多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒

根据猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原体的基因保守序列，分别设计了与CSFV的E2基因、PPV的VP2基因和PRV的gⅡ基因序列互补的3对引物。用这3对引物对人为混合的样品中的PPV和PRV的DNA模板及CSFV反转录后的cDNA模板进行多重PCR扩增和多重PCR反应奈件的优化，结果同时得到3务与试验设计相符的288bp(CSFV)、575bp(PPV)700bp(PRV)特异性条带；敏感性检测结果表明，该多重PCR可以检测到14．5ng／L的CSFV、27．1pg／L的PPV、31．4ng／L的PRV的核酸模板。     

狂犬病病毒SRV9克隆株核蛋白基因的克隆、表达与特性分析

根据已发表的狂犬病病毒核蛋白基因序列，设计并合成了一对引物，从SAD株驯化的SRV9。蚀斑株中提取病毒RNA，通过RT-PCR扩增出核蛋白的全长cDNA序列，测序结果显示，其序列与国外报道的SAD母源株序列一致。将核蛋白的cDNA克隆至原核表达载体pET-28b( )中，转化大肠杆菌BL21（DE3）plyss，于30℃1mmol/LIPTG条件下诱导表达，大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE分析，在分子量约为56kDa处出现一新的蛋白带。和预期的目的蛋白分子量相符，Western-blotting检测表明，表达产物能与狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应，出现单一反应带，扫描分析显示，表达产物占菌体总蛋白的23%，包涵体分离，纯化后，纯度达89%，上述结果为核蛋白在狂犬病基因免疫和免疫检测中的进一步应用奠定了基础。     

三种PCR方法诊断猪伪狂犬病的比较研究

针对伪狂犬病毒gD基因的不同片段设计三对引物，分别进行PCR扩增用于猪伪狂犬病的诊断，扩增的三个片段的长度分别为262bp、217pb以及1203bp的全基因。通过比较发现，这三种PCB诊断方法均具有很高的特异性和敏感性，值扩增gD基因内部262bp的PCR诊断方法种具有突出优点，其退火与延伸合成一步，其操作可于1h内完成，敏感性更高，更适于猪伪狂犬病的快速诊断。     

应用多重PCR检测人工感染鸡呼吸道疾病的研究

本文报道了IBV，NDV，ILTV，MG人工感染4周龄SPF鸡和非免疫鸡后，用多重PCR检测试验鸡的咽喉棉拭子和器官组织样品，并与传统的病原分离鉴定，血清学方法进行比较，多重PCR无论是对单一感染病原，还是对两种以上混合感染病原，其敏感性和检测速度都优于传统的鉴别诊断方法，具有较高的实用价值，可以直接应用于临床检测，服务于生产。     

进口肉骨粉及动物饲料中牛源性成分的PCR—微孔板杂交检测方法

疯牛病（Mad－Cow Disease）即牛海绵状脑病（Bovine Spongiform Encephalopathy，BSE），已被证实与人的克雅氏病（Creutzfeldt Jakob Disease,CJD）有直接关联。人如果食用感染了疯牛病病原的牛肉，就会患上克雅氏病，造成永久性的脑部损伤，脑组织形成海绵状空洞，导致精神错乱、痴呆，最终死亡。已经报道发现疯牛病的国家有英国、爱尔兰、意大利、葡萄牙、瑞士、法国、西班牙、德国和比利时等，疯牛病已经成为当今世界食品安全的重大威胁。到目前为止，尚未发现疯牛病的病原。肉骨粉是牲畜屠宰后其毛纤维、皮革、角质、骨骼、脏…     

相信纳米863相信高科技

三年前，我承包了村里的2公顷土地，地面条件好，水、电、房齐全，而且土壤肥沃。为了早日走上致富路，我经常从各类科技书籍上寻找新品种和高科技产品，《农业知识》成为了我的良师益友。自从看了《农业知识》中关于“强的纳米863生物助长器”（以下简称纳米863）的报道，我有点心动，真有这么好的产品吗？     

纳米863起了大作用

我从邮局取回“强的纳米863生物助长器”时，挨着我家地块的别人家的玉米都种上七八天了。中午，我就把纳米863放人大水缸里处理水，2小时后，用处理的水拌种，阴干后，下午就开始播种。作物种子是“玉米农大108”，结果用纳米863处理的水浸泡的种子出苗比别人家的只晚出一天，而且出苗后叶片黑绿粗壮。     

用上活水器 健康没问题

我是《农业知识》杂志的忠实读者，在每期杂志中都能看到关于强的纳米产品的介绍，后来的中央电视台二套、七套等节目中也看到过强的纳米产品的相关报道，凭着多年来对《农业知识》的信任。     

从稻壳中提取纳米二氧化硅技术获专利

吉林大学化学学院(邮编:130012,电话:0431-8499134)王子忱教授发明的“一种从稻壳制备高纯纳米二氧化硅的方法”,前不久获得了国家专利(专利号为Z L03133335.4)。他利用稻壳中富含硅的特性,通过剔除无机物、纤维和杂质以及燃烧去掉碳成分等方式,从稻壳中提取出了二氧化硅,其含量占稻壳的1/5左右。这个过程中没有废料产生,所有的稻壳都被充分利用,而且在除碳的过程中可以通过一定的程序将碳也保留下来,成为活性炭的原料。矿石加工出的二氧化硅多是微米二氧化硅,而稻壳加工出的则是纳米二氧化硅,分子体积是微米的1%,因此它的强度和透明度都较…     

PCR技术在禽病诊断中应用的研究进展

聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR),又称体外基因扩增技术,是80年代中期由Mullis.发明的一种新的分子生物学技术,与传统的检测方法如生物化学、细菌学、病毒学和血清学方法等相比较,PCR方法具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点,而且应用广泛。在病原方面,它既可作病原体的检测,也可同时进行不同病原或同一病原不同株的检测。特别适合难以培养的病毒和细菌的检测。经过近20年的发展,目前已开发出多种PCR技术,以适应不同试验需要,现综述PCR技术在禽病诊断中的应用。1PCR原理PCR是由三个基本反应组成的反复循…