黑曲霉木聚糖酶曲盘发酵及其粗酶性质研究

为研究黑曲霉菌株(Aspergillus niger)XZ-3S曲盘发酵木聚糖酶条件及所产粗酶的性质,采用曲盘(大小φ20cm×4cm)进行固态发酵条件研究,并对所产粗酶进行酶学性质测定。结果表明:在培养基干料100g、初始料水比1∶1.7、初始pH自然状态、相对干物料接种量10%、中间定时翻曲补水和28℃连续培养60h条件下,酶活力最高可达24 380IU/g干曲;粗酶最适反应pH5.0,最适温度50℃;温度低于50℃、pH3.0~8.0的条件下酶较稳定;EDTA(活性物质)、Cu2+、Co2+对酶有明显的激活作用,Pb2+、Mg2+、Fe2+、Mn2+、Ca2+、Fe3+、Al 3+对酶有不同程度的抑制作用。     

响应面法优化黑曲霉（Aspergillus niger）SW06 产果胶酶发酵培养基条件

对果胶酶高产菌株黑曲霉(Aspergillus niger)SW06进行液体发酵工艺条件优化.首先采用单因素试验设计果胶酶发酵的最适温度和pH值,并筛选了最适的碳源、氮源和无机盐.在此基础上,采用中心组合设计进行回归分析及响应面分析,确定培养基的最佳组合.结果表明,果胶酶发酵的最适温度为28℃,最适pH值为5,最适碳源、氮源分别为果糖、蛋白胨.回归分析得到的优化发酵条件为:100 mL培养基中含果糖4.89 g、蛋白胨0.50 g、果胶0.60 g.在最优条件下发酵,果胶酶活最高可达4 175.65 U/mL.     

2株黑曲霉原生质体的形成和再生过程观察

在相差显微镜下详细观察了２株黑曲霉在最适条件下形成原生质体及其再生的过程。结果表明，黑曲霉的原生质体均能从菌丝体的顶端及其它部位释放出来。释放的原生质体呈球形，大小不一。在多数原生质体现人均能地看见含有１个巨大的液泡。原生质体再生同时存在２个形式；一是先从原生质原生１个突出物，随后逐渐增大并延伸成１条旋绕的无隔菌丝，继续发展成为有隔的下沉菌丝；第二谋划 由酵母状细胞生效边发育成正常菌丝。     

黑曲霉A-1发酵啤酒糟生产富酶蛋白饲料的研究

以啤酒糟为主要原料,研究了黑曲霉A-1固态发酵生产富酶蛋白饲料的培养基及工艺条件。试验结果表明:最适发酵培养基为啤酒糟:棉粕比例为5:5,KH2PO40.2%,最适发酵条件为:料水比为1:1.0,接种量为含4.0×106个孢子的孢子悬液,发酵温度为30℃,培养时间为54h～60h,纤维素酶达到1991u/g,木聚糖酶达到1998u/g,酸性蛋白酶达到4559u/g,粗蛋白为37.4%。     

应用泛特津试剂盒提取染色体DNA的方法

采用一种简单、快速、安全、无污染的方法，从黑曲霉细胞中提取基因组DNA，以满足各种目的的PCR、Southern印迹的分析要求。该方法可在短时间内制备大量样品，浓度高、质量好，操作简单，实用，推广性强。     

β-葡萄糖苷酶产生菌的选育及其性质研究

[目的]筛选β-葡萄糖苷酶高产菌株,确定产酶的最佳工艺条件。[方法]利用几种黑曲霉进行产β-葡萄糖苷酶的筛选,得到1株β-葡萄糖苷酶高产菌株黑曲霉3.316。通过单因素和正交试验,确定产酶的最佳工艺条件,研究不同碳源(麸皮、可溶性淀粉、豆粕和米糠)在相同碳源浓度(2%)及相同发酵条件下对β-葡萄糖苷酶活力的影响。[结果]β-葡萄糖苷酶高产菌株的最佳产酶工艺条件为:麸皮2%,蛋白胨0.1%,KH2PO40.1%,初始pH值6.0。测得酶活力为152.20 U/mg。β-葡萄糖苷酶酶学性质的测定结果表明,反应液浓度为0.1 mol/L醋酸缓冲液时酶活力最高,最佳反应温度为55℃,pH为5.0。[结论]不同碳源对产酶有较大影响,麸皮做碳源时产酶最高。     

黑曲霉TH-2蔗糖酶的分离纯化及部分性质研究

实验室保存的菌种黑曲霉TH-2经柠檬酸-磷酸缓冲液抽提,DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析,得到电泳纯的蔗糖酶.纯化后的蔗糖酶比活为135.90 U/mg,回收率为37.7%,提纯倍数为20.3倍.测得酶的相对分子质量为1.29×105,最适温度为65℃,最适pH值为4.4.以不同浓度蔗糖为底物测得Km值为23.1 mmol/L.Ag+对其活性有很强的抑制作用,而Zn2+,Cu2+,Mn2+对其有激活作用.     

黑曲霉原生质体形成与再生影响因子的研究

运用正交试验设计研究酶系统、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂等因素对黑曲霉原生质体形成与再生的影响,确定黑曲霉原生质体形成与再生的最佳条件,获得高产原生质体,其浓度可达3.0×106个/mL,再生率达25%以上。并于欧林巴斯相差显微镜下观察了黑曲霉原生质体的形成过程。     

流加氨水提高木聚糖酶活力初步研究

用正常产酶培养基和流加氨水产酶培养基培养Aspergillus niger J506,测定木聚糖酶的活性、酸性蛋白酶的活性和pH值。结果表明,用正常培养基培养时,木聚糖酶的活性在78~82 h达到产酶高峰,酶活力为226 U/mL。流加氨水培养,发酵液的pH值控制在4.0以上,木聚糖酶活力在86~90 h达到产酶高峰,活力为319 U/mL,比正常发酵提高了41.15%;而流加氨水条件下酸性蛋白酶活性从64 h开始比正常培养有明显降低。蛋白酶活力的降低和木聚糖酶活力的提高可能有一定关系。     

耐高酸柠檬酸高产菌种的驯化及筛选

选取发酵良好的薯干醪柠檬酸发酵液，通过酸度驯化与筛选，得到两株优良菌种，耐酸、发酵产酸性能优于原菌种Co827黑曲霉。