铜对生长猪肝中IGF—Ⅰ基因mRNA表达的影响

采用生长试验、免疫放射分析和定量PCR方法，观察了生长猪血液中类胰岛素生长因子（IGF—Ⅰ）及其结合蛋白（IGFBP3）数量的变化和IGF—Ⅰ基因在肝中表达量的变化。结果显示，每1kg饲料中添加125-250mg铜，能够上调IGF-Ⅰ基因的表达量，显著提高猪的平均日增重，促进生长猪循环血液中IGF—Ⅰ浓度的增加。试验结果证实，铜是通过促进生长激素一胰岛素样生长因子轴相关因子的合成和分泌来发挥促生长作用的。     

真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染

通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。     

硒蛋白的基因表达与调控

硒蛋白是微量元素硒以硒代半胱氯酸(SeC)形式进入多肽链的蛋白质。SeC的遗传密码是UGA。在原核细胞中,4种基因产物SELA、SELB、SELC和SELD参与了硒蛋白的合成过程。真核生物硒蛋白mRNA3’-UTR的硒代半胱氨酸插入序列(SECIS)是真核细胞UGA密码编码SeC的顺式作用元件。动物的硒营养状态不影响硒蛋白基因的转录,但影响硒蛋白mRNA的稳定性。饲料硒水平与含硒酶活性呈正相关。     

鸡白介素18基因原核表达质粒构建

根据已发表的江西土鸡白介素 -1 8(Ch IL-1 8) c DNA编码基因序列设计引物 ,用PCR技术从 p MDCh IL-1 8质粒扩增出编码鸡IL-1 8成熟蛋白基因 ,重组于 p BV2 2 0表达载体上 ,将重组质粒转化大肠杆菌 JM1 0 9(DE3 ) ,转化子经温度诱导的表达产物 ,SDS-PAGE电泳鉴定约 2万 ,N端开头 1 5个氨基酸序列测定分析 ,证明获得了鸡 IL-1 8成熟蛋白 ,为今后深入研究鸡 IL -1 8的生物学特性及其临床应用打下了基础     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

人血栓调节蛋白基因的表达及转基因小鼠的建立

用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白（hTM)基因，将其克隆到带有人EF－1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上，得到表达质粒pEF-TM。在转染pEF-TM的COS－1细胞中，hTM得到了瞬时表达，并且正确地定位到细胞膜上。用pEF-TM转染猪内皮细胞（PEC），经G418筛先得到稳定转染的克隆。凝血活性测定结果显示，表达hTM的PEC凝血时间明显延长，表明其抗凝血能力增强。通过显微注射方法，得到了1只F0代hTM转基因小鼠。Southern杂交结果表明，该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代。     

不同生态条件下小麦子粒中戊聚糖含量的研究

采用统一供种，统一试验方案，对河南省有代表性的生态地点的8个小麦品种的戊聚糖含量、蛋白质含量，吉粒重和产量进行了分析，初步认为生态因素是影响小麦子粒戊聚糖含量，蛋白质含是，千粒重和产量的重要因素，品种遗传因素对小麦品种的影响有着不可忽视的作用。综合戊聚糖含量、蛋白质含量产量来看，以豫麦34号为最好。     

Utilization of cassava peels as substrate for crude protein formation

Mash prepared from cassava peels was inoculated with eitherSacchromyces cerevisiae orCandida tropicalis and then left to ferment for 7 days. Chemical analysis of the fermented mash showed substantial increase in crude protein content and decrease in carbohydrate content of the mash. The results also revealed slight increases in the ash, fibre and lipid content of the fermented mash. It was further observed that, when the mash was supplemented with inorganic nitrogen sources (urea, ammonium sulfate or sodium nitrate) before commencement of fermentation, the amount of crude protein formed was almost doubled. This enhanced crude protein production was highest in the mash supplemented with urea. Temperature of 30 °C, pH of 5.5 and moisture concentration of 130% were found to be optimum for crude protein formation by the organisms growing on the mash.     

撒坝猪血液蛋白多态性研究

 采用蛋白电泳技术研究撒坝猪血液蛋白多态性。共分析了撒坝猪33个遗传位点,其中AKP,CAT,ES,G₆PD,PA,PHI,TF等7个位点检测到多态性。多态位点百分比P=0.2121,平均杂合度H=0.1027.结果表明撒坝猪的血液蛋白多态程度较高,反映在蛋白质水平上的遗传多样性较为丰富。     

饲粮不同蛋白质、能量水平对大白鼠生长发育及体成分的影响

本试验所用动物为53—57日龄雄性大白鼠(sprague——Dawley品系),初始体重为121.73±3.95g,试验期为大白鼠生长发育旺期的21天。试验拟研究不同粗蛋白水平(10％、15％、20％、25％和30％)及两个能量水平(消化能:3.6和3.9kcal/g)的饲粮对大白鼠生长发育及各种体成分的影响。结果表明,当饲粮蛋白质供应充分时,大白鼠生长随饲粮能量浓度的提高而改善;而当饲粮蛋白质供应感觉不足时,提高能量浓度对生长无益。机体各项成分指杯中,以蛋白质、脂肪、水分沉积受饲粮蛋白质,能量浓度影响显著;而蛋白质、脂肪沉积在很大程度上受饲粮能朊比的影响,饲粮中添加脂肪可使大白鼠机体肥胖。