鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立和应用

为建立特异性和敏感性较高的鸭坦布苏病毒(DTMUV)抗体检测方法,采用原核表达系统对DTMUV E蛋白的DⅢ结构域进行了双串联融合表达,SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白大小约25 Ku。Western blot结果显示,经亲和层析纯化的重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组DⅢ蛋白作为包被抗原,初步建立了检测DTMUV血清抗体的间接ELISA方法。采用梯度稀释法对ELISA各种反应条件进行优化,确定最适工作条件。重组抗原最适包被浓度为5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶100,兔抗鸭酶标抗体最适稀释度为1∶1000;抗体临界值S/P≥0.336判定为阳性,S/P≤0.287判定为阴性,介于两者之间为可疑。该方法检测禽流感病毒、鸭源新城疫、鸭甲肝病毒、鸭圆环病毒、鸭细小病毒、经典呼肠孤病毒及新型鸭呼肠孤病毒等血清均为阴性,4个批次批内与批间重复试验的OD值变异系数分别为6.21%~7.27%和3.4%~7.2%,显示该法具有很好的特异性、稳定性和重复性。用建立的间接ELISA与中和试验分别对108份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,两种方法的阳性符合率为83.3%。     

高产纤维素酶菌株的微波诱变及筛选研究

为了能够选育出一株高产纤维素酶的优良菌株,采用微波对其孢子悬液进行不同时间的辐照处理后,筛选出一株能高产纤维素酶的突变菌株B40 1,在最适产酶条件下,该突变菌株所产纤维素酶的滤纸酶活力和羧甲基纤维素酶活力分别是出发菌株的169.9%、110.0%。     

鹿血清蛋白抗氧化肽体外抗氧化性及其机理研究

在碱性蛋白酶最适条件下水解鹿血清蛋白,水解时间为0~5 h,鹿血清蛋白抗氧化肽的水解度(DH)随着水解时间增加而增加(P0.05),鹿血清蛋白抗氧化肽还原能力、清除自由基的作用和Cu2+螯合能力随着水解时间的增加而显著提高(P0.05),鹿血清蛋白抗氧化肽能有效抑制硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)生成(P0.05)。结果表明,鹿血清蛋白抗氧化肽的抗氧化活性取决水解时间,鹿血清蛋白抗氧化肽是有效的抗氧化剂。     

酒糟营养成分检测及其酶水解研究

文章测定了采自甘肃世纪金徽酒业集团公的酒糟营养成分,并对其进行了酶水解研究.结果表明：酒糟中蛋白质、淀粉和粗脂肪含量分别为14.03％、13.7％和3.4％,并富含维生素B族,其中维生素B6含量高达0.3 g/kg.矿物质元素钙、镁、锌、铁含量均远远高于其他常见粮食.含有的18种氨基酸中,必需氨基酸占总氨基酸的30.27％,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值43.40％.氨基酸比值系数法评价表明,该酒糟中必需氨基酸种类齐全,比值系数分（SRC）63.37,比例均衡.酶解结果表明,蒸汽加热处理（121℃,10 min）后酒糟的酶解效果优于超声波（400 W,15 min）处理,酶添加顺序为先加纤维素酶,后加糖化酶,酶添加量分别为纤维素酶（2 000 U/g纤维素）和糖化酶（1 000 U/g淀粉）,该条件下还原糖含量达49.75 mg/mL.     

可移动遗传元件相关的ESBLs基因传播机制研究

超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum betalactamases,ESBLs)是一类能够赋予细菌对多种β-内酰胺类抗生素和单酰环类抗生素耐药的酶类,许多革兰氏阴性菌,如肠杆菌科、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌等均可以产生不同类型的ESBLs,如TEM、SHV、CTX-M等类型,还有一些较少报道的VEB、GES和PER型[1]。细菌可以通过多种途径获得这些ESBLs基因,其中转座子、整合子、接合性质粒等可移动遗传元件在捕获和转移这些     

羊口蹄疫O-Asia I型二价灭活疫苗免疫效果分析

为了解口蹄疫疫苗免疫效果,本实验在山西省某羊场随机选取羔羊,2009-2012年,使用当年5个厂家生产的口蹄疫疫苗,跟踪观察监测口蹄疫O—AsiaI型二价灭活疫苗免疫消长情况。结果表明：疫苗安全可靠,未有明显的过敏反应,在实际应用中都达到了国家规定的免疫合格率,口蹄疫疫苗免疫效果逐年提高,O型与AsiaI型免疫抗体呈现了一高一低、一快一慢的现象。羔羊在免疫后3个月及时检测免疫抗体水平,确定再次免疫时间。     

南极磷虾体内胰蛋白酶的纯化及性质研究

以南极磷虾(Euphausia superb)为研究对象,通过硫酸铵分级沉淀、Phenyl-Sepharose疏水层析、DEAE-Sepharose FF离子交换层析等方法,从南极磷虾体内分离纯化出胰蛋白酶。其纯化倍数为5.44倍,比活力为38.3 U/mg,得率为26%。SDS-PAGE电泳结果显示,该酶的分子质量为28 ku。蛋白酶最适温度为37℃、最适pH为7.5,Mg2+、Ca2+、Mn2+对南极磷虾蛋白酶具有激活性,Zn2+、Cu2+、Fe3+具有酶活抑制性,其中Cu2+的抑制性最强。酶的动力学实验结果表明,以BApNA为底物测得Km为0.073 mmol/L,Vmax为1.44×10-2mmol/L·s,kcat为0.6S-1,kcat/Km为8.22×103,PMSF作为蛋白酶抑制剂,对南极磷虾蛋白酶作用机制为不可逆抑制。     

天津工业生物所发现一个新型耐热普鲁兰酶

正普鲁兰酶是一种重要的工业用酶,可专一水解直链淀粉中的a-1,6-糖苷键,大量应用于淀粉糖化生产过程中,在高直链淀粉、高葡萄糖浆、高麦芽糖浆和干啤酒等生产中也具有广泛的应用。中科院天津工业生物技术研究所宋诙研究组从我国云南腾冲地区轮马热泉的淤泥中分离     

蓝舌病及共防制研究进展

动物蓝舌病是由蓝舌病毒(Bluetongue disease virus，BTV)引起的病毒性传染病。由库蠓传播，以晚夏及早秋发病率最高。主要侵害绵羊，牛和其它反刍动物为亚临床感染，需依靠实验室诊断才能确诊。其监测与诊断技术包括病毒分离鉴定、间接免疫荧光(IFAT)和抗原捕获酶联免疫吸附试验(Antigen Capture-ELISA)抗原检测体系；RT—PCR病毒RNA检测；AGID、Competitive-ELISA、血清中和试验(SN)或CF病毒抗体检验体系。目前只有弱毒苗已被商业化且在几个国家被有效的使用。     

怀头鲇的乳酸脱氢酶和脂酶同工酶分析

用水平淀粉凝胶电泳仪对怀头鲇肌肉和肝脏的乳酸脱氢酶（LDH）以及肝脏的酯酶（EST）进行了电泳。肌肉和肝脏的乳酸脱氢酶（LDH）都只有1条酶带，肝脏的酯酶（EST）有2条酶带。表明怀头鲇的LDH由一对等位基因上的一个位点所控制，EST由一对等位基因上的二个位点所控制。