绵羊卵泡发育过程中关键信号通路研究进展

卵泡从原始卵泡发育为成熟卵泡，直至排卵、黄体发育等过程都受到精密的调控，产生大量的优势卵泡是绵羊产多羔及实现快速扩繁的关键因素。研究发现，相关信号通路和转录因子通过影响绵羊卵泡中卵母细胞、颗粒细胞的生长，进而调控卵泡的发育成熟，对这些信号通路进行深入了解，有助于探索卵泡发育的调控机制，早日实现绵羊高效繁育。Notch是卵泡发育过程中发挥重要作用的高度保守信号通路，PI3K/AKT/mTOR信号通路各成员都是广泛存在于细胞内的信号转导分子，在卵泡发育早期发挥了主要作用，还有间隙连接（gap junction，GJ）和跨带突触（transzonal projections，TZPs）等物理连接方式，在细胞间的交流通讯起到重要作用。作者详细介绍了Notch信号通路、PI3K/AKT/mTOR信号通路、间隙连接及跨带突触的结构功能在绵羊卵泡发育中的调控作用，为进一步探明绵羊卵泡发育的调控机制提供参考。     

激活素A和胰岛素样生长因子-I对冷冻保存后小鼠腔前卵泡体外培养的影响

为了探讨激活素A和胰岛素样生长因子-I对冷冻保存后小鼠腔前卵泡体外发育的影响,试验分别在培养液中加入激活素A和胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对小鼠腔前卵泡进行体外培养.结果表明:激活素A组和激活素A+IGF-I组的成活率显著高于未添加因子的冷冻对照组和IGF-I组(P<0.05);激活素A组、IGF-I组、激活素A...     

桂枝茯苓汤加味配合电针、西药治疗奶牛卵泡囊肿

卵泡囊肿是卵泡上皮变性，卵泡壁结缔组织增生变厚，卵细胞死亡；卵泡液未被吸收或者增多而形成的。此病常见于奶牛，多发生于第4～6胎产奶高峰期。近年来，笔者应用桂枝茯苓汤加味配合电针、西药的方法治疗奶牛卵泡囊肿11例，获得了较好的疗效，现报告如下。     

奶牛不孕的原因及防治

奶牛不孕症多年困扰着养牛户,也是大多养牛户经常遇到的难题,经过几年的理论与实践总结,笔者把造成奶牛不孕的原因及防治方法综述如下。1输卵管炎1.1主要病因在检查时触摸卵巢,损伤了输卵管;还有就是由于母牛运动不足,使输卵管脂肪沉着,障碍了精卵子通过而不孕。患此病的牛可以正常发情,     

奶牛卵泡囊肿穿刺疗法

卵泡囊肿是奶牛常见的繁殖疾病。本文主要介绍了针对大卵泡囊肿所采用的体外穿刺疗法的操作步骤和注意事项,以供同行参考。     

藏绵羊卵巢组织学及卵泡超微形态的观察

旨在通过观察藏绵羊卵泡、黄体的组织学特征及卵泡的超微形态,探讨其与生理功能的关系。本研究运用大体解剖、常规组织切片和H.E染色及透射电镜技术对藏绵羊卵巢卵泡和黄体的组织结构特点以及卵泡的超微形态进行观察和分析。结果发现,藏绵羊黄体期和卵泡期卵巢的宽度和厚度存在显著差异（P<0.05）,而重量和长度无显著差异（P>0.05）;卵巢上的大多数卵泡通过颗粒细胞萎缩和纤维化而闭锁;黄体中膜黄体细胞（直径22 μm）和颗粒黄体细胞（直径50 μm）结构特征明显且分界清晰,其内部分布着丰富的毛细血管;通过观察卵泡的超微形态发现,随着卵泡的发育,卵泡细胞的形状由椭圆形变为多边形,数量增多且被膜细胞包围;细胞器数量和种类也增多且之间联系紧密,胞质可见分泌的皮质颗粒。结果表明,藏绵羊卵泡系统和黄体的组织学特点以及卵泡的超微形态与其他绵、山羊类似,随着卵泡的发育,血管增生较快,卵泡结构特征变化明显和细胞器致密化程度增加且卵泡在不同时期均会闭锁;黄体内部在毛细血管滋生下使两种黄体细胞结构更加完整且特征明显,这可能是藏绵羊在高原低氧环境下仍然能够发挥卵巢机能的重要基础保障。     

NPFFR1基因对鹅卵泡颗粒细胞激素分泌和细胞凋亡的影响研究

神经相关肽受体（RFamide-related peptide receptor,NPFFR1）是促性腺激素抑制激素的主要亲和受体,它在调控动物繁殖方面起着重要作用。为了解NPFFR1对鹅卵巢卵泡发育的作用,本研究以42周龄健康产蛋四川白鹅为试验材料（n=9）,利用RT-qPCR法检测NPFFR1基因在等级前和等级卵泡颗粒细胞中的mRNA表达规律;在颗粒细胞中过表达NPFFR1基因,酶联免疫吸附法检测颗粒细胞上清液（n=9）中雌二醇（estradiol,E2）、孕酮（progesterone,P4）和抗缪勒管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）的浓度变化,剩余贴壁细胞作一步法TUNEL检测细胞凋亡情况;转录组测序方法筛选大黄卵泡（8~10 mm）颗粒细胞过表达NPFFR1前后表达差异显著基因,并对差异表达基因进行功能聚类分析。结果显示,除F1等级外,其余等级卵泡颗粒细胞NPFFR1表达量均极显著高于等级前卵泡（P<0.01）;过表达NPFFR1后,等级颗粒细胞上清液中的E2和等级前颗粒细胞上清液AMH的含量显著（P<0.05）降低,但孕酮P4含量变化不显著（P>0.05）;转录组测序共筛选到267个差异表达基因（119个下调,148个上调）,这些基因主要富集在生物节律过程、繁殖进程等生物学过程中;同时,与对照组相比,差异基因AMH显著下调表达（P<0.05）,Clock（clock circadian regulator）、FOS（proto-oncogene,AP-1 trans-cription factor subunit）、Per（period circadian regulator）和ANTXR2（cell adhesion molecule 2）分别极显著（P<0.01）或显著（P<0.05）上调表达。上述试验结果提示,NPFFR1可从激素、细胞凋亡和生物节律等多个环节影响卵泡颗粒细胞,参与调控卵泡的时序等级发育。     

水牛卵泡颗粒细胞对卵母细胞体外成熟的影响

为了系统研究颗粒细胞对水牛卵母细胞体外成熟的影响,使用颗粒细胞条件液处理或单层颗粒细胞和卵母细胞共培养的方法,探讨颗粒细胞共培养对水牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响。结果显示,添加颗粒细胞传代接种第2天收集的20%颗粒细胞条件液到水牛卵母细胞成熟液中能显著提高水牛卵母细胞体外成熟率和囊胚发育率(P<0.05);然而单层颗粒细胞却显著抑制水牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育(P<0.05)。结果表明,与单层颗粒细胞共培养相比,与颗粒细胞条件液共培养更有利于水牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育。本研究为水牛卵母细胞体外成熟培养体系的完善提供一定理论依据。     

Effect of Vitamin E on Bovine Granulosa Cells Apoptosis and Proliferation through Cx43

The aim of this study was to determine the effect of vitamin E on Cx43,the mechanism and function of vitamin E on bovine granulosa cells apoptosis and proliferation.In this study,granulosa cells were isolated from bovine ovary and cultivated in vitro by adding different concentration of vitamin E (0,25,50,100,200 and 500 μmol/L) for 24 h.After cultured,apoptotic cells were detected by FCM,mRNA expression levels of BCL2/BAX、P53 and Cx43 genes were determined by Real-time PCR and cell proliferation was detected by CCK8.The results showed that compared to control group,100 μmol/L vitamin E could significantly inhibit the apoptosis of granulosa cells (P<0.05).Real-time PCR detection results showed that vitamin E significantly changed the mRNA expression levels of BCL2/BAX,P53,Cx43 genes (P<0.05).Vitamin E could significantly improve granulosa cells proliferation when granulosa cells were treated for 24 and 36 h (P<0.05).The results provided a theoretical basis on further analysis for studing the influence mechanism of vitamin E on oocytes development and maturity,and improvement of female animal reproduction by influencing granulosa cells proliferation and apoptosis.     

卵泡刺激素受体基因作为产仔数候选基因的研究

分析了FSHR基因2个位点（FSHRA、FSHRB）的PCR－SSCP、PCR－RFLPs多态性，利用SAS软件分析了多态性与母猪产仔数间连锁关系。找到了1个影响产仔数的新的变异位点FSHRB，该位点多态性显著地影响猪产仔数性状，即基因型BB的产仔数显著地高于AB、AA基因型。结果显示出该位点具有作为常规选育的辅助选择的有效的分子标记潜力。