非洲猪瘟病毒实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法的建立

非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术（RPA）,针对ASFV B646L （p72）基因设计了3组引物和探针,并进行筛选、反应条件优化、灵敏性、特异性和重复性试验,建立了实时荧光RPA方法。结果显示,该方法在39℃、20 min内即可检测10个拷贝的DNA分子,且与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒均无交叉反应,检测5.5×10⁶至5.5×10⁰拷贝/μL共7个稀释度样品在各时间点的荧光强度,变异系数范围在0.38%~28.30%。该等温、快速扩增方法可用于ASFV的定性检测,为中国ASFV感染的早期诊断提供技术支持,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义。     

工业铂电阻测量结果的不确定度评定

本文分别从二等标准铂电阻温度计的分度传递引入的标准不确定度、标准铂电阻温度计不稳定引入的标准不确定度、电测设备引入的标准不确定度、冰点槽和油槽不均匀温场引入的标准不确定度、测量重复性引入的标准不确定度分析评定了工业铂电阻测量结果的不确定度。     

苹果属植物RAPD分析的影响因素及其稳定性研究

以富士苹果和山定子为试材对苹果属植物ＲＡＰＤ分析的最佳反应条件及其可重复性等进行了研究,结果表明,ＲＡＰＤ反应的的各个条件因子,包括模板ＤＮＡ浓度,引物浓度ｄＮＴＰ浓度,ＤＮＡ聚合酶的种类和浓度ＰＣＲ扩增循环数以及反应总体等都对ＲＡＰＤ结果有影响,都有其最适用量范围,各因子在低子最适值时会导致扩增带数的减少甚至无带,高于最适值则无出现带的弥散或缺失,苹果属植物ＲＡＰＤ分析最适反应条件为３５～５０μ     

全自动脂肪酸值测定仪在稻谷和玉米脂肪酸值测定中的应用

针对脂肪酸值快速批量检测的需要,新开发了全自动脂肪酸值测定仪,采用该仪器测定粮食脂肪酸值,与现行国标方法进行比较,测试该仪器和仪器方法的准确度、重复性、台间差等技术参数。同时比较仪器法和国标法的测定效率。实验结果表明:仪器方法和国标方法测定结果的标准偏差不存在显著性差异;仪器的重复性标准差不超过国标方法中给定的标准差;稻谷回收率在98.7%～106.1%之间,玉米回收率在103.7%～106.3%之间,理论添加脂肪酸值与测定仪实测值之间有较好的相关性,线性相关系数r=0.9997,具有较宽的测量范围;3台仪器测定结果之间不存在显著性差异,符合稻谷、玉米样品储存品质检测要求。同时仪器法还减少了检验人员测定全过程的工作量,降低了检测任务对人员的技能要求。     

食用植物油氧化稳定性测定不确定度评定

按照国家标准GB/T21121-2007方法中规定对动植物油脂氧化稳定性进行测定,对涉及的称样量和仪器设备进行不确定度来源分析和评定.结果表明:本实验方法测量不确定度的主要来源为4个方面,按引入不确定度分量贡献大小排序,依次为样品重复性测量、仪器温度、电导率及样品质量称量.当食用植物油氧化稳定值为12 h时,扩展不确定度为0.4 h(k=2).     

仿生消化法测定猪饲料原料还原糖释放量的重复性和可加性研究

本试验旨在建立单胃动物仿生消化系统模拟猪饲料原料消化后还原糖释放量的测定方法,为饲料养分生物学效价的评估提供参考。还原糖释放量与上样量的线性关系研究以玉米-豆粕混合物(75%玉米+25%豆粕)为研究对象,上样量设0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 g 5个处理,每个处理4个重复,每个重复1根消化管;方法的重复性检验以玉米-豆粕混合物、大麦、花生粕和米糠为研究对象,每个样品设3个批次,每个批次4个重复;方法的可加性检验设19个处理,其中处理1~7分别为玉米、大麦、高粱、大豆粕、花生粕、棉籽粕和米糠,处理8~19为2种或2种以上饲料原料按不同比例组合制备的12种混合饲料,每个处理4个重复,每个重复1根消化管,在仿生消化系统中模拟猪消化后测定各处理的还原糖释放量。结果表明:上样量在0.2~0.8 g时,还原糖总释放量与上样量呈显著的线性关系(R2=0.999 2),还原糖相对释放量在559.56~582.70 mg/g DM变化,变异系数为1.66%,而上样量为1.0 g时,还原糖相对释放量比上样量为0.2~0.8 g时的平均值下降5.37%;3个批次的大麦、花生粕、米糠和玉米-豆粕混合物的还原糖释放量的批内变异系数、批间变异系数和总变异系数均不大于1.68%,批间最大相对偏差分别为0.68%、1.50%、1.39%和0.29%;12种混合饲料还原糖释放量的实测值显著高于计算值(P0.05),而还原糖释放量的计算值与实测值的线性回归模型与y=x相重合(截距P=0.480 5;斜率P=0.514 1)。由此得出,当上样量在0.2~0.8 g时,上样量与还原糖释放量呈显著线性关系;仿生消化法测定猪饲料原料还原糖释放量的重复性和可加性满足定量分析的基本要求。     

对当前兽药业发展的若干思考

1.兽药GMP重复性建设亟待科学引导 自从国家强制要求兽药企业实施GMP认证以来,国内兽药业掀起了一股GMP建设的热潮,随着进程的深入,兽药产品生产线低水平重复建设的问题渐渐显露,     

硒剂中亚硒酸钠含量的测定

在饲料生产中通常使用的有效含量为１％的亚硒酸钠（Na２SeO３）预混剂，其中载体为石粉、蛭石、硅藻土等。我国目前已有饲料级亚硒酸钠的行业标准（NY４７－８７），但对１％亚硒酸钠预混剂却没有颁布标准，直接套用NY４７－８７方法，由于载体基质干扰及含量较低，导致终点不易观察，测定结果不准确；荧光法测定，受仪器、设备、条件等限制，不易推广。本人总结经验，从对样品的分析、加标回收率等进行试验，取得较为满意结果。１试验原理及方法１．１原理在强酸介质中，亚硒酸钠与碘化钾发生氧化还原反应生成游离碘，用硫代硫酸钠滴定…     

猴痘病毒PCR检测试剂盒的研制及应用

将建立的猴痘PCR和荧光PCR检测方法构建成试剂盒,并对其重复性、保存期、冻融次数等性能进行了检测。结果显示:试剂盒在-20℃条件下放置6个月,在4℃和室温下放置96 h,反复冻融10次后仍能扩增出特异性条带或典型的"S"型曲线。表明其具有较好的稳定性和重复性。对从江苏等地采集的343份猴等动物咽喉拭子样本进行检测,结果均为阴性,首次用技术手段证实了我国为猴痘非疫区。     

应用等电聚焦电泳测定玉米种子的纯度

应用灵敏度、分辨率和重复性均较高的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)电泳测定150多种玉米自交系和90多种玉米杂交种的胚及幼芽的酯酶(EST)同工酶，通过对酶谱的比较和遗传分析，发现它们的酶谱各有特点，而且相互间又有很显著的差异，这些差异正是它们基因型差异的反映。因此，酶谱的特点及差异为玉米自交系和玉米杂交种种子纯度的鉴定从遗传和生化角度提供了科学依据。