魔芋试管微球茎繁殖技术研究

针对目前魔芋生产存在种芋繁殖系数低的问题,研究可用于大规模生产魔芋试管微球茎的诱导技术。实验通过3种不同方法切割魔芋愈伤组织分化的幼苗,分别置入不同激素配比的4种培养基中培养。培养基MS 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L 蔗糖6%和MS 6-BA0.8mg/L NAA0.5mg/L 蔗糖6%适合愈伤组织的形成和不定芽的分化。培养基1/2MS NAA0.08mg/L 蔗糖6%和1/2MS BA0.8mg/L 蔗糖6%适合叶柄基部带愈伤组织的幼苗生根培养,其中1/2MS NAA0.08mg/L 蔗糖6%的培养基适合叶柄基部带少量愈伤组织的幼苗诱导微球茎,将形成的微球茎,从叶柄基部撇断,可看到微球茎上有芽点。通过研究发现魔芋试管微球茎的形成不仅与培养基的组成有关,还与叶柄基部的切割方式有关。     

金莲花种子无菌播种及离体培养技术

通过金莲花种子无菌播种、离体培养技术的研究,初步建立金莲花离体培养的技术体系和方法,为其种质资源的保护和利用提供前期的技术基础。以金莲花种子为外植体,筛选出适宜金莲花无菌播种发芽、离体培养的培养基配方。结果表明:金莲花种子用100 mg/L GA3冷浸4 d效果最佳,其发芽率为92.67%;用无毒级杀菌消毒剂爱力克配制成2 500 mg/L,与75%乙醇配合消毒20 min效果最佳;适宜金莲花种子无菌播种培养基配方为MS+0.1 mg/L TDZ+0.5 mg/L IBA;适宜金莲花试管苗丛生芽增殖的培养基配方为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+0.5 mg/L KT+0.5 mg/L IBA+100 mg/L PVP+40 mg/L维生素C;适宜金莲花试管苗壮苗生长的培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+40 mg/L维生素C+100 mg/L PVP+0.5%活性炭。     

异鳞苔草快速繁殖研究

以异鳞苔草种子为材料,用无菌培养的方式进行快速繁殖试验。结果表明,最适宜诱导种子萌发的培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;最适宜幼苗的继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;最适宜诱导生根的培养基为MS+NAA 0.2 mg/L。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

天竺葵组织培养快繁技术研究初探

选取美国进口饱满、无病害天竺葵种子为材料,进行无菌种子消毒,经2%次氯酸钠溶液消毒,接种于MS培养基,通过继代培养、生根培养等不同激素水平组合的培养基筛选,结果表明:天竺葵播种以MS培养基效果较好,继代培养以MS+0.1mg/L6-BA+0.2mg/LIAA培养基最佳;生根以1/2MS+0.2mg/LIBA培养基较好。     

百合杂交种子无菌播种育苗技术研究

为了研究适合于种子无菌播种的培养基。以卷丹×红旗士的杂交种子为材料,采用MS添加NAA 0.01~0.02 mg/L和6-BA 1.0~1.5 mg/L的4种培养基,研究了百合杂交种子无菌播种技术。在4种培养基中,培养基MS+NAA 0.01 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的种子发芽率最高,为63.3%,小鳞茎的分化率也最高,为83.3%,子叶和真叶生长较健壮,生长速度最快。其余3种培养基的发芽率分别为27.0%、32.9%、40.0%。培养基MS+NAA 0.01 mg/L+6-BA 1.0 mg/L为百合杂交种子无菌播种育苗的最适培养基,且不需另外的生根培养基。因此,该技术简化了试验过程,提高了培养效率。     

快速离体培养万寿菊植株叶片组织

取万寿菊植株生长状态的叶片组织作为外植体,无菌条件下接种于MS+1.2mg/L 6-BA+0.9mg/LNAA的培养基中培养7d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗切割分离接种于MS+0.6mg/L6-BA+1.0mg/LNAA培养基中进行无菌培养,5d后,芽苗周围诱导出万寿菊幼苗;将万寿菊幼苗转接入含植物激素0.5mg/L NAA的MS培养基中,培养6d后,幼苗诱导生根,形成完整的万寿菊组织培养植株。     

水田七的组织培养和植株再生

用水田七成熟种子为材料进行无菌播种,得到无菌苗再用幼叶、叶柄为材料进行组织培养和植株再生。经试验得出各阶段适宜的培养基分别为:(1)诱导愈伤组织:MS+2.0 mg/L TDZ;(2)诱导芽分化:MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;(3)生根培养:1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

帝王花种子无菌播种和快速繁殖研究

[目的]建立帝王花无菌播种和快速繁殖技术体系。[方法]以MS或1/2MS为基础培养基,添加不同激素组合,筛选适宜的诱导、增殖及生根培养基。[结果]1/2MS+6-BA 0.01mg/L为帝王花种子最佳诱导培养基,培养14 d种子萌动,35 d形成幼苗;MS+6-BA 1.00 mg/L+IBA 0.01mg/L为最适宜的增殖培养基,增殖倍数达2.83倍;1/2MS+IAA 1.00 mg/L为最佳生根培养基,生根率达96%,苗高达4.2 cm;将种苗栽植于泥炭∶珍珠岩=3∶1的基质上,其移栽成活率为85%。[结论]该研究为快速繁殖帝王花优质种苗奠定了基础。     

格力兜兰的无菌播种与组培快繁研究

[目的]研究格力兜兰的无菌播种与组培快繁,探讨其最佳培养条件,以期能够商品化生产格力兜兰,实现其资源保护和可持续利用。[方法]以人工授粉的种子为外植体,进行无菌播种试验,并对其进行幼苗形态键成和生根壮苗条件研究。[结果]210 d胚龄的种子萌发率高;种子萌发最佳培养基为1/2 RE+NAA 0.5 mg/L+BA 0.2 mg/L+CM 50 ml/L+CH 1 g/L,壮苗培养基为MS+NAA 1.0mg/L+BA 0.2 mg/L+活性碳0.6 mg/L+香蕉泥50 g/L。[结论]该研究实现了格力兜兰的快速繁殖,提高了其繁殖系数,能够进行商品化育苗。     

玉米植株生长叶片组织的离体培养研究

以玉米植株生长叶片组织作为外植体,无菌条件下接种于MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基,培养8d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗接种于MS+0.5mg/L6-BA+0.8mg/LNAA培养基,培养7d,芽苗周围诱导出玉米幼苗;将玉米幼苗转接入含0.8mg/LNAA的MS培养基中,培养8d,幼苗诱导生根,形成完整的玉米组织培养植株。     

小黄花石斛的无菌播种与快速繁殖

为保护与利用小黄花石斛野生资源,采用种子无菌播种、试验不同培养基、不同激素配比以及添加天然有机复合物等方法,探究小黄花石斛的组培快繁技术。研究结果表明:小黄花石斛种子在1/2 MS培养基上培养10 d后形成原球茎团,萌发率超过80%,再培养30 d后出芽整齐;单芽转接到MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2mg/L+土豆粉100 g/L培养基上培养60 d后形成丛生芽,增殖系数达到8.58;幼苗转接到MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L+香蕉粉100 g/L+CA 1.0 g/L培养基上培养80 d后可形成完整植株,小苗移栽60 d后,成活率达到71.45%。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

中华石蝴蝶组织培养及试管开花诱导

以中华石蝴蝶(Petrocosmea sinensis Oliv.)的幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,研究植物生长调节剂多因素组合对中华石蝴蝶继代增殖和生根培养的影响,并诱导获得的无菌苗在试管中开花。结果显示,不同的生长调节剂配比对中华石蝴蝶继代培养和生根培养的影响不同,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L IAA利于芽继代增殖,MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭适于诱导生根获得再生植株,MS+0.2 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA利于试管苗开花,持续继代可抑制中华石蝴蝶的试管开花。     

野生鼓槌石斛的有性扩繁方法

[目的]采集野生鼓槌石斛的成熟蒴果,利用组培无菌快繁技术获得大量野生鼓槌石斛种苗。[方法]将野生鼓槌石斛成熟蒴果消毒灭菌,并将其种子播种于MS培养基上获得大量原球茎,然后分别转接到不同的培养基上,最后在不同阶段的培养基上筛选出适合野生鼓槌石斛分化和生长的培养基。[结果]将野生鼓槌种子在MS培养基上培养,种子萌发率达95%以上;最利于原球茎分化的培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+土豆泥4%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,成苗率高、出苗整齐;最适幼苗生长培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,小苗粗壮、叶片浓绿;最适生根壮苗培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+AC 0.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,瓶苗生根多而粗壮,叶片浓绿生长整齐。[结论]该研究为野生鼓槌石斛资源的收集与保存提供了参考。     

茶树无菌播种建立植株再生体系

为提高茶树的繁殖速率,用近成熟的茶树种子以无菌播种方式获得试管苗,再以其茎段为外植体,建立了茶树高效植株再生体系。结果表明,剥除内外种皮的茶树种子发芽率为90%,较保留种皮的完全种子增加了13个百分点;茶树种子胚龄与发芽势、发芽率呈正相关,与萌发时间呈负相关;诱导茶树种子萌发适宜培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+IBA 2.0mg/L+YE 200mg/L或改良ER+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2mg/L;在改良ER+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L继代增殖培养基中培养,带芽组织切块的适宜增殖周期为39d,增殖倍数5.4;壮苗、诱导根形成的适宜培养基为1/2改良ER+IBA 0.10mg/L,发根率达80%。     

甜樱桃砧木品种嫩茎段离体培养技术

以甜樱桃砧木品种"吉塞拉6号"春季萌发的半木质化新枝为外植体,经清洗消毒后切成1cm长茎段,接种于发生培养基上诱导萌发无菌芽,继而培育成无菌系。经过连续继代增殖和生根培养,培育成试管苗。将试管苗移入"泥炭+椰糠+珍珠岩"基质中进行炼苗,成活率达到了96%以上,培养二个月后移入塑料穴盘中,育成高质量的"穴盘苗"。研究表明发生培养基配方为1/2MS+3.0mg/L ZT+0.3mg/L IBA+2.0mg/L活性炭;增殖培养基配方为MS+1.0mg/L BA+0.1mg/L NAA为宜;生根培养基以1/2MS+0.3mg/L IBA。三个培养阶段的培养基配方及培养室光温调控、试管苗炼苗技术组成整个组织培养快繁技术体系,为甜樱桃嫁接育苗奠定了良好基础。     

利用组织培养成芋技术快速构建魔芋杂交品系的探索

魔芋杂交种子休眠期长和种芋繁殖慢等特性,一粒杂交种子衍生为一个品系至少需3~4年,选育周期长成为杂交育种的主要障碍。本研究选取曲靖花魔芋异株人工授粉约1个月左右的幼嫩杂交种子,诱导愈伤组织和不定芽,获得了试管微型芋。研究表明:剥去绿色的外层果皮及叠生木栓组织后具有活性的杂交种子(块茎原始体)是诱导愈伤组织的最佳外植体;适宜诱导愈伤组织培养基是MS+6BA 1.5 mg/L+NAA 0.4 mg/L+白糖3.0%,诱导率达100%;适宜诱导不定芽培养基是MS+6BA 0.8 mg/L+NAA 0.4 mg/L+白糖3.0%,分化率达63%;适宜诱导试管微型芋培养基是1/2MS+NAA 1.0 mg/L+PP3330.4 mg/L+白糖5.0%,诱导率为93%,培养35 d左右,收获试管芋平均1~3 g。本研究对幼嫩杂交种子组织培养和试管微型芋的培养技术进行了初探,1年内即可构建单粒杂交种子衍生的品系,为品系比较和选择提供了材料,为加速魔芋杂交育种进程提供了一项关键技术。     

白芨组培快繁育苗技术研究

用白芨种子无菌播种,实生苗进行增殖、生根研究,结果表明:种子成熟度对种子的萌发影响较大,促进种子萌发的培养基为1/2MS+6-BA 1 mg/L;丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L,丛芽增殖系数可达2.88,生根培养基为1/2 MS+ NAA 0.5 mg/L+香蕉泥75 g/L.     

石橄榄种子无菌播种和快速繁殖研究

[目的]建立石橄榄种子无菌播种和快速繁殖技术体系。[方法]以MS为基础培养基,添加不同浓度6-BA、NAA、有机添加物,筛选适宜的诱导、增殖及壮苗生根培养基组合。[结果]以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+椰子汁50 mL/L为石橄榄种子最佳诱导培养基,14 d可见种子萌动,45 d可分化形成丛生幼苗;以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰子汁50 mL/L为最佳增殖培养基,其增殖倍数可达2.750倍,假鳞茎形成率达24.5%;以1/2MS+NAA 0.1 mg/L+AC 1 g/L为最佳壮苗生根培养基,苗高可达3.82 cm,根数1.9条。[结论]该研究为石橄榄野生种质资源保护、快速繁育优质种苗奠定了基础。