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11.
鸡传染性法氏囊病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用 总被引:3,自引:0,他引:3
采用vero细胞增殖的IBDV抗原建立了间接ELISA,用于定量检测IBDV抗体。对该方法进行了标准化研究,确立了该方法的最佳工作条件。在此基础上研制了相应的诊断试剂盒,并对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品的比较、保存期等进行了全面、详细的研究。结果表明,研制的试剂盒在-20℃保存至6个月时各项性能都很好。该试剂盒与进口试刺盒对同样血清样品检测,符合率为86.7%。间接ELISA试剂盒与琼扩试验的符合率为92,5%。该试刺盒可对大量血清样品进行检测,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、快速,更适合于大型鸡场IBD免疫抗体水平的监测及现地疫病诊断等需要。 相似文献
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14.
马传贫驴白细胞弱毒疫苗株跨膜蛋白主要免疫决定区基因的克隆与表达 总被引:3,自引:0,他引:3
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的,其氨基端带有6个组氨酸的标签,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。 相似文献
15.
SMD残留检测的ELISA方法的建立和初步应用 总被引:12,自引:0,他引:12
用戊二醛法将SMD与载体蛋白BSA偶联 ,制备合成抗原SMD BSA作免疫原 ,同法合成包被抗原SMD OVA ,免疫健康家兔获得抗血清。分别用双向琼脂扩散试验和ELISA试验对抗血清进行定性定量测定 ,结果表明所获抗血清特异性针对SMD。用所制备的抗血清建立间接竞争ELISA方法。优化了ELISA的工作条件 ,方阵测定确定了包被抗原最佳浓度 (50 μg/mL) ,抗血清最佳稀释度 (1∶1 0 0 ) ,酶标抗体的最适工作稀释度 (1∶50 0 ) ,并建立了ELISA标准工作曲线。工作曲线表明在 1 0~ 2 0 0 0 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。该法检测底限为 63μg/L,低于国际规定残留限量 (1 0 0 μg/kg)和国内规定残留限量 (30 0 μg/kg)的要求。本法同时测定了回收率以及实际样品血清中的SMD的残留含量 相似文献
16.
从某疫区的鸡腺胃病鸡群中分离到H_(95)毒株,在SPF鸡胚稳定传至15代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID_(50)=5×10(-5.5)/ml。用病料和鸡胚尿囊液毒分别感染试验鸡,均引起与自然病例相同的典型病理变化。病料和H_(95)鸡胚尿囊毒提纯的病毒液经负染后电镜观察,均具有典型冠状病毒形态。病毒液经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能破相应的抗体所抑制。采用率抗、多抗介导的间接ELISA和血凝抑制试验交叉反应表明,H_(95)株与IBV行密切的血清学关系。用反转录聚合酶链反应获得了H_(95)毒株的免疫原(S_1)基因,经southern转印和IBV的S探针检测均呈阳性。结果表明,从腺胃病变型鸡群分离的H_(95)毒株属冠状病毒科IBV成员 相似文献
17.
本文应用酶免疫试验(ELISA)、反向间接血凝试验(RIHA)和中和试验(NT)三种方法对6份疑似HBV感染的待测血清进行测定,借此探讨ELISA检测中出现假阴性现象,认为假阴性是由检测前滞现象引起。 相似文献
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应用ELISA双抗体夹心法检测传染性法氏囊病免疫器官病毒抗原… 总被引:2,自引:0,他引:2
利用IBDV高免血清IgG作为包被抗体,成功地建立了双抗体夹心法ELISA,对人工感染雏鸡免疫器官抗原动态分布进行了检测。结果表明,不同毒株感染雏鸡免疫器官病毒抗原含量不一致,持续时间也有差异。采用本方法共检测IBD阳性样品275份,检出率为100%,检测对照阴性样品25份,结果均为阴性,比AGP法检测率高40%左右,灵敏度高100 ̄200倍。试验证明双抗体夹心法ELISA可用于组织抗原分布的检测 相似文献
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