兽医外科手术学课程中学生无菌观念培养的几点体会

兽医外科手术学课程中的手术基本操作技术是动物医学专业学生必须掌握的基本技能。课程的特点决定了实践教学是兽医外科手术学课程教学的重要组成部分,是培养学生基本技能和技能综合运用的重要环节。然而,其教学目的不是学会某种或某几种手术的具体做法,而是掌握兽医外科手术学的基础理论、基本操作,其中无菌观念的培养是兽医外科手术学教学的核心内容之一。     

濒危兰科植物独蒜兰的快繁技术研究

对独蒜兰的离体快速繁殖技术进行了研究。以独蒜兰种子及种子萌发的无菌苗的原球茎、叶片为外植体,诱导产生无菌苗。结果表明：独蒜兰种胚萌发最适培养基为1/2MS+6- BA（0.1 mg/l）+ NAA（1.0 mg/l）+活性炭2 g/l,6- BA、KT有抑制衰老的作用,能促进独蒜兰原球茎直接分化成苗。组培苗的原球茎经切割后在诱导培养基上培养,可产生增殖分化,形成丛芽。原球茎诱导的最适培养基为1/2MS+6-BA （5.0 mg/l）+ NAA（0.2 mg/l）,增值倍数为2.71。以叶片为外植体,未获得组培苗。在独蒜兰组培快繁研究中,以种子为外植体生产组培苗是最好的方法。     

崖柏组织培养初探

以崖柏茎段为外植体,MS为基本培养基,探讨0.1%升汞不同消毒时间对外植体消毒效果;不同盐浓度的培养基对外植体生长的影响。结果表明:0.1%升汞消毒12 min污染率最低,杀伤率低,表面灭菌效果最好;1/2MS培养基上培养愈伤组织长势效果最好。     

文冠果组织培养无菌体系的建立

为建立文冠果茎段离体培养的最佳无菌体系,以文冠果优系4号当年萌发的茎段为外植体,研究消毒试剂、不同取材时间对无菌体系建立的影响。结果表明:经过75%酒精20 s消毒2次,0. 1%HgCl2消毒9 min,处植体污染率降低至54. 4%; 6-7月份取材污染率低,萌发率高且腋芽生长健壮。     

白花兜兰种子无菌萌发及试管成苗技术研究

本研究以白花兜兰种子为外植体,探讨不同添加物培养基对种子胚萌发的诱导、外源激素对继代增殖、生根培养的影响,并进行移栽试验。结果表明:有机添加物椰乳对原球茎的诱导有较好的促进作用;1/2MS+6-BA1.0+NAAA0.05对芽的诱导和增殖起明显的促进作用;1/2MS+IBA0.2 mg·L-1对白花兜兰的壮苗生根起关键性作用因素;碎树皮为栽培基质的移栽成活率达96%。     

朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

以朱顶红（Hippeastrum vittatum）叶片为外植体进行离体培养，具有取材方便、试材充足、成本低等优势，但叶片诱导再生率极低，是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体，探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响。结果表明：最佳外植体为 MS 培养基中培养 10 d 形成的幼嫩叶片基部（0.5 cm），在光照 16 h · d-1（光照强度 36 μmol · m-2 · s-1）下，不定芽诱导的最适培养基为 MS + 2 mg · L-1 6-BA + 1 mg · L-1 NAA + 2 mg · L-1 TDZ，两个品种的不定芽均以间接途径发生，其中‘花孔雀’在培养 40 d 后形成愈伤组织，55 d形成不定芽，诱导率可达 69.44%；‘黑天鹅’在培养 45 d 后形成愈伤组织，65 d 形成不定芽，诱导率达到 66.67%；最适体细胞胚诱导培养基为 MS + 2 mg · L-1 6-BA + 1 mg · L-1 PIC，‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到 66.67%和 63.89%；最佳不定芽增殖培养基为 MS + 2 mg · L-1 6-BA + 1 mg · L-1 NAA + 1 mg · L-1 TDZ，‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到 4.67 和 3.46；在不添加植物生长调节剂的 MS培养基中进行生根培养，30 d 后两个品种的生根率均达到 100%；将生根培养 30 d 的小植株转移至室温条件下放置 3 d，摘去封口膜再驯化 3 d 后，移栽至经高温消毒的草炭︰蛭石（体积比）为 1︰1 的基质中，成活率达到 100%     

花魔芋种子无菌试管播种技术的研究

实验以花魔芋种子为材料,研究无菌播种诱导萌发试管苗技术,以获得无菌试管植株,并由此获得外植体,从而解决魔芋组织培养过程中污染率及褐变率高的问题。实验结果表明,播种于MS培养基中的魔芋种子经培养30 d即可获无菌幼苗,将无菌幼苗的叶柄、叶片接种于MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA培养基中培养,叶柄...     

小果型西瓜子叶节离体培养

为了进一步优化小果型西瓜组织培养技术,建立无菌体系流程,以小果型西瓜自交品系K1为试验材料,探索了小果型西瓜种子无菌萌发的条件及植物生长调节剂对子叶节再生不定芽的影响。结果表明,小果型西瓜种子最佳浸种及消毒灭菌方式为先用3%NaClO消毒20 min,无菌水浸种6 h,去除种皮,然后用70%酒精消毒60 s,再用3%NaClO消毒20 min,最后用无菌水清洗3次,每次1 min。在1/8 MS培养基上的萌发率最高,西瓜子叶节诱导不定芽的最佳培养基为MS培养基中附加BA 2.0 mg·L~(-1)、NAA 0.1 mg·L~(-1)。     

不同培养基对蝴蝶兰杂交种子无菌播种生长的影响

通过离体无菌播种试验,研究基本培养基及添加有机附加物对蝴蝶兰杂交种子萌发、分化、壮苗及生根的影响。结果表明,以1/3MS为基本培养基的蝴蝶兰杂交种子萌发效果较好,萌发率高,颗粒大,长势好;壮苗阶段则以1/2MS作为基本培养基的生长效果较好,苗壮,鲜重较重,叶子分化较快;以添加100 g/L马铃薯汁的培养基种子萌发效果最好;苗分化阶段,添加150 g/L马铃薯汁的培养基生长效果最好,不同杂交组合平均每瓶鲜重可达26.6 g。在壮苗阶段,以添加香蕉汁100 g/L+马铃薯汁150 g/L培养基的效果最好,表现为苗壮、根系多、鲜重增加多。