氯霉素人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

将氯霉素以重氮化方法使之分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、人血清白蛋白(HSA)载体蛋白连接,三种偶联物选择其中两个分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验熏结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与氯霉素反应明显熏与其他类似物交叉反应不明显。     

氯霉素残留的危害及其检测方法

氯霉素属广谱抗生素 ,曾在畜牧业中广为应用。但氯霉素有较强的副作用和毒性作用 ,如果氯霉素在食用动物中残留 ,可通过食物链传给人类 ,长期微量摄入氯霉素 ,不仅使人体肠道正常菌群失调 ,而且还会引起多种疾病 ,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物 ,并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。对于氯霉素的残留 ,存在多种检测方法 ,不同的检测方法具有不同的检出限。检测限问题已成为关注的焦点 ,发达国家对检出限的要求越来越严格     

高灵敏度酶联免疫法快速检测动物源性产品中氯霉素残留的研究

本试验旨在应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物组织中氯霉素的残留。根据试剂盒操作说明对样本进行前处理,样品中的氯霉素与氯霉素酶结合物竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体,根据酶催化显色剂显色的深浅来判断样品中氯霉素含量。试验结果显示,该方法对样品的检测限在0.1 μg/kg以下;以20~300 ng/kg浓度的氯霉素添加到动物源性产品中,其回收率范围74.4%~105.4%;变异系数在15%以下。结果表明建立的ELISA试剂盒能满足检测动物源性产品中氯霉素残留的需要。     

抗氯霉素单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立

用人工合成的氯霉素-卵清蛋白(CAP-OVA)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选出1株能稳定传代并分泌抗氯霉素(CAP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞4C9,并以此制备腹水单抗.经间接竞争ELISA(ciELISA)检测,该单抗亚类重链类型是IgG1,轻链为κ类型,单抗腹水效价为1∶1×106,与甲砜霉素、氟甲砜霉素以及其他常见抗生素的交叉反应率小于0.01%.用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记单抗,建立了CAP直接竞争ELISA(cdELISA)方法.此法检测的线性范围为0.1~100 ng·mL-1,半数抑制浓度(IC50)为5.81 ng?L-1.添加回收实验表明所建立的CAP cdELISA方法检测限达到0.1 ng·L-1,对比试验表明其检测灵敏度与商品试剂CAP ELISA基本相当.     

抗氯霉素单克隆抗体的制备及鉴定

用人工合成的氯霉素-人血清白蛋白(CAP-HSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术建立了1株分泌抗CAP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞1F9.经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目84～96条,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1256,诱生小鼠腹水的抗体效价可达16×105.该细胞连续培养生物学性状稳定,竞争间接酶联免疫吸附试验(ciELISA)显示,其与供试抗生素交叉反应小,表明该单抗具有较大的应用价值.     

Review of some pharmacokinetic and pharmacodynamic properties of anti‐infective medicines administered to the koala (Phascolarctos cinereus)

Although koalas are iconic Australian animals, no pharmacokinetic studies of any first‐line medicines used to treat diseased or injured koalas had been published prior to 2010. Traditionally, medicine dosages suggested for this species underwent linear extrapolation from those recommended for domesticated species. The koala, a specialist folivore whose natural diet consists of almost exclusively Eucalyptus spp. foliage has anatomical and physiological adaptations for detoxifying their diet which also affect medicine pharmacokinetic profiles. This review addresses aspects of medicine absorption, clearance, and other indices (such as medicine binding to plasma proteins) of enrofloxacin/marbofloxacin and chloramphenicol used for the systemic treatment of chlamydiosis, and fluconazole ± amphotericin, and posaconazole for the treatment of cryptococcosis. Based on observations from published studies, this review includes suggestions to improve therapeutic outcomes when administering medicines to diseased koalas.     

氯霉素与4-乙烯基吡啶分子印迹体系的理论优化与制备

以氯霉素(CAP)为印迹分子,4-乙烯基吡啶(4-Vpy)为功能单体,分别以乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)、季戊四醇三丙烯酸酯(PETA)和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)为交联剂,采用密度泛函数理论(DFT)的ωB97XD/6-31G(d,p)方法,模拟了CAP与4-Vpy的相互作用,探讨二者在不同摩尔反应比例时形成稳定复合物的空间构型并确定了最佳摩尔反应比例;依据交联剂分别与印迹分子、功能单体间的结合能优化了交联剂。计算结果表明:CAP与4-Vpy摩尔反应比为1∶4时,以PETA为交联剂时形成的有序复合物氢键数目最多,复合物构型最稳定。Scatchard分析结果表明,在研究浓度范围内CAP-MIPs对CAP仅存在一种结合位点,最大表观吸附量为73.97 mg/g。     

气相色谱法测定水产品中氯霉素残留前处理方法的比较

研究了气相色谱法测定水产品肌肉组织中氯霉素残留的前处理方法.在综合分析比较现有国内外有关气相色谱法及气-质法检测动物源性食品中氯霉素残留前处理方法的基础上,对加标溶剂选择及样品提取方式、净化方法、SPE小柱活化方法对回收率的影响,硅烷化的时间等进行了比较研究.结果表明用蒸馏水作加标溶剂,回收率高,平行性较好,可代替甲醇作为加标溶剂.采用乙酸乙酯作为提取剂,用正己烷脱脂,水溶液直接过SPE小柱(小柱依次用5mL甲醇和5mL水活化)净化,硅烷化试剂衍生20～30min后测定的前处理方法,步骤少,试剂省.该方法0.1～20 μg·kg-1加标水平的回收率为67%～115%,适合水产品中氯霉素残留分析.     

氯霉素在菲律宾蛤仔体内生物富集和残留消除规律的研究

在半静态条件下,研究了氯霉素在菲律宾蛤仔体内富集和消除规律。试验结果表明:菲律宾蛤仔对水体中氯霉素的富集能力较低,内脏团和肌肉部分的富集系数1.8;氯霉素的蓄积量随时间的延长和给药浓度的增加而增加,在6~8 d可趋平衡;各部位的富集和消除情况存在明显差异,内脏团的富集速度快于肌肉,肌肉的生物学半衰期长于内脏团。     

氟苯尼考水溶性油剂对人工诱发鸡大肠杆菌病的疗效

目的:观察氟苯尼考水溶性油剂对实验性鸡大肠杆菌病的临床疗效.方法:采用试管二倍稀释法测定氟苯尼考与氯霉素对质控菌ATCC25 922、试验菌O78和临床分离的72株耐氯霉素大肠杆菌的体外抗菌活性;180只22日龄海兰褐蛋雏鸡人工诱发大肠杆菌病后,随机分为3个不同剂量氟苯尼考组(150 mg/L、100mg/L和50 mg/L)、氯霉素组(200 mg/Kg)、健康对照组和感染对照组,每组30只,按设定剂量连续口服给药3d,统计各组的治愈率和增重.结果:表明质控菌和O78对氟苯尼考、氯霉素均敏感,72株耐氯霉素临床分离菌株对氟苯尼考的敏感率为68.1%;氟苯尼考高、中、低剂量组及氯霉素组对鸡大肠杆菌病的治愈率分别为96.7%、93.3%、90%及83.3%,而感染对照组鸡的死亡率为63.3%;各用药组的增重效果极显著高于感染对照(P<0.01).结论:说明氟苯尼考对耐氯霉素的大肠杆菌仍然有较高的敏感率以及水溶性油剂对临床大肠杆菌病疗效显著.