和44.48%。用酶解法(牛小肠液冻干粉(BIF))测得玉米、无机保护剂处理玉米、有机保护剂处理玉米、10%和30%鲜血处理玉米12小时瘤胃非降解OM的消化率分别为74.39%,76.26%,75.54%,77.88%和77.43%,NPOM分别为63.92%,64.78%,64.43%,67.78%和65.00%。 相似文献
72.
西尼罗病毒病及其病原的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
概述了西尼罗病毒病在国外的流行状况、危害及我国的研究现状,着重阐述了近年来在其基础病毒学、诊断技术、疫苗及防治方面的研究进展,为该病的深入研究提供了参考。 相似文献
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【目的】 研究牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E0和E2串联基因重组腺病毒作为基因工程疫苗的应用潜力。【方法】 采用PCR扩增、E0-E2基因融合并构建重组穿梭质粒pDC316-E0-E2,将其与AdMax腺病毒系统的骨架质粒共转染HEK293T细胞包装成重组腺病毒,通过Western blotting进行验证,并通过Reed-Muench法测定病毒滴度,通过肌内、皮下免疫接种小鼠后用ELISA方法及流式细胞检测进行免疫效果试验。【结果】 成功扩增到E0、E2基因目的片段,大小分别为681和1 122 bp,得到了完整的腺病毒Ad5-E0-E2;测定其滴度为1.1×1010 PFU/mL;Western blotting检测结果显示,Ad5-E0-E2外源基因在HEK293T细胞中表达,得到了与预期相符的目的条带(65 ku);ELISA检测结果表明,通过肌内和皮下注射Ad5-E0-E2均能产生较高的抗体水平;流式细胞检测显示首免、二免后肌内和皮下注射Ad5-E0-E2组CD4+、CD4+/CD8+比值均极显著高于PBS对照组(P<0.01)。【结论】 本试验成功构建重组腺病毒Ad5-E0-E2,且具有较好的反应原性和免疫原性,能诱导机体产生针对BVDV的特异性抗体。 相似文献
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【目的】利用原核表达系统体外表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)NS5A基因,获得非结构蛋白NS5A,对其进行核苷酸、氨基酸序列分析,以解析BVDV非结构蛋白NS5A的功能。【方法】参考BVDV-1型毒株V006的NS5A基因序列(GenBank登录号:KX170647)设计并合成1对特异性引物,以分离到的牦牛BVDV GSTZ毒株cDNA为模板,PCR扩增NS5A基因片段,并克隆至表达载体pET-28a (+)中,构建重组原核表达载体pET28a-NS5A。经酶切初步鉴定及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,然后利用IPTG诱导表达。经10% SDS-PAGE电泳及Western blotting分析鉴定重组蛋白的表达,并根据NS5A基因的序列构建遗传发育进化树,利用DNAStar软件预测NS5A蛋白的亲水性、表面可塑性和抗原性等特性,并结合二级结构的预测对NS5A蛋白的B细胞抗原表位进行预测。【结果】PCR扩增NS5A目的基因片段为1 488 bp,双酶切和测序鉴定结果证明,重组质粒pET28a-NS5A构建成功。经10% SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定重组蛋白,表达出了大小为55 ku的目的蛋白,大小与预期结果相符。通过对不同BVDV毒株NS5A基因序列构建遗传发育进化树,显示GSTZ毒株NS5A在遗传进化特征上属于BVDV-1型。NS5A蛋白的亲水性主要位于12—21、32—69、75—113、120—135、143—147、152—163、165—180、215—230、265—274、296—340、348—378、389—447、455—463、469—495位氨基酸处,表面可塑性主要位于14—18、37—42、76—81、86—109、154—160、169—178、218—228、297—309、348—358、365—373、414—442、430—437、454—460位氨基酸处,柔性区域较多,主要位于14—21、37—43、67—82、86—93、97—110、152—158、169—179、218—231、240—255、296—310、313—328、344—359、364—373、413—422和472—483位氨基酸处。NS5A蛋白的B细胞抗原表位主要位于15—18、76—81、154—158、169—178、218—228、297—309、348—358、365—373和414—422位氨基酸处。【结论】成功表达并鉴定了牦牛源BVDV的非结构蛋白NS5A,系统发育进化树表明BVDV GSTZ株基因型属于BVDV-1型,NS5A蛋白具有良好的抗原性,为深入解析BVDV非结构蛋白NS5A的自身结构功能、免疫学特性以及进一步研究非结构蛋白对病毒复制的影响提供参考。 相似文献
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《Veterinary microbiology》2015,175(2-4):319-324
The bacteria present in the uterus during pyometra have previously been studied using bacteriological culturing. These studies identified Fusobacterium necrophorum and Trueperella pyogenes as the major contributors to the pathogenesis of pyometra. However, an increasing number of culture-independent studies have demonstrated that the bacterial diversity in most environments is underestimated in culture-based studies. Consequently, fastidious pyometra-associated pathogens may have been overlooked. Therefore, the primary purpose of this study was to investigate the diversity of bacteria in the uterus of cows with pyometra by using culture-independent 16S rRNA PCR combined with next generation sequencing.We investigated the microbial composition in the uterus of 21 cows with pyometra, which were obtained from a Danish slaughterhouse. Similar to the observations from the culture studies, Fusobacteriaceae, the family that F. necrophorum belongs to, was the operational taxonomic unit (OTU) observed in the largest quantities. By contrast, the Actinomycetaceae family, which includes T. pyogenes, constituted only 1% of the total number of reads. Thus we cannot confirm the previously reported role of species from this family in the pathogenesis of pyometra. Finally, we identified a large number of sequences representing three families of Gram-negative bacteria in the pyometra samples: Porphyromonadaceae, Mycoplasmataceae, and Pasteurellaceae. It is likely that these families comprise potential pathogenic species of a fastidious nature, which have been overlooked in previous studies. Our results increase the knowledge of the complexity of the pyometra microbiota and suggest that pathogens in addition to F. necrophorum may be involved in the pathogenesis of pyometra. 相似文献
79.
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